坛紫菜原生质体的超微结构观察

在细胞与原生质体的分离培养与融合的研究中,利用电子显微镜观察高等植物细胞去壁情况、原生质体再生壁的形成过程以及原生质体融合后细胞内细胞器的变化已经是比较普遍采用的手段。但在大型海藻细胞分离与培养方面的研究工作中,利用这一手段进行研究的并不多见。 我们在研究Ⅰ中曾经利用海螺酶解离坛紫菜的营养细胞并成功地培养成紫菜叶状体,但是解离成单离细胞去壁情况如何,当时     

三种海螺解壁酶组分的比较研究——Ⅰ.纤维素酶(Cx, C1)和果胶酶

在青岛近海潮间带,有三种常见的海螺(朝鲜花冠小月螺、单齿螺和疣荔枝螺).从这三种海螺的消化道和内脏中,提得粗酶液,对三种海藻1)(袋礁膜、条斑紫菜和裙带菜,分属于绿、红和褐藻)都有明显的分解胞壁作用[1],故称解壁酶.其中朝鲜花冠小月螺酶的解壁效果最好,疣荔枝螺酶最差,解壁酶的发现,为海藻细胞生物学研究、单细胞或原生质体育苗、通过细胞融合培养新的杂交藻种、研究和提取亚细胞成分等提供了一种有用的工具.     

三种海螺解壁酶组分的比较研究——Ⅲ.其他糖酶

三种海螺(朝鲜花冠小月螺、单齿螺和疣荔枝螺)解壁酶,对三种海藻(袋礁膜、条斑紫菜和裙带菜)都有明显的解壁作用[1],海螺解壁酶为混合酶,在解壁作用中,除了起主要作用的七种结构多糖酶[2,3]外,混合酶液中还有其他的糖酶。本研究对其他五种糖酶(一种多糖酶和四种二糖酶)进行活力测定,并作比较和探讨。     

海螺酶Ⅰ号、Ⅱ号通过技术鉴定

海螺酶Ⅰ号、Ⅱ号是用于海藻单细胞和原生质体制备的活性较高的两种工具酶。我院海洋生物学系海螺酶研制小组从1980年开始，开展了对海螺酶的试制研究，1981年初步试制出了样品酶。近三年来又对酶制剂的生产工艺作了进一步的改进，对酶制剂的性质进行了分析测试。     

三种海螺解壁酶组分的比较研究——Ⅱ.海藻结构多糖酶和海藻糖酶

三种海螺(朝鲜花冠小月螺、单齿螺和疣荔枝螺)解壁酶,对三种海藻(分属于绿、红和褐藻)都有明显的分解胞壁作用[1],其效果优于一般的纤维素酶制剂。海螺解壁酶是混合酶,除纤维素酶(Cx、C₁)和果胶酶外[2],还有分解海藻胞壁结构多糖、专一性更强的酶。     

海螺酶Ⅰ号、Ⅱ号通过技术鉴定

海螺酶Ⅰ号、Ⅱ号是用于海藻单细胞和原生质体制备的活性较高的两种工具酶。我院海洋生物学系海螺酶研制小组从1980年开始,开展了对海螺酶的试制研究,1981年初步试制出了样品酶。近三年来又对酶制剂的生产工艺作了进一步的改进,对酶制剂的性质进行了分析测试。试制的样品曾经分别在我院、上海水产学院、江苏省启东县水产局     

篮子鱼内脏粗提液制备长心卡帕藻和细齿麒麟菜原生质体的初步研究

于2011年9月至2013年1月,在海南陵水热带海藻实验基地,利用篮子鱼(Siganus fuscessens)内脏研磨制备消化酶,开展了酶解制备大型产胶红藻长心卡帕藻(Kappaphycus alvarezii)和细齿麒麟菜(Eucheuma denticulatum)的原生质体研究,观察了不同酶解条件对两种产胶海藻原生质体产量和产率的影响。结果表明,细齿麒麟菜原生质体得率高于长心卡帕藻;在藻泥与酶浓度配比中,长心卡帕藻或细齿麒麟菜藻泥越多,所制备出的原生质体产量越高,而其制备效率却越低;在温度(20~30℃)梯度中,有最高原生质体产量和效率的酶解温度为25℃;在pH 6.0~8.0的实验酶解梯度中,酶解pH 6.0时的酶解效果最好;在12~48 h实验酶解时间梯度中,酶解时间为48 h时原生质体产量和得率最高;酶解时间越长,长心卡帕藻或细齿麒麟菜原生质体制备效率越高。为此建议在25℃和pH6.0条件下,适当增加海藻藻泥用量和延长酶解时间,以更有效获得原生质体。     

