雌激素的抗肿瘤效果和小鼠腹腔巨噬细胞的雌激素受体水平(英文)

探索肿瘤生长性别差异的原因。研究雌激素及其拮抗剂他莫昔芬对可移植性小鼠肉瘤180生长的影响;采用同位素方法,证实了完整小鼠腹腔巨噬细胞对3H-雌二醇的特异性细胞内结合。肯定了小鼠腹腔巨噬细胞是一种雌激素受体阳性细胞。雌性小鼠肿瘤生长速率比雄性小鼠低是因为雌性激素激活了雌激素受体阳性的巨噬细胞的缘故。     

弓背青鳉3种雌激素受体基因的克隆及其表达分析

【目的】克隆弓背青鳉(Oryzias curvinotus)雌激素受体基因(Estrogen receptor, er),分析在组织、胚胎发育时期中表达特征和雌二醇暴露后表达响应,为探究er介导雌激素调控机制提供理论依据。【方法】通过弓背青鳉肝脏转录组数据筛选进行er序列扩增,实时定量PCR(RT-q PCR)检测不同组织、不同胚胎发育时期和雌二醇暴露后的er表达量。【结果】3种ocuerα/erβ1/erβ2的编码区序列分别为1 860 bp、1 689 bp和2 007 bp,编码氨基酸个数相应为619、562和688。定量结果显示,3种er主要在肝脏和性腺高表达。胚胎发育过程中,ocuerα在卵裂期至囊胚期表达量低,在囊胚期后表达量逐渐上升持续到孵化;2种ocuerβ亚型均在胚胎发育初期有较高表达,随后ocuerβ1在原肠胚后开始降低,ocuerβ2在囊胚期后开始降低,在器官发育后期表达量均逐渐上升直至孵化。弓背青鳉仔鱼雌二醇暴露结果显示,各浓度雌二醇暴露均能使ocuerα和弓背青鳉卵黄蛋白基因(Vitellogenin,vtg)表达量上升,ocuerβ1仅在20μg/L上调,ocuerβ2表达量下调。【结论】ocuer不同亚型在介导雌激素调控中起着重要作用。     

罗氏沼虾雌激素相关受体(ERR)基因原核表达与纯化

根据已知罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)雌激素相关受体基因序列(Gen Bank登录号KU899089),设计含有酶切位点的特异性引物,PCR扩增得1 374 bp的开放阅读框序列,构建原核表达载体p ET-32a-ERR,并优化诱导浓度、诱导时间、诱导温度等表达条件。结果表明,ERR蛋白在温度35℃、IPTG浓度0.1 mmol/L条件下,诱导4 h时表达量较佳。     

方格星虫多糖对小鼠免疫活性的影响

研究了方格星虫多糖对小鼠免疫功能的影响。结果表明:方格星虫粗多糖(CSG)能够对抗环磷酰胺引起的小鼠胸腺萎缩和脾萎缩,明显拮抗白细胞减少,对正常小鼠免疫器官没有明显的增重作用;对正常小鼠腹腔巨噬细胞吞噬中性红能力有显著的增强作用。方格星虫多糖粗品(CSG)和精制多糖(SG1和SG2)能够促进小鼠脾淋巴细胞增殖,且能与ConA协同作用。     

Fat-1转基因模型小鼠对脂多糖诱导的抑郁样行为和中枢炎症反应的改善作用

以Fat-1转基因小鼠和野生型C57BL/6小鼠为研究对象,经侧脑室注射脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导中枢炎症模型,测定抑郁样行为糖水偏好度和悬尾实验、腹腔巨噬细胞活性及其吞噬能力、脑炎症小胶质细胞的标记物CD11b基因与蛋白的表达水平,用以研究Fat-1对LPS诱发的炎症和抑郁样行为的作用。结果表明:在野生型小鼠中,LPS降低小鼠糖水偏好度,延长悬尾静止不动时间,增加腹腔巨噬细胞的活性和吞噬能力,上调CD11b基因和蛋白表达水平;而LPS不能引起Fat-1转基因小鼠出现上述类似变化。侧脑室注射LPS可引起野生型小鼠炎症反应和抑郁样行为,而Fat-1转基因小鼠可通过脑内和体内合成n-3 PUFAs抵抗LPS诱发的上述抑郁样变化。     

