自养小球藻（Chlorella autotrophica）多糖体外抑菌活性的初步研究

选取了自养小球藻(Chlorella autotrophica)为研究对象,以超声辅助提取法进行硫酸多糖提取,所得粗多糖采用凝胶法在AKTA系统下进行分离纯化得到PCA2-1及PCA2-2共2种硫酸多糖,电泳及HPGFC法检验结果表明所得硫酸多糖的均为均一多糖。选取了4种在海洋环境或医学中常见的菌株为作为受试菌株,分别进行了PCA2-1和PCA2-2抑菌活性的初步实验,其中大肠杆菌抗生素检定株(Escherichia coli)和解藻朊酸弧菌(Vibrio alginolyticus)为革兰氏阴性菌,表皮葡萄球菌(Staphytococcus epidermidis)和溶壁微球菌(Micrococcus lysodeikticus)为革兰氏阳性菌。所得结果表明,这2种多糖均对某种特定的菌株表现出一定的抑制作用。其中,PCA2-2对溶壁微球菌和解藻朊酸弧菌有较强有抑菌作用,KI值可达70%以上。     

自养小球藻硫酸多糖的红外光谱分析

利用二乙胺基乙基琼脂糖凝胶柱层析纯化自养小球藻(Chlorella autotropica)粗多糖,得到3个硫酸多糖组分(A,B,C);利用高效液相色谱仪和熔点仪测定了3个多糖的分子质量和熔点;利用BaCl2浊度法测定了硫酸多糖中硫酸根的质量分数;利用傅立叶变换红外光谱分析了海水自养小球藻3个硫酸多糖组分的环状结构、半缩醛羟基构型及取代基类型。结果显示,3个硫酸多糖组分的硫酸根的质量分数分别为0.77%,8.46%,2.69%,3个组分均含有硫酸基、酰氨基,葡萄糖是3个硫酸多糖组分的主要组成单糖;3个硫酸多糖组分组成单糖的环构型均是吡喃环,成苷的半缩醛羟基构型有一定差异,A是α构型,B、C是α、β两种半缩醛羟基构型并存。为深入研究自养小球藻硫酸多糖的结构及抗癌活性提供基础。     

海洋微藻多糖提取纯化条件的研究

研究了提取介质、超声条件和洗脱条件对海洋微藻多糖提取纯化效果的影响。实验结果表明不同pH的提取介质可以提取得到不同种类的多糖，超声条件以300W、20min最佳，用葡聚糖凝胶Sephadex-G200柱(长50cm，直径2cm)纯化粗多糖，当加样量为4ml，用0．2mol／L NaCl溶液洗脱效果最好。     

海洋微藻多糖微波提取法研究

选取自养小球藻(Chlorella autotrophica)为实验材料,采用微波法提取多糖,以温度、时间、pH以及微波功率4个因子建立正交实验,考察单因素影响情况。实验结果表明,在温度70℃、时间30min、pH为7、功率为600W条件下粗多糖的产率最高,为291.13mg/g(粗多糖/干重),远高于传统热水浸提法所得粗多糖产率(78.52mg/g,粗多糖/干重),且所得粗多糖与热水浸提法获得的粗多糖具有相似的红外光谱。说明,在一定的实验条件下,与热水浸提法相比,微波提取法不仅不会破坏多糖的结构,还有耗时短、有较高的多糖产率的优势。     

沉积物中磷的存在形态及其生物可利用性研究

用MgCl₂,NaOH和HCl对大亚湾的大鹏澳、南海的珠江口、厦门湾的胡里山沉积物进行了逐级提取和总磷分析,并以这3种沉积物为惟一磷源培养小球藻和球等鞭金藻,估算了藻类对沉积物中磷的可利用量.结果表明,3种沉积物总磷含量分别为449.3,650.1和643.9mg/kg;MgCl₂和NaOH提取的生物可利用的非磷灰石无机磷分别为168.8,146.6和118.1mg/kg.非磷灰石无机磷占总磷的18.3%～32.6%.3种提取剂对3种沉积物提取的磷是HCl提取相最大,NaOH提取相次之,MgCl₂提取相最小.小球藻和球等鞭金藻在3种沉积物中的最大相对生长率为4.3%～26.9%,两种藻在3种沉积物中的生长与非磷灰石无机磷和藻类可利用的颗粒磷量相对应.颗粒磷占非磷灰石无机磷的42.4%～78.2%,占沉积物中总无机磷的21.1%～27.1%,占总磷的11.8%～20.3%.     