植物激素在条斑紫菜原生质体固体培养中的作用

利用酶解技术制备高活力的条斑紫菜原生质体；通过优化原生质体的制备工艺和培养条件，建立了条斑紫菜原生质体的无菌培养体系，同时首次证明了高等植物组织培养中常用的两种激素NAA和6－BA对紫菜细胞生长具有明显地促进作用，并应用这两种激素建立了条斑紫菜原生质体的固体培养方法，为开展紫菜遗传转化中阳性克隆的定向筛选，以及探讨紫菜的基础生理生化反应机制奠定了良好基础。     

紫菜原生质体的纯系培育、诱变处理和种间细胞融合的研究

紫菜是国内外养殖最多的重要经济海藻之一。1982年唐延林首次用酶法分离出紫菜体细胞和原生质体,并培养获得再生植株,随后在国内外相继开展了紫菜单细胞和原生质体的分离工作。在短短的几年里,紫菜的基础和应用研究均取得明显的进     

紫菜营养细胞的酶法分离和在水产养殖中的应用

紫菜是国内外养殖最多的重要经济海藻之一。它的养殖包括果孢子采苗、丝状体培养、壳孢子采苗和海上养殖等过程。利用上述采苗方法,在室内培育丝状体的时间长达半年之久,技术操作复杂,需要进行温度、光照的控制和施肥管理等,也容易发生病害。 近年来,用酶学方法分离紫菜细胞,进行细胞和原生质体的培养,并且都获得了再生植株。为了使生物技术应用于紫菜栽培业,我们     

紫菜叶状体发育研究进展

紫菜是重要的经济海藻,在海藻栽培业中的地位非常重要。随 着海藻生物技术的发展和日益增长的社会需求,对紫菜的研究越来越重要。本文从个体、组 织和细胞水平综述了对叶状体发育的研究进展,对研究的必要性进行了论述,并对其在紫菜 选种育种中的应用前景进行了展望。     

酶解条件对条斑紫菜单细胞成活率影响的比较研究

该文分别选用不同浓度的海螺酶 ;葡萄糖、蔗糖、甘露醇、山梨醇、氯化钠 5种渗透剂 ;维生素 C和甘露醇 2种抗氧化剂 ;对条斑紫菜酶解单细胞的成活率进行了研究。实验结果表明 :用浓度为 10 %的海螺酶酶解条斑紫菜 ,成活率最高 ;选用 2 mol/ L葡萄糖作渗透剂 ,效果最好 ,成活率达85.2 % ;加入抗氧化剂对细胞成活率没有影响     

第一届海藻生物技术培训班在上海水产大学举办

上海水产大学受农业部全国水产技术推广总站委托,于1992年2月24日～3月9日举办“第一届海藻生物技术培训班”,为期14d。本届培训班由上海水产大学王素娟教授等5位教师主讲,主要介绍国内外海藻生物技术进展及最后成果,并系统地讲授海藻生物技术理论知识及传授紫菜体细胞育苗技     

裙带菜原生质体的分离和培养

本文以裙带菜(Undaria pinnatifida(Harv.)Suringar)为材料,进行原生质体分离和培养研究。取得以下结果: 1、使用海螺酶(sea snail enzymes)和纤维素酶(cellulase,Onozuka R-10),酶解裙带菜细胞壁,在一定的条件下,能够大量地分离成活的裙带菜原生质体。 2、实验表明,氯化钠可作为分离裙带菜原生质体研究中的一种理想的渗透刑。 3、荧光增白剂染色镜检法可作为鉴定裙带菜原生质体的一种辅助方法,并适用于原生质体再生壁的观察。 4、光照(2000—2500Lux)能促使原生质体再生细胞壁,含有蔗糖(W/V,1％)的培养液有助于原生质体再生细胞壁。 5、分离的裙带菜原生质体,经培养,已能长成幼体。     