赤魟组织粗提物的抗肿瘤作用

采用四甲基偶氮唑盐(MTT)微量酶反应比色法检查赤魟三种组织(皮肤、软组织和软骨)粗提物对体外培养的人癌细胞生长的影响,用腹腔注射或灌胃法检查赤魟三种组织粗提物对小鼠移植性肉瘤180(S180)和肝癌(H22)生长的影响。结果表明,赤魟组织粗提物对体外培养的人早幼粒白血病细胞(HL-60)、人子宫颈癌细胞(HeLa)和人低分化鼻咽癌细胞(CNE-2Z)的生长无明显影响,赤魟组织粗提物无论腹腔注射还是灌胃均显著抑制小鼠肉瘤和小鼠肝癌的生长,且对体重无明显影响;当三种组织粗提物以500mg/kg/d(相当生药量,下同)的剂量连续腹腔注射(ip)15d时,对S180的抑制率分别为63.9%、47.2%和80.3%;以3500mg/kg/d连续灌胃(ig)15d时,对S180的抑制率分别为66.9%、61.5%和66.9%;以500mg/kg/d连续腹腔注射15d时,对H22的抑制率分别为43.3%、43.3%和80.4%。     

方格星虫酶解工艺优化及酶解物免疫活性

【目的】优化方格星虫(Sipunculus nudus L.)酶解工艺条件,探讨其酶解液对细胞免疫活性的影响。【方法】在确定实验用酶和单因素实验基础上,利用响应面设计建立数学模型,以水解度为响应值,进行3因素3水平的响应面分析,得到最适酶解条件。以小鼠脾淋巴细胞的增殖、小鼠腹腔巨噬细胞生成NO量和吞噬能力来评价酶解液对免疫细胞的促进作用。【结果】以动物水解蛋白酶和风味蛋白酶组合用酶效果最佳,方格星虫酶解的适宜条件为pH 7.0、加酶量5 000 U/g、液料比3∶1,55℃酶解5.2 h,其水解度为38.92%;以此条件得到的酶解液进行实验,酶解液质量浓度为0.9 mol/mL时,小鼠脾淋巴细胞的增殖率为30.57%,小鼠腹腔巨噬细胞生成NO能力为56.2μmol/L,吞噬能力D(540 nm)值均明显高于阳性对照组(P0.01)。【结论】方格星虫酶解液对细胞免疫具有促进作用。     

菲律宾蛤仔糖胺聚糖抗肿瘤活性研究

从菲律宾蛤仔全脏器中提取得到糖胺聚糖粗品(CRG),通过DEAE-52离子交换柱层析得到纯品(RG),分别采用MTT法和动物移植性肿瘤模型检测其体外和体内抗肿瘤活性,同时测量荷瘤小鼠的胸腺指数的脾指数;建立小鼠免疫抑制模型,并测量正常小鼠和免疫抑制小鼠的胸腺指数、脾指数和碳粒廓清指数。结果显示,菲律宾蛤仔糖胺聚糖可以抑制体外培养的人肝癌Bel7402肿瘤细胞的生长,能显著抑制移植性S180肉瘤的生长,可抑制荷瘤小鼠的脾肿大现象,对环磷酰胺造成的小鼠胸腺和脾脏萎缩有抵抗和修复作用。     

