欧洲鳗鲡肝肾病病原菌的分离与鉴定

患肝肾病的养殖欧洲鳗鲡(Anguilla anguilla)出现肝、肾肿大,且肝脏具白色溃疡灶的症状。从肝脏中分离、纯化到优势细菌,定名AL60306NA1。人工感染试验证实:向欧洲鳗鲡腹腔内注射1.0×108cfu/mL菌株悬液,实验鱼死亡率达100.0%;注射1.0×107cfu/mL,死亡率为60.0%;形态学观察、API20E细菌鉴定试剂盒鉴定实验证明菌株AL60306NA1有动力、拥有革兰氏反应阴性、氧化酶阴性、H2O2酶阳性、兼性厌氧、发酵葡萄糖产酸产气、不发酵蔗糖和蜜二糖及L一阿拉伯糖、赖氨酸脱羧酶阳性、柠檬酸盐弱阳性、产生硫化氢和吲哚、MR阳性和典型的β-溶血等特征;16S rRNA特异性基因分析鉴定实验说明克隆的AL60306NA1 16S rRNA基因部份序列为1507bp、与迟缓爱德华氏菌(AB050829.1)的同源性达99.7%。综合上述结果,确定该菌株为养殖欧洲鳗鲡肝肾病的病原菌,并鉴定为迟缓爱德华氏菌(Edwardsiella tarda)野生型。用菌株AL60306NA1感染小白鼠实验测定该菌对小白鼠的LD50为7.1×105cfu/mL,同时自该菌株PCR扩增到长度约1000bp的溶血素基因特异性片段,结果表明菌株AL60306NA1有一定的致病力。     

欧洲鳗病原菌控菌药物的研究

应用药敏纸片法测定２４种抗菌药物对欧洲鳗致病菌：非０１群霍乱弧菌、温和气单胞菌、鲁氏不动杆菌、迟钝爱德华氏菌和嗜水气单胞菌的敏感性。其中,诺氟沙星、四环素、头孢三嗪、庆大霉素、头孢噻肟抑菌能力较强。最低抑菌浓度（ＭＩＣ）和最低杀菌浓度（ＭＢＣ）测定结果表明孢三嗪对病原菌能力强。最低抑菌浓度（ＭＩＣ）和最低杀菌浓度（ＭＢＣ）测定结果表明,头孢三嗪对病原菌杀灭能力强,复方新诺明、硫酸庆大霉素对病原菌抑     

养殖的日本鳗鲡肠道中细菌的数量和组成

用稀释滴种的定量方法，分别于甘露醇卵黄多黏菌素、马铃薯葡萄糖、伊红美蓝、链球菌琼脂、CDC厌氧琼脂和营养琼脂中分离计数不同饵料投喂阶段在饱食和空腹状态下养殖的日本鳗鲡肠道中细菌的数量和组成．结果表明：在空腹状态下，其细菌数量约为10^4～10^7个／g；在饱食状态下约为10^4～10^8个／g．在空腹状态下其肠道菌群组成以厌氧菌为主，其次为大肠菌群，再者为芽孢杆菌，未分离到肠球菌．在饱食状态下其肠道菌群以厌氧菌为主，红虫投喂期其次为大肠菌群，而肠球菌占第三位；白仔料投喂期大肠杆菌、肠球菌和芽孢杆菌的数量相当；黑仔、幼鳗、成鳗期芽孢杆菌数量占第二，大肠杆菌数量占第三．在饱食和空腹状态下，其肠道菌群数量以红虫投喂期的为最高，随着养殖时间的延长，肠道菌群数量下降．     

嗜水气单胞菌控菌药物配方的筛选

应用药敏纸片法测定63种抗菌药物对ML316、B-Ah6、TPS30、9617、YT-1、YT-715、ZY00-1、CQ-1、CHS-2、HB-04、JXO1-1、A.h1、A.h标准株、B-2、ATCC7966、0081、0030、JS70322NA等18株嗜水气单胞菌的敏感性,选择敏感药物硫酸庆大霉素、硫酸阿米卡星、硫酸新霉素、盐酸米诺环素、硫酸链霉素测定最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC)。结果显示:MIC≤12.5 mg/L的药物,硫酸新霉素占61.11%,盐酸米诺环素占94.44%,硫酸庆大霉素占72.22%;MBC≤25mg/L的药物,硫酸新霉素占50%,盐酸米诺环素占72.22%,硫酸庆大霉素占55.56%,优于硫酸阿米卡星、硫酸链霉素,但硫酸庆大霉素均匀度不佳,因而硫酸新霉素、盐酸米诺环素对实验菌株抑制和杀灭能力较强;硫酸新霉素、盐酸米诺环素与增效剂甲氧苄氨嘧啶(TMP)分别以8∶2∶1和9∶1∶1比例混合配伍,加入TMP对实验菌株的MIC和MBC值较不加TMP显著下降,MIC值提高66.67%,MBC值则提高96.67%。综合原料成本,以硫酸新霉素、盐酸米诺环素与TMP比例分别为9∶1∶1为配方药物,制作药物饲料,以健康锦鲤和JS70322NA菌株为对象,开展预防和治疗临床评价实验,结果显示:配方药物具有良好的预防和治疗效果,实验组鱼体表症状不明显、临床预防和治疗实验各梯度给药剂量的死亡率均比对照组下降40%~60%。     

水蚯蚓的消毒试验

采用食盐水刺激吐脏、消毒剂杀菌、抗菌抑菌药物抑菌效果的研究，探讨水蚯的处理方法.盐度4.2～7.5的食盐水处理40～60min刺激吐脏效果较佳；消毒剂杀菌效果显著，二氧化氯最佳，其次为高锰酸钾，再者为含氯消毒剂；抗菌抑菌药物均具良好的抑菌效果，但不同药品的抑菌效果存在着较大差异.