现代生物技术在紫菜属中的应用

本文综述了近十年来国内外紫菜生物技术的发展与研究。在细胞生物学方面，介绍了紫菜原生质体制备、组织培养和细胞融合等技术，及其在新种质创建，工业苗种生产、单细胞活饵料开发和基因组操作等研究中的广泛应用，而细胞分光光度技术（MSP）和流式细胞技术（FCM）的加盟使得对紫菜细胞DNA的了解达到量化，快速分选细胞并实现对其生理代谢动态 观测，在生物化学方法中，讨论了用同工酶电泳技术来评价紫菜群体遗传结构、鉴别种质和描述系统发育等研究，以及利用生化方法对糖类等其它化合物进行提纯与测定等工作，在分子生物学方面；总结了如何获得高纯度DNA，并将其应用于DNA分析研究，RFLP、RAPD和DNA-序列测定等分子标记技术所揭示的紫菜的多态性，以及利用DNA-指纹和消减DNA文库的技术来构建紫菜的质体基因图谱和cDNA文库，并进行紫菜比较基因组学的研究，此外还介绍了紫菜基因转移方面的工作。     

从石鳖(Chiton sp.)和帽贝(Patella sp.)中提取海藻解壁酶的初步研究

本研究尝试从两种海洋贝类－石鳖和帽贝的消化腺中提取混合消化酶,以获得对海藻原生质体分离更有效的工具酶。通过对１９种青岛海滨常见藻类酶解效果的比较发展：（１）该酶对各种藻类均有一定的解离作用。尤其对红藻效果好,对绿藻次之;（２）解离时间相对较短,一般在１ｈ左右,对甘紫菜１０ｍｉｎ即可见效。石鳖和帽贝混合消化酶由于综合两种贝的食性特性,具有比单一动物消化酶更广泛的消化作用,同时还对这一混合工具酶的酶解     

复合酶对卡德藻溶壁效果的研究

早在１８９２年 ,Ｋｌｅｒｃｋｅｒ就用机械法从藻类中分离到原生质体。该法靠手工操作 ,难度非常大 ,原生质体的得率非常少 ,费时费力。１９６０年 ,英国Ｃｏｏｋｉｎｇ首先采用酶解法从番茄幼苗根尖中的细胞用纤维素酶把原生质体分离出来 ,从而开创了酶法大量获得原生质体的新时期。由于此法的创立 ,才使原生质体培养、融合、转化等的一系列研究得到很大的发展。尽管该技术被应用于陆生植物已有很长时间 ,但由于海藻多样独特的细胞壁组成和结构 ,其应用仍处于发展阶段。海洋微藻类因其结构简单和易于培养等特点 ,成为原生质体制备、细胞融…     

高科技生产紫菜的生物技术

紫菜营养细胞的悬浮培育和细胞原生质体的分离，培养和筛事所建立的能连续分裂，发育和具有遗传性能的稳定性无性繁殖纯品系以及在此基础上的同种或异种间的细胞融合是高科技发展紫菜生产的生物技术。它与现今的紫菜养殖方式相比是具有多方面的优越性。     

紫菜体细胞对抗生素的敏感性实验

近几年来栽培紫菜常发生大面积的病烂,给养殖生产造成巨大的损失,因此,培育出抗逆、高产、优质的紫菜新品种成为亟需解决的问题。利用细胞工程、尤其基因工程等生物技术研究紫菜的生物学特性、培育紫菜的新品种成为必然的发展方向。秦松等对海带等大型经济褐藻类的研究取得了一些进展[1,2]并发现氯霉素是海带基因工程的有效选择压力。上海水产大学王素娟在紫菜领域进行了这方面的研究工作,探索外源基因导入紫菜细胞的方法。本文实验表明,氯霉素在紫菜基因工程中可作为有效选择压力,另外四环素也有一定的效果。1　材料与方法1.1　材料、体细…     

“七五”攻关课题“紫菜体细胞育苗”在京通过验收

1990年12月14日,由中国科学院海洋研究所、上海水产大学和青岛海洋大学承担的国家“七五”科技攻关项目“生物技术”专题——“紫菜体细胞育苗”课题在北京通过验收。其中上海水产大学完成的“条斑紫菜体细胞快速育苗技术”子课题在1990年5月通过了专家通讯鉴定,青岛海洋大学完成的“条斑紫菜酶解细胞育苗”子课题在1990年10月通过专家现场鉴定。