EPA对慢性应激诱导的外周巨噬细胞功能及细胞膜不饱和脂肪酸组成变化的影响

利用慢性不可预知轻度应激诱导大鼠抑郁模型,以体质量、糖水偏好和旷场实验作为抑郁样行为评价指标,以腹腔巨噬细胞吞噬能力、皮质酮激素水平为外周免疫和应激激素指标,测定脑内多不饱和脂肪酸(PUFAs)探讨脑内细胞膜组成的变化。结果表明:与对照组相比,应激组大鼠在体质量、糖水偏好及旷场实验中穿越格数和站立次数均有明显下降,而皮质酮激素和腹腔巨噬细胞吞噬能力均显著增加,脑内n-3 PUFAs、n-3/n-6 PUFAs减少,喂饲EPA可显著改善应激引起的变化。     

儿茶酚胺类药物对草鱼鱼种生长激素分泌的影响

通过腹腔注射药物,尾静脉取血,放射免疫测定激素含量等方法研究了Ｌ－多巴等几种药物对草鱼鱼种生长的激素分泌的影响,发现腹腔注射Ｌ－多巴,阿朴吗啡可以显著提高草鱼鱼种血清生长激素水平,而腹腔注射多巴胺,去甲肾上腺素,肾上腺素和６－羟多巴则可明显降低草鱼鱼种血清生长激素水平。     

虾青素对长春新碱诱导神经病理性疼痛镇痛作用及机制

利用长春新碱致神经病理性疼痛小鼠模型,以腹腔注射不同剂量虾青素,通过行为学实验测试机械性缩足反射阈值的变化,并以免疫荧光检测星型胶质细胞和小胶质细胞各自的标记蛋白GFAP和Iba1的蛋白表达变化,以ELISA试剂盒检测炎症因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)和单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)的表达变化,以此探讨虾青素对长春新碱诱导的神经病理性疼痛的影响及其作用机制。结果表明,虾青素呈剂量依赖性地拮抗长春新碱诱导的神经病理性疼痛(chemotherapy-induced neuropathic pain,CNP)(P<0.01),虾青素能够降低CNP小鼠脊髓胶质细胞GFAP和Iba1的蛋白表达水平以及炎症因子TNF-α和MCP-1的表达水平(P<0.05)。虾青素能显著拮抗长春新碱诱导的神经病理性疼痛。     

基因转移技术简介

应用物理、化学或 (和 )生物学等技术和方法将外源基因转移到受体菌或细胞内 ,并使之在细菌或细胞内实现转入基因的扩增和表达称基因转移技术。1　基因转移的物理学方法1 .1　显微注射法应用玻璃显微注射仪器 ,在显微镜下将外源 DNA直接注射入靶细胞的核内。该法的受体细胞主要是体积较大的受精卵细胞 ,是制备转基因动物的常用技术之一。Gordon1 980年报道了用显微注射制作转基因小鼠 ,在出生的 78只小鼠中 ,用 Southern法检测有 2只为阳性 [1]。可惜的是未得到活的转基因小鼠。 1 982年 Palmiter报道了将大鼠的生长激素基因用显微注射法…     

赤魟尾刺提取物的抗肿瘤作用

<正>赤魟Dasyatis akajei(Muller&henle)隶属于软骨鱼纲,下孔总目,鲼形目,魟科,魟属,常栖息于底质为泥沙的深潭中[1-3]。赤魟肉性味甘、咸平,有补气之功效。用其熬油,主治小儿疳积。尾刺研末入药,对治疗胃癌、食道癌、肺癌、乳腺炎、咽喉炎、疟疾、牙痛、魟鱼尾刺刺伤均有一定疗效[4]。赤魟尾刺含有多种毒素,有重要药理作用。涂洪斌等克隆出编码赤魟肿瘤抑制因子IPL的全长cDNA序列[5],并报道了赤魟亲环素A的融合表达、纯化及活性特征[6]。目前,赤魟尾刺的生物活性成分及其相关毒理和药理作用仍不清楚[7]。笔者研究了赤魟尾刺提取物(extracts of caudal spine,ECS)对小鼠可移植性肿瘤生长的影响,现将结果报告如下。     

