红笛鲷头肾和脾脏显微结构的观察

通过对红笛鲷头肾和脾脏显微结构的观察发现，头肾表面覆盖有一薄层纤维结缔组织性被膜，未见明显的小梁．实质主要由淋巴组织和血窦构成，可分为两个区，A区淋巴组织排列成索状，环血管呈放射状分布；B区的淋巴细胞则以形成弥散性分布淋巴组织为特征．主要细胞有各种血细胞、巨噬细胞和一些其他的颗粒细胞等，未见明显的巨噬细胞聚集中心及粒细胞聚集中心．脾脏被膜较薄，未见明显的小梁，实质由白髓和红髓相间排列组成．白髓中未见明显的脾小结、淋巴鞘结构，红髓由脾索和脾窦构成．研究结果表明：红笛鲷的头肾和脾脏是硬骨鱼类机体造血的主要器官，又是鱼类重要的免疫器官．     

香鱼(Plecoglossus altivelis)脾脏酪氨酸激酶SYK的鉴定及其介导的MAPK信号通路研究

脾脏酪氨酸激酶(SYK)是一种非受体型酪氨酸激酶(non-receptor tyrosine kinase, NRTK)。在哺乳动物中,SYK是重要的细胞信号通路接头分子,其在免疫细胞活化,胞外刺激的信号转导和病原体识别等多种生命过程中扮演重要角色,然而在鱼类中却鲜有报道。本研究以香鱼(Plecoglossus altivelis)为研究对象,探讨了其SYK(PaSYK)在应对病原微生物感染及在活化免疫信号通路中的作用。我们克隆获得了香鱼SYK的cDNA序列,并利用多重序列比对、构建进化树等生物信息学方法分析PaSYK的进化地位;采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)方法分析PaSYK在健康组织及鳗弧菌(Vibrio anguillarum)感染后的表达变化;亚细胞定位检测PaSYK在HEK293T细胞的分布情况;在香鱼头肾单核/巨噬细胞(Monocyte/macrophage,MO/MΦ)中过表达PaSYK,研究其对炎症细胞因子表达的调控作用并在HEK293T细胞及香鱼头肾MO/MΦ中研究PaSYK对MAPK信号通路的活化作用。多重序列比对结果显示,SYK的蛋白质序列和结构域在进化过程中是高度保守的。系统进化树结果表明, PaSYK与河鳟的亲缘关系密切。RT-qPCR结果表明, SYK基因mRNA在检测的所有组织中均有表达,鳗弧菌感染后免疫相关组织中PaSYK表达量均上调。此外,PaSYK能显著诱导香鱼头肾MO/MΦ中促炎因子TNF-α和IL-1β的表达,但对抑炎因子TGF-β和IL-10的表达起到略微的抑制作用。Western blot结果证明PaSYK可以激活MAPK信号通路。综上所述, SYK分子在进化上高度保守,香鱼SYK与其哺乳动物中的同源物具有保守的功能,均能活化MAPK信号通路并在炎症反应中发挥作用。     

方格星虫多糖对小鼠免疫活性的影响

研究了方格星虫多糖对小鼠免疫功能的影响。结果表明:方格星虫粗多糖(CSG)能够对抗环磷酰胺引起的小鼠胸腺萎缩和脾萎缩,明显拮抗白细胞减少,对正常小鼠免疫器官没有明显的增重作用;对正常小鼠腹腔巨噬细胞吞噬中性红能力有显著的增强作用。方格星虫多糖粗品(CSG)和精制多糖(SG1和SG2)能够促进小鼠脾淋巴细胞增殖,且能与ConA协同作用。     

加味归芍异功散联合西药四联疗法治疗幽门螺杆菌相关性慢性胃炎30例

目的：观察加味归芍异功散合西药四联疗法治疗脾胃虚弱型幽门螺杆菌（Hp）相关性慢性胃炎的临床疗效。方法：将60 例Hp相关性慢性胃炎脾胃虚弱证患者按照随机数字表法分为治疗组和对照组,每组各30 例。治疗组采用加味归芍异功散合西药四联疗法治疗,对照组仅采用西药四联疗法治疗,比较2组的中医证候疗效、Hp根除情况、中医证候评分（胃脘隐痛、胃脘胀满、乏力、纳呆、气短、大便稀溏）以及不良反应发生情况。结果：中医证候疗效总有效率治疗组为100.00%（30/30）,对照组为93.34%（28/30）,2组比较,差异有统计学意义（P<0.01）;Hp根除总有效率治疗组为100.00%（30/30）,对照组为80.00%（24/30）,2组比较,差异有统计学意义（P<0.05）;2组治疗后中医证候各项评分均较治疗前下降,且治疗组下降幅度较对照组更大（P<0.05）;不良反应发生率治疗组为6.67%（2/30）,对照组为20.00%（6/30）,组间比较,差异无统计学意义（P>0.05）。结论：加味归芍异功散合西药四联疗法治疗Hp相关性慢性胃炎脾胃虚弱证的临床疗效优于单用四联疗法,值得临床推广应用。     

脾脏肿瘤的CT表现及鉴别诊断

目的：探讨脾脏肿瘤的CT表面及其诊断价值。材料与方法：搜集22例经病理和临床证实的脾脏肿瘤的CT资料，包括脾血管瘤2例，脾淋巴这瘤1例，脾错构瘤1例，恶性淋巴脾侵润4例，脾转移瘤14例，均行平扫加强化，对其CT表现进行回顾性分析。结果CT对脾脏肿瘤检出率高，对病变大小，形态，密度及脾周围组织器官的显示较其它影像学检查更准确。结论 CT可作为首选的影像学检查手段，对其定性诊断有较高价值。     

