酶法水解中国毛虾的研究(英文)

比较了4种常用蛋白酶对中国毛虾的酶解效果,筛选出胰蛋白酶和枯草杆菌蛋白酶为最佳用酶,并利用正交试验优化了水解条件,在各自最佳水解条件下采用先加胰蛋白酶再加枯草杆菌蛋白酶的酶解方式对中国毛虾进行联合双酶水解,水解度可达67 .83%。     

青鳞鱼HAP的试制

应用正交试验优选枯草杆菌中性蛋白酶和胃蛋白酶对青鳞鱼蛋白质的水解条件。结果表明：（１）枯草杆菌中性蛋白酶的最适条件为ｐＨ７．０、温度５０℃、时间３ｈ、酶浓度１０，０００μ／１００ｍｌ；（２）胃蛋白酶的最适条件为ｐＨ３．５、时间２．０ｈ、温度４０℃、酶浓度３００μ／１００ｍｌ；（３）以去内脏青鳞鱼为原料进行双酶水解，蛋白质水解度可达８３．８％。水解液经脱臭浓缩可制得ａ──氨基氮≥１．５ｇ／１００Ｉｎｌ的ＨＡＰ。它可作为海鲜食品的添加剂，也可制作海鲜汤料或作为膨化食品的辅料。     

酶解法提取鱼油的工艺参数优化

利用蛋白酶酶解法从黄鳍金枪鱼（Thunnus albacares）加工的下脚料——鱼头中提取鱼油。以鱼油提取率和感官特征为指标，通过正交优化实验设计，获得了胰蛋白酶提取鱼油的最佳酶解工艺参数：酶解温度45℃，酶添加量1．5％．料液质量比1：1，酶解时间4h，酶解pH8。在该条件下．鱼油的提取率为4．34％，理化指标除过氧化值外均达到SC／T3502-2000的粗鱼油二级标准。多不饱和脂肪酸总含量高达38．47％,其中DHA和EPA的含量分别为23．63％和4．84％。     

鲢鱼降血压肽的酶解条件

以鲢鱼蛋白为原料，采用5种不同复合蛋白酶（P1，P2，P3，P4，P5）进行酶解。综合研究了复合生物酶酶量、酶解时间、pH、酶解温度等对鲢鱼蛋白酶解降血压肽ACE活性抑制效果的影响。结果表明。复合酶P1酶解降血压肽对ACE抑制率经体外检测为88．08％。具有最佳的酶解效果。对应最佳条件为：酶量25IU／mL，酶解时间2h，pH 7．0，酶解温度60℃。     

酶解法提取鱼油的工艺参数优化

利用蛋白酶酶解法从黄鳍金枪鱼(Thunnus albacares)加工的下脚料———鱼头中提取鱼油。以鱼油提取率和感官特征为指标,通过正交优化实验设计,获得了胰蛋白酶提取鱼油的最佳酶解工艺参数:酶解温度45℃,酶添加量1.5%,料液质量比1∶1,酶解时间4 h,酶解pH 8。在该条件下,鱼油的提取率为4.34%,理化指标除过氧化值外均达到SC/T3502-2000的粗鱼油二级标准,多不饱和脂肪酸总含量高达38.47%,其中DHA和EPA的含量分别为23.63%和4.84%。     

方格星虫酶解工艺优化及酶解物免疫活性

【目的】优化方格星虫(Sipunculus nudus L.)酶解工艺条件,探讨其酶解液对细胞免疫活性的影响。【方法】在确定实验用酶和单因素实验基础上,利用响应面设计建立数学模型,以水解度为响应值,进行3因素3水平的响应面分析,得到最适酶解条件。以小鼠脾淋巴细胞的增殖、小鼠腹腔巨噬细胞生成NO量和吞噬能力来评价酶解液对免疫细胞的促进作用。【结果】以动物水解蛋白酶和风味蛋白酶组合用酶效果最佳,方格星虫酶解的适宜条件为pH 7.0、加酶量5 000 U/g、液料比3∶1,55℃酶解5.2 h,其水解度为38.92%;以此条件得到的酶解液进行实验,酶解液质量浓度为0.9 mol/mL时,小鼠脾淋巴细胞的增殖率为30.57%,小鼠腹腔巨噬细胞生成NO能力为56.2μmol/L,吞噬能力D(540 nm)值均明显高于阳性对照组(P0.01)。【结论】方格星虫酶解液对细胞免疫具有促进作用。     