4种不同来源浒苔中多糖的提取分离及理化性质

为探讨不同季节以及不同地点采集的浒苔其多糖理化性质差异,采用水提醇沉法对黄海海域青岛沿海春(原料1)秋(原料3)两季采集的浒苔、2008年夏季爆发浒苔(原料2)以及东海海域福建沿海采集的浒苔(原料4)的多糖进行了提取,得到了4种冷水提取多糖PC1-4和4种热水提取多糖PH1-4。分别对8种浒苔多糖利用Q-Sepharose Fast Flow离子交换色谱法纯化后得到了12个组分。对各组分的总糖含量、糖醛酸含量、硫酸根含量以及蛋白含量进行了测定,利用气相色谱法测定了单糖组成,结果显示不同季节不同海域采集样品的化学组成及单糖组成不同。     

黄丝藻细胞代谢物提取方法的比较研究

利用代谢物组学技术有助于更为深入地了解不分枝丝状微藻黄丝藻细胞的生物学特性。本研究比较了3种黄丝藻细胞破碎方法(冻融法、超声破碎法、液氮研磨法)以及基于气相色谱-质谱联用技术的3种黄丝藻代谢物提取系统(冷甲醇、热乙醇、甲醇/氯仿法),以期为黄丝藻细胞的代谢组学分析奠定基础。结果显示:液氮研磨法处理下的黄丝藻细胞破碎效果最佳;根据提取到的代谢物的种类角度出发,冷甲醇法的提取效果要明显优于其他2种提取方法。在黄丝藻细胞中共检测到40种代谢物,包括9种氨基酸、17种有机酸、12种糖类和2种醇类物质。     

梅花参中多糖提取工艺及含量测定的研究

采用正交设计L9（34）,研究梅花参（Thelenota ananas）中多糖的提取工艺,探讨并建立了测定海参多糖含量的方法.结果表明：最佳提取条件为1g样品加40mL 3%KOH溶液,40～45℃超声2h;且提取温度为首要的影响因素;产物经二次乙醇纯化的结果较好,粗多糖得率20.25%.多糖经单糖组成分析,岩藻糖含量达到70%以上.测得梅花参中总糖含量8.79%;糖醛酸含量0.95%.该实验操作简单,稳定可靠,重现性好,准确度高,为测定其它海参中多糖的含量提供了可靠的依据.     

GC-MS联合二维核磁对文蛤多糖Fr.2A组分结构的解析

采用GC-MS联合二维核磁的方法,对文蛤均多糖结构进行解析。运用双酶辅助水提的方法,提取文蛤粗多糖(MMPX),分离纯化得到文蛤均多糖,并通过气质联用技术(GC-MS)和核磁共振波谱(1D,2D NMR),对文蛤均多糖的结构进行了分析。结果表明,从文蛤中提取得到文蛤粗多糖(MMPX),经分离纯化得到高纯度文蛤均多糖Fr.2A,其单糖组成为葡萄糖(Glc)。GC-MS分析发现,Fr.2A存在三种残基单元1,4-Glcp、T-Glcp和1,4,6-Glcp,摩尔比为5.58︰1.26︰1.0;核磁共振波谱分析表明,Fr.2A是以α-(1→4)与少量α-(1→6)连接为主链,并存在少量的α-(1→6)和β-(1→4)支链的新型水溶性D型吡喃葡聚糖。     

小球藻EC04产胞内多糖条件优化及抗氧化活性研究

小球藻胞内多糖等活性物质具有多种重要生物活性和生理功能。为提高小球藻EC04胞内多糖的产率, 采用单因素实验和L₉(3 ⁴)正交实验优化对其培养条件进行优化。在暗光比12∶12、温度24±1℃和2000Lux光照条件下, EC04产胞内多糖的最佳条件为: MgSO₄·7H₂O浓度112.5mg·L ^-1, K₂HPO₄浓度60mg·L ^-1, NaNO₃浓度1.2g·L ^-1, 维生素B₁浓度0.5mg·L ^-1, 维生素B₁₂浓度0.1μg·L ^-1。在此条件下, EC04产糖率为271.74mg·g ^-1, 细胞密度为48.027×10 ⁶cells·mL ^-1, 与基础培养基相比分别提高了97.49%和34.91%。添加VB₁、VB₁₂等也在不同程度上影响小球藻胞内多糖产率。对所提取胞内多糖进行抗氧化活性初探, 结果表明其具有一定的自由基的清除能力, 对DPPH·(1-二苯基-2-三硝基苯肼)和·OH(羟自由基)的最大清除率分别达到了82.32%和64.27%。