飞机草总黄酮体外抑菌活性与体内抗大肠埃希菌感染效果

提取飞机草(Eupatorium odoratum Linn.)总黄酮,从抑菌圈、最小抑菌浓度(MIC)及最小杀菌浓度(MBC)等方面探讨飞机草总黄酮对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、鸡白痢沙门氏菌(Salmonella pullorum)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、大肠埃希菌(Escherichia coli)的体外抑菌活性;经腹腔注射大肠埃希菌感染小鼠后,灌胃给予飞机草总黄酮,观察供试小鼠腹泻率,测定小鼠粪便大肠埃希菌数及血清抗体水平(IgM、IgA和IgG),评价飞机草总黄酮的体内抗感染作用。结果表明,金黄色葡萄球菌对飞机草总黄酮最为敏感,其抑菌圈直径为19.50 mm,MIC为0.015 6 g/m L,MBC为0.031 3 g/m L;160 mg/kg的飞机草总黄酮可降低小鼠腹泻率和粪便大肠埃希菌数(P0.01),提高血清IgA(P0.01)和IgG含量(P0.05)。飞机草总黄酮具有体内、体外抗菌作用。     

CpG-DNA对异育银鲫(Carassius auratus gibelio)免疫细胞活性的诱导作用

探索含CpG基序的未甲基化寡脱氧核苷酸(ODNs)对鱼类的免疫调节,将人工合成的鱼免疫刺激剂寡脱氧核苷酸序列1670(含一个CpG基序)、1670-D(含两个CpG基序)加入到离体培养的异育银鲫的头肾巨噬细胞和外周血白细胞中,采用MTT法测定其对鲤外周血白细胞增殖的影响,NBT还原法和Griess试剂显色法测定对头肾巨噬细胞的呼吸爆发的影响。结果显示,1670可显著(浓度为20.0μg·mL-1)或极显著(浓度为0.1、1.0、10.0μg·mL-1)提高异育银鲫巨噬细胞的氧呼吸爆发活性,但对氮呼吸爆发活性和外周血白细胞的增殖无显著作用;1670-D可显著(浓度为0.1μg·mL-1)或极显著(浓度为1.0、10.0、20.0μg·mL-1)增强异育银鲫巨噬细胞的氧呼吸爆发活性和外周血白细胞的增殖,且可极显著(浓度为1.0、10.0、20.0μg·mL-1)提高异育银鲫巨噬细胞的氮呼吸爆发活性。表明特定序列、特定作用剂量的CpG-DNA可增强体外培养的异育银鲫巨噬细胞和外周血白细胞的非特异性免疫应答。     

长茎葡萄蕨藻多糖的理化性质及其对免疫抑制小鼠的调节作用

【目的】为促进长茎葡萄蕨藻（Caulerpa lentillifera）的开发利用,研究长茎葡萄蕨藻多糖的理化性质和对免疫抑制小鼠的调节作用。【方法】以海南养殖的长茎葡萄蕨藻为研究对象,采用水提醇沉和离子交换柱层析获得多糖成分,用高效凝胶渗透色谱和高效液相色谱法分析多糖分子质量和单糖组成等理化性质,并从动物水平研究多糖对免疫抑制小鼠的免疫调节和抗氧化活性。【结果与结论】长茎葡萄蕨藻粗多糖产率为5.04%,粗多糖脱蛋白后,经强阴离子交换柱层析纯化得到主要多糖组分CP0。理化性质分析表明,CP0的总糖质量分数为70%,硫酸基质量分数为11%;主要由甘露糖、半乳糖和木糖组成,比例为4.4:4.0:1.4,还含有微量的葡萄糖。表明CP0是硫酸化的木糖半乳甘露聚糖,相对分子质量为471 000。原子力显微镜显示,CP0为直径约100 nm的近球体结构。CP0对免疫抑制小鼠脾脏指数、胸腺指数有显著影响（P <0.05）,对小鼠白介素（IL2、IL4、IL10）、干扰素（IFN）、肿瘤坏死因子（TNF）、肠道分泌型免疫球蛋白A(SIgA)等6种免疫因子有显著调节作用（P <0.05）,对...     