鲢鱼降血压肽的酶解条件

以鲢鱼蛋白为原料,采用5种不同复合蛋白酶(P1,P2,P3,P4,P5)进行酶解,综合研究了复合生物酶酶量、酶解时间、pH、酶解温度等对鲢鱼蛋白酶解降血压肽ACE活性抑制效果的影响。结果表明,复合酶P1酶解降血压肽对ACE抑制率经体外检测为88.08%,具有最佳的酶解效果。对应最佳条件为:酶量25 IU/mL,酶解时间2 h,pH7.0,酶解温度60℃。     

木瓜蛋白酶在制取青鳞鱼可溶性蛋白中的应用

研究了木瓜蛋白酶的酶解温度，酶浓度，酶解时间，加水量，pH值对青鳞鱼可溶性蛋白得率的影响，探讨了α－氨态氮含量与青鳞鱼与可溶性蛋白得率的关系。结果表明：温度小于50℃，随着酶解温度的提高，酶浓度的增加，酶解时间的延长青鳞鱼可溶性蛋白得率及α－氨态氮的含量均增加，α＝氨态氮含量增加比可溶性蛋白得率的增加明显；加水量的增加，可溶性蛋白得率增加；pH值对水解效果及可溶性蛋白得率影响不大。综合考虑，最佳水解条件为：温度50℃，酶浓度为1500u/g，酶解时间80min,m原料：m水＝1：2，pH6.8。酶解所得可溶性蛋白经氨基酸分析仪检测,其氨基酸总量为49.47mg/mL，必需氨基酸占氨基酸总量的41．0％，游离氨基酸含量为6.3mg/mL，肽含量为87．2％。     

罗非鱼鱼鳞胶制备降血压胶原肽的工艺及酶解物活性

以罗非鱼鱼鳞胶为原料,制备对血管紧张素转换酶(ACE)有抑制活性的降血压肽。以水解度(DH)及ACE抑制率为指标,筛选水解鱼鳞胶的最适酶种,并对其水解工艺条件进行优化;采用超滤技术对所制备的降血压肽进行分离纯化,比较不同组分的ACE抑制率,测定高ACE抑制率组分的氨基酸组成,并运用MALDI-TOF-MS法分析其分子质量分布。结果表明,复合蛋白酶是水解鱼鳞胶最适酶种,在50℃、pH7.5、料液质量体积比1∶5、酶与底物质量比(mE/mS)1.5%条件下,酶解6 h,酶解液的ACE抑制作用最强,其水解度DH 73%,ACE的抑制率76.15%。酶解液经超滤分离所获得的分子质量小于2 000 u的组分对ACE抑制率最高,达83.15%;该组分的氨基酸主要含有Gly和Pro,含量分别为22.04%和11.40%;该组分分子质量范围为1 300~2 000 u。     

海参性腺酶解物制备及其体外清除自由基活性测定

【目的】酶解海参性腺并分析其体外清除自由基活性。【方法】采用外源性蛋白酶水解工艺制备海参性腺酶解产物,通过酶解效果比较分析,考察其体外清除DPPH自由基和羟自由基能力。【结果】确定木瓜蛋白酶为水解用酶,利用响应面优化实验确定酶解条件为酶解时间14 h、酶添加量3 000 U/g、料液比1∶40;酶解液灭酶后经离心、浓缩、干燥后得到粉状海参性腺酶解物,其主要成分质量分数分别为蛋白肽48.4%、矿物质16.8%、粗脂肪12.4%、水分9.8%;酶解产物清除DPPH自由基和羟自由基的IC50值分别为3.39、5.83 mg/mL。【结论】海参性腺酶解物具有良好的抗氧化活性。     

吸附—交联法固定胰蛋白酶及在澄清啤酒中的应用

胰蛋白酶的固定化采用吸附－交联法。在单因素试验基础上，通过正交试验，获得了胰蛋白酶固定化的最佳条件：酶与载体体积比为2：1，吸附时间为10h,pH＝4．5，缓冲液浓度为0．05mol/L，戊二醛的质量分数为0．1％。此条件下制得的磁性酶活力回收在50％左右，相对酶活力达74％，该磁性酶对啤酒澄清防止冷浑浊有明显效果。     