《卫生宝鉴》中治疗脾胃病方剂用药规律

目的：基于数据挖掘分析《卫生宝鉴》中治疗脾胃病方剂的用药规律。方法：运用中医传承辅助平台（TCMISS）V2.5,采用频次统计、关联规则和聚类分析等数据挖掘方法,对《卫生宝鉴》中所载脾胃病的用药规律进行分析。结果：共收集处方151首,中药168味。频次≥17次的中药有21味,排前5位的依次是陈皮、白术、炙甘草、木香、干姜;温性中药使用频次最高,其次是寒性、平性中药;辛味药出现最多,其次是苦味、甘味药;排前5位的中药归经依次是脾、胃、肺、大肠、心经;频次≥14次的中药组合24个,对药物组合进行关联规则分析得到中药组合17个;聚类分析得到新方聚类的中药组合5组,对应新方组合5组。结论：通过中医传承辅助平台分析得出,《卫生宝鉴》中所载治疗脾胃病的处方注重甘辛温补、健脾消滞,慎用苦寒药,该研究结果可为临床治疗脾胃病开发新药物提供一定的参考     

基于数据挖掘分析《类证治裁》治疗脾胃病的用药规律

目的：基于数据挖掘分析林珮琴《类证治裁》治疗脾胃病的用药规律,为中医药治疗脾胃病及新方研发提供参考。方法：运用中医传承计算平台构建《类证治裁》治疗脾胃病的方剂数据库,并对其进行用药频次、性味、归经、功效、高频组合与核心组合的分析。结果：共纳入方剂123首,涉及药物142味。用药频次≥20次的共8味,其中甘草应用频次最多。四气以温、寒、平为主,五味以甘、苦、辛为主,归经以脾、肺、胃为主。药物功效以补虚类为主。通过关联规则分析得到药物高频组合16组,通过聚类分析得到药物核心组合3组。结论：林珮琴治疗脾胃病始终秉持“以补益脾胃为本”的理念,补行并重,补清兼顾,为现代中医学诊治脾胃病提供了一定的理论依据。     

Establishment of a spleen cell line from large yellow croaker Pseudosciaena crocea and its primitive application in foreign gene transfection

A large yellow croaker,Pseudosciaena crocea,spleen(LYCS)cell line was established and the feasibility of using it for foreign gene transfection was evaluaed in this study.Primary culture of LYCS cells was initiated from spleen tissue pieces,which were cultured at 25℃ in Dulbecco’s modiced Eagle medium/F12 medium(DMEM/F12,1:1)(pH7.2),supplemented with 20% fetal bovine serum,carboxymethyl chitosan,chondroitin sulfate,basic fibroblast growth factor(bFGF)and insulin-like growth factor-I(IGF-I).The cultured LYCS cells,in fibroblast shape,proliferated to 100% confluency 20 days later.Chromosome analyses indicated that the LYCS cells exhibited chromosomal aneuploidy with a modal chromosome number of 48 which displayed the normal diploid karyotype of P.crocea(6m+6sm+36t,NF=60).A LYCS cell line,with a population doubling time of 48.7 h at passage 60,has been established and subcultured to passage 70.Transgenic feasibility test demonstrated that positive green fluorescence protein(GFP)expression was observed in LYCS cells after pcDNA3.1-GFP plasmid transfection.In conclusion,a continuous foreign gene trans-fection feasible LYCS cell line has been established successfully.The cell line might serve as a valuable tool for studies of transgenic breeding and has potential applications for different kinds of cytotechnological studies.     

改良黄土汤联合奥美拉唑钠治疗急性非静脉曲张性上消化道出血55例

目的：观察改良黄土汤联合奥美拉唑钠治疗急性非静脉曲张性上消化道出血(ANVUGIB)脾胃虚弱证的临床疗效。方法：将105 例ANVUGIB脾胃虚弱证患者随机分为治疗组和对照组。对照组50 例采用奥美拉唑钠治疗,治疗组55 例在对照组治疗的基础上加用改良黄土汤治疗。观察2组的综合疗效、止血效果、止血时间、输血量及血清白细胞介素-10(IL-10)水平。结果：总有效率治疗组为94.55%（52/55）,对照组为82.00%（41/50）,组间比较,差异有统计学意义（P<0.05）。治疗组在治疗12、24、48、72 h的止血成功率均高于对照组,止血时间均短于对照组（均P<0.05）。2组治疗72 h血清IL-10均较治疗前下降,且治疗组低于对照组（P<0.01或P<0.05）。结论：改良黄土汤联合奥美拉唑钠治疗ANVUGIB脾胃虚弱证可提高止血有效率,减轻机体炎症反应。     

红笛鲷脾脏、头肾和胸腺中IgM~+细胞与ANAE~+ T细胞的分布

采用ANAE组化方法(α-醋酸萘酯酶染色法)和ABC免疫组化方法(亲合素-生物素-过氧化物酶复合物法)分析了1龄红笛鲷成鱼的胸腺、头肾和脾脏中IgM+细胞(具有免疫球蛋白分子IgM的细胞)、ANAE+ T细胞的分布。结果表明,三个淋巴器官皆有IgM+细胞、ANAE+ T细胞;胸腺皮质区IgM+细胞数量最多,其次是头肾、胸腺髓质区、脾脏;ANAE+ T细胞以脾脏中数量居多,其次是头肾、胸腺髓质区、胸腺皮质区;ANAE+ T细胞在三个器官中多呈均匀分布,而IgM+细胞在血管、胸腺小体、黑色素巨嗜细胞中心等的外周呈密集分布。实验结果进一步证明了胸腺中的T细胞多为不成熟的T细胞,此外,还含有大量的IgM+细胞;而脾脏、头肾内的ANAE+ T细胞多于胸腺,推测胸腺成熟的T淋巴细胞迁移到头肾和脾脏。