Application of quantitative PCR method in detection of Lymphocystis disease virus China （LCDV-cn） in Japanese flounder （Paralichthys olivaceus）

Lymphocystis disease causes serious economic losses in the fish farming industry. The causative agent of the disease is Lymphocystis disease virus China (LCDV-cn), which has a wide range of hosts. Based on competitive quantitative PCR technology, we established a method to quantify the LCDV-cn in tissue. Results demonstrate that the average amount of LCDV-cn in the peripheral blood of infected flounder with evident tumors is about 106virions/ml while the average amount in those flounder with no evident tumor but cultured with the flounder with evident tumor is about 104virions/ml. No virus was found in the negative samples of flounder.     

嗜水气单胞菌脂多糖及绣球菌多糖对泥鳅免疫功能及消化功能的影响

以灭活的嗜水气单胞菌（Aeromonas hydrophila）脂多糖和绣球菌（Sparasis crispa）多糖作为免疫增强剂，对接种免疫后的泥鳅（Misgurnus anguillicaudatus）进行抗氧化性能、免疫功能及消化功能等指标进行测定。结果表明：嗜水气单胞菌脂多糖和绣球菌多糖不仅可以提高泥鳅的抗氧化性能和免疫功能，而且可以增强泥鳅的消化功能，质量浓度为1g／L的灭活嗜水气单胞菌脂多糖和9g／L的绣球菌多糖对泥鳅的作用效果较明显，能较明显地提高泥鳅抗氧化性能、免疫功能及消化功能，与注射灭活的嗜水气单胞菌脂多糖相比，9g／L绣球菌多糖对泥鳅的作用时间更持久。     

蛋白质感染因子与水产养殖

介绍了蛋白质感染因子的概念、蛋白质感染因子复制机理假说及其证明、蛋白质感染因子多样性等内容，并讨论了水产养殖动物中存在蛋白质感染因子疾病的可能性。     

赤点石斑鱼HSP60基因克隆及弧菌应激前后的组织表达特性分析

HSP60(heat shock protein 60,热休克蛋白60)作为高度保守的热休克蛋白家族的一员,不仅可以在应激状态下帮助其他蛋白正确折叠并恢复天然构象,还可作为危险信号作用于天然免疫系统.基于HSP60的EST序列设计特异引物,采用RACE技术成功克隆获得赤点石斑鱼HSP60 cDNA全序列及基因组全序列....     

cDNA cloning and expression of a collectin from red-spotted grouper （Epinephelus akaara）

Lectins play a crucial role in the innate immunity of invertebrates and vertebrates by recognizing and disposing of pathogens.We obtained the complete cDNA of a C-type lectin(EALec1) from Epinephelus akaara using RACE.The complete EALec1 cDNA sequence was 827 bp.The 5-UTR and 3-UTR were 28 bp and 151 bp,respectively,in length.The sequence also contained a polyadenylation signal AATAAA and a poly(A) tail.The EALec1 cDNA encodes polypeptides with 215 amino acids,including a signal peptide of 31 amino acids.Th...     

黄鳍金枪鱼巨噬细胞移动抑制因子（MIF）的克隆与序列分析

采用同源克隆的方法、利用RACE技术从黄鳍金枪鱼(Thunnus albacares)肝脏中克隆了其MIF(TaMIF)的cDNA序列.TaMIF的cDNA全长706 bp含一个345 bp的开放阅读框,编码一个长115氨基酸的蛋白质.信号肽预测分析表明TaMIF没有信号肽.序列分析与进化分析表明,黄鳍金枪鱼与近海养殖鱼类MIF的氨基酸序列高度相似、进化地位相近,预示着深海鱼类TaMIF与近海养殖鱼类具有相似的生物学功能.研究结果是对深海鱼类MIF基因信息资料的重要补充.     

赤点石斑鱼(Epinephelus akaara)MHC ⅡB基因的克隆与表达多态性分析

主要组织相容性复合体(Major histocompatibility complex,MHC)是脊椎动物体内重要的非特异性免疫基因之一。为了研究赤点石斑鱼的MHC基因的结构与表达特性,本研究运用RACE,Realtime PCR及SSCP等技术,首次成功克隆获得赤点石斑鱼(Epinephelus akaara)非特异性免疫因子MHC ⅡB基因的4个cDNA全序列,序列全长为1 195~1 355 bp,含有3'UTR、启动子、多肽结合区(β1)I、GC区(β2)、跨膜区、胞质区和5'UTR区,编码区大小为750 bp。氨基酸序列分析发现赤点石斑鱼MHC ⅡB分子具有经典MHC蛋白分子的空间结构,在多肽结合区存在极其丰富的变异,β1区由1个α螺旋与4个反向平行的β折叠构成多肽结合区,β2区由多个β折叠构成2个反向平行的三明治结构。利用SSCP技术研究了赤点石斑鱼MHC ⅡB的表达多态性,发现其在头肾、心、肝等12个组织器官中均能有效表达,表达多态性也异常丰富。此外,根据MHCIIB分子中相对保守的IGC区氨基酸序列构建了脊椎动物的系统进化树,也表明了该分子的IGC区氨基酸序列可以作为研究鱼类物种间进化关系的良好标记。