生物采油解堵剂中产蛋白酶菌株的筛选及培养条件优化

为研究生物酶采油解堵剂中产蛋白酶菌株的初、复筛选及培养条件优化,从大庆原油样品中筛选菌种,通过水解酪素的透明圈实验及福林酚测蛋白酶酶活的方法进行菌株的初、复筛选;以蛋白酶酶活为优化指标,采用单因素实验对筛选的产蛋白酶菌株的培养基及培养条件进行优化,优化最适培养基:可溶性淀粉为15g/L,蛋白胨为20g/L,酵母膏为20g/L,NaCl为1.0g/L,CaCl2为0.02g/L,Na2HPO4为0.2g/L,NaH2PO4为0.1g/L;在初始pH为6.0、接种量为5%(体积分数)、温度为31℃、摇床转速为160r/min的条件下,培养72h后,菌株的蛋白酶酶活为551.0U/mL,为复筛选菌株的蛋白酶酶活的22.92倍,即为菌株生长繁殖及代谢的最佳条件,能够获得更高的蛋白酶酶活,有利于后续实验的进行.结果表明:菌株产蛋白酶对原油作用效果为发酵液表面张力从作用前的56.2mN/m降低到作用后的30.5mN/m,表面张力显著降低,还有降解降黏原油等效果,具有一定的研究价值.     

石斑鱼头酶解产物的制备及其功能性质

【目的】为了提高石斑鱼加工副产物的生物价值,对石斑鱼头中抗氧化活性物质进行分离与功能性质分析。【方法】以珍珠龙胆石斑鱼头为原料,采用生物酶解法,以水解度和DPPH自由基清除率为指标,通过单因素试验和响应面法优化酶解工艺;酶解产物经不同分子质量的超滤膜进行分离,对分离各级分的体外抗氧化活性与功能性质进行研究。【结果】石斑鱼头酶解产物的最佳制备条件是:风味蛋白酶添加量3 000 U/g,在pH 7.0,酶解温度为45℃、底物质量浓度300mg/mL下酶解4.5h,得到的石斑鱼头粗酶解产物的水解度为(20.27±1.28)%。分子质量3 ku的酶解产物(EHH-1)蛋白质质量分数为(13.18±1.17)%,抗氧化活性最显著,其对DPPH自由基、羟自由基、超氧阴离子自由基清除作用的IC_(50)值分别为0.35、4.60、0.46 mg/mL;在pH4.0～8.0之间均具有较好溶解性,氮溶指数达到(75.08～87.50)%,热稳定性达到(70.00～82.00)%,乳化活性为(23.52～37.45)m~2/g。【结论】石斑鱼头酶解产物分子质量3 ku的超滤级分具有较强的抗氧化性与良好的功能性质,在天然抗氧化剂和食品加工领域有潜在的利用价值。     

木瓜蛋白酶在制取青鳞鱼可溶性蛋白中的应用

研究了木瓜蛋白酶的酶解温度、酶浓度、酶解时间、加水量、pH值对青鳞鱼可溶性蛋白得率的影响 ,探讨了α 氨态氮含量与青鳞鱼可溶性蛋白得率的关系。结果表明 :温度小于 5 0℃ ,随着酶解温度的提高、酶浓度的增加、酶解时间的延长青鳞鱼可溶性蛋白得率及α 氨态氮的含量均增加 ,α 氨态氮含量增加比可溶性蛋白得率的增加明显 ;加水量的增加 ,可溶性蛋白得率增加 ;pH值对水解效果及可溶性蛋白得率影响不大。综合考虑 ,最佳水解条件为 :温度 5 0℃ ,酶浓度为 1 5 0 0u/g ,酶解时间 80min ,m原料 :m水 =1∶2 ,pH 6 8。酶解所得可溶性蛋白经氨基酸分析仪检测 ,其氨基酸总量为 49 47mg/mL ,必需氨基酸占氨基酸总量的 41 0 % ,游离氨基酸含量为 6 3mg/mL ,肽含量为 87 2 %。     

吸附-交联法固定胰蛋白酶及在澄清啤酒中的应用

胰蛋白酶的固定化采用吸附-交联法.在单因素试验基础上,通过正交试验,获得了胰蛋白酶固定化的最佳条件酶与载体体积比为21,吸附时间为10 h,pH=4.5,缓冲液浓度为0.05 mol/L,戊二醛的质量分数为0.1%.此条件下制得的磁性酶活力回收在50%左右,相对酶活力达74%,该磁性酶对啤酒澄清防止冷浑浊有明显效果.     

