真核藻质粒状DNA的研究进展

已在绿藻,红藻与硅藻等真核藻中发现有质粒状ＤＮＡ,其结构一般是环状或线状的双链ＤＮＡ小分子。结藻与硅藻的质粒状ＤＮＡ中有可读框架,某些ＯＲＦ有转录活性或与已知基因有明显的同源性,表明藻类质粒状ＤＮＡ是一种功能活跃的新型基因组。研究还发现质粒状ＤＮＡ是有用的分子分类标记,同时也是藻类基因工程潜在的载体。     

条斑紫菜质粒状DNA的提取与富集

以细胞为材料,用异硫氰酸胍一十二烷基肌氨酸钠作裂解液,在条斑紫菜总ＤＮＡ中直接提取到了质粒状ＤＮＡ,但其含量明显地低于高分子量的主带ＬＮＡ。总ＤＮＡ经Ｗｉｚａｒｄ树脂处理后,在低温洗 脱物的电泳图谱上质粒状ＤＮＡ带的亮度高于主带,质粒状ＤＮＡ得到了明显的富集。本文为条斑紫菜质粒状ＤＮＡ的研究提供了简便,有效的提取与富集方法。     

紫菜总DNA酶切带型的发现与比较

在条斑紫菜与坛紫菜总ＤＮＡ酶切图谱上有明显的ＤＮＡ型带,且ＨａｅＩＩＩ酶发带型经ＥｃｏｒＩ、ＰｓｔＩ的酶切带型清晰。在ＥｃｏＲＩ、ＰｓｔＩ及ＨａｅＩＩＩ三种酶切图谱上,两种紫菜的ＤＮＡ带型明显不同,且很容易发现条斑紫菜或坛紫菜特有的条带,总ＤＮＡ带型具有种的特异性。结果表明总ＤＮＡ带型是一种容易建立又稳定可靠的紫菜分子分类的新型标记。     

三角褐指藻遗传转化体系建立及绿色荧光蛋白基因表达

三角褐指藻能够大量合成并积累PUFAs,特别是EPA,有望成为工业化生产EPA的原料。以pPha-T1为基础质粒构建了含有绿色荧光蛋白基因的重组质粒pPha-GFP,采用基因枪方法转化三角褐指藻,通过抗生素(博莱霉素)筛选得到转化藻株,在蓝光的激发下,转化藻发出绿色荧光,说明绿色荧光蛋白(GFP)基因成功表达。三角褐指藻遗传转化体系的建立为该藻分子遗传学研究奠定了基础。     

DNA分子标记技术在紫菜属中的应用现状及展望

伴随着遗传学的发展，遗传标记经历了形态学标记、细胞学标记、生化标记和DNA分子标记4个阶段。DNA分子标记诞生于20世纪80年代中期，与其他遗传标记相比，它具有如下优点：（1）直接以DNA的形式表现，在生物各个组织、各个发育阶段都可以检测到，不受季节、环境限制；（2）数量极多，遍及整个基因组；（3）多态性高，自然存在许多等位变异；（4）表现“中性”，既不影响目标性状的表达，与不良性状也没有必然的连锁；     

条斑紫菜高纯度总DNA及其质粒状DNA的提取

提取条斑紫菜高纯度总DNA及其质粒状DNA的新方法。先用海螺酶处理紫菜叶状体制备细胞,然后用SDS-蛋白酶K裂解细胞提取总DNA,再用玻璃粉浆(glassmilk)对其纯化,经纯化后的总DNA能被EcoRI,Dral与HaeⅢ等限制酶完全酶切,并在酶切图谱上形成明显的DNA带型。当用异硫氰酸胍一十二烷基肌氨酸钠裂解紫菜细胞时,在总DNA提取物中直接发现有一条质粒状DNA带(2.3Kb),即建立了一种极简便的质粒状DNA提取方法。