厚壳贻贝活性肽对酒精诱导小鼠肝损伤及肠道菌群的作用

【目的】探究厚壳贻贝活性肽（Mytilus coruscus peptides,MCP）对酒精诱导小鼠肝损伤的保护及肠道菌群的调节作用。【方法】将45只C57BL/6小鼠平均分成5组：正常组、模型组（无水乙醇EtOH）、阳性组（EtOH+50 mg/kg水飞蓟素）、MCP低剂量组（EtOH+200 mg/kg MCP）和高剂量组（EtOH+400 mg/kg MCP）。LieberDeCarli液体饲料喂养C57BL/6小鼠3周建立酒精性肝损伤模型,检测小鼠血清中丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）活性及肝脏中抗氧化酶活性和抗炎因子水平,通过H&E染色和油红O染色观察肝脏组织形态变化和脂肪堆积情况,采用16s rRNA测序检测小鼠肠道菌群多样性变化。【结果】MCP显著提高肝脏中超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）活性,显著降低促炎因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素1β(IL-1β)含量,同时降低了肝脏中甘油三酯（TG）和丙二醛（MDA）的含量（P <0.05）;减少肝脏脂肪空泡,增加结肠杯状细胞,恢复了肝...     

福安肽-03的分离纯化及其一级结构解析

通过盐析、离子交换、凝胶过滤和疏水层析等分离纯化,同步进行抗血管生成和抗肿瘤生长检测,从赤魟(Dasyatis akajei)组织获得强抗血管生成成分福安肽-03(Fuantai-03,FAT-03)的纯品(纯度>95%);使用Edman降解法测定FAT-03 N-末端氨基酸组成和序列,RACE系统技术解析FAT-03的一级结构。结果表明:FAT-03明显抑制鸡胚绒毛尿囊膜血管生成和BALB/c裸小鼠Lewis肺癌的生长及肝转移,且其效果与剂量相关。FAT-03分子的一级结构即其氨基酸组成和序列已被确定。     

儿茶酚胺类药物对草鱼鱼种生长激素分泌的影响

通过腹腔注射药物、尾静脉取血、放射免疫测定激素含量等方法研究L-多巴等几种药物对草鱼鱼种生长激素分泌的影响,发现腹腔注射L-多巴、阿朴吗啡可以显著提高草鱼鱼种血清生长激素水平,而腹腔注射多巴胺、去甲肾上腺素、肾上腺素和6-羟多巴则可明显降低草鱼鱼种血清生长激素水平。说明儿茶酚胺类参与了草鱼鱼种生长激素的分泌调节,L-多巴或其代谢物是通过中枢神经系统促进草鱼鱼种生长激素分泌的,而多巴胺、去甲肾上腺素和肾上腺素则是在脑垂体水平上抑制草鱼鱼种生长激素的分泌。     

拟肾上腺素药物对不同鱼离体心脏活动的影响

本文仿照straub离体蛙心灌流法,用浓度为10~(-6)M至10~(-3)M的拟腎上腺素药物0.05-0.25m1注入1.5m1灌流液中,观察腎上腺素、去甲腎上腺素、异丙肾上腺素、间羟胺和甲氧胺对黄鳝、乌鳢、尼罗罗非鱼、胡子鲶和埃及胡子鲶离体心脏的影响作比较,并进行心肌受体分析。实验结果表明,拟腎上腺素药物对不同种类鱼离体心脏活动的影响不同,不同种类的鱼心肌腎上腺素受体也不同。这与鱼类种属不同有关。而拟腎上腺素药物对胡子鲶和埃及胡子鲶离体心脏的影响相同:異丙腎上腺素的兴奋作用为β-受体阻断剂所抑制;甲氧胺的抑制作用为α-受体阻断剂所阻断。表明其心肌存在着β-受体和α-受体,但以β-受体的作用较明显。提示这两种同属異种鱼的心脏调节机制相同。