响应面法优化制备牡蛎短肽工艺

【目的】探究前处理方式对酶解效果的影响,优化牡蛎短肽制备工艺。【方法】在确定高效酶种类和前处理方式的基础上,以氮回收率、短肽得率为指标对酶解时间、料液比、酶解温度、加酶量进行单因素试验,再利用响应面设计建立数学模型,以短肽得率为响应值,进行4因素3水平的响应面分析。【结果与结论】牡蛎经80℃热处理10 min后使用动物蛋白酶的酶解效果最佳。响应面结果显示,最佳酶解工艺为料液比(g/m L)1∶3.9、温度47℃、加酶量3 300 U/g、自然pH(6.5)、酶解3 h,其短肽得率为(58.53±1.20)%,比原酶解工艺提高24.8%。     

三角帆蚌肉酶解产物响应面优化制备及醒酒活性

【目的】研究三角帆蚌(Hyriopsis cumingii)肉酶解产物的解酒防醉作用。【方法】以乙醇脱氢酶(ADH)激活率为指标,在单因素试验基础上响应面优化三角帆蚌肉酶解工艺,制备三角帆蚌肉酶解产物(Enzymatic hydrolysate from soft tissue of Hyriopsis cumingii, EH),并测定EH对饮酒小鼠醉酒状态、血液中乙醇浓度和肝脏ADH活力的影响,以评价其醒酒活性。【结果】选用中性蛋白酶为实验用酶,三角帆蚌肉的最佳酶解条件为酶解时间2.0 h、酶解温度50.0℃、料液比1∶3、加酶量1 000 U/g,在此条件下ADH激活率为18.30%。小鼠摄入EH300 mg/kg时,饮酒小鼠醉酒只数少,酒后90 min血乙醇浓度已降至8.80 mmol/L,肝脏ADH活力上升至7.64 U/mg。【结论】三角帆蚌肉酶解产物能够显著激活肝脏ADH,降低血乙醇浓度,具有较好的醒酒功效和应用前景。     

牡蛎酶解工艺优化及其酶解产物对小鼠睾酮分泌的影响

【目的】优化太平洋牡蛎(Crassostreagigas)酶解工艺条件,并研究酶解产物及其超滤组分对体外培养的睾丸间质细胞增殖及睾酮分泌的影响。【方法】以多肽得率为参考标准,对木瓜蛋白酶酶解牡蛎的加酶量、初始pH、酶解时间、酶解温度进行单因素及正交实验优化;通过MTT法及酶联免疫吸附试验(ELISA)检测不同浓度牡蛎酶解产物及其超滤组分对TM3小鼠睾丸间质细胞增殖及睾酮分泌的影响。【结果】木瓜蛋白酶最佳酶解条件为加酶量3 000 U/g,初始pH 6. 5,酶解温度62.5℃,酶解时间4.5 h,在此条件下其多肽质量浓度为14.95 mg/mL;牡蛎酶解液及其超滤组分在0.25～1.00 mg/mL质量浓度范围内,与空白对照组相比,能够显著增加TM3细胞的增殖活性(P0.05),且具有浓度依赖性和时间依赖性。其中,5 ku和5～10 ku超滤组分细胞增殖活性及促进睾酮分泌活性均最强。【结论】牡蛎酶解产物及其超滤组分可有效增强小鼠睾丸间质细胞增殖活性并促进其分泌睾酮。     

华贵栉孔扇贝酶法制备α-葡萄糖苷酶抑制肽工艺优化

【目的】为了进一步挖掘海洋贝类潜在的降血糖功能。【方法】选用华贵栉孔扇贝闭壳肌为原料,以抑制α-葡萄糖苷酶活性为评价指标,采用正交试验法和响应面分析法优化α-葡萄糖苷酶抑制肽的制备工艺。【结果】华贵栉孔扇贝(Chlamys nobilis)、马氏珠母贝(Pinctada fucata)和栉江珧(Atrina pectinate)等三种海洋贝类的闭壳肌酶解产物均对a-葡萄糖苷酶、a-淀粉酶和脂肪酶具有抑制活性;正交试验和响应面综合分析结果表明,华贵栉孔扇贝闭壳肌制备a-葡萄糖苷酶抑制肽的最佳工艺:复合蛋白酶酶添加量5 500 U/g,酶解温度57℃,酶解pH=7,酶解时间4 h,其酶解液中小肽含量21.64 mg/mL,a-葡萄糖苷酶的抑制率达到31.53%。【结论】利用响应面法可优化制备α-葡萄糖苷酶抑制肽的工艺。     

米曲霉产中性蛋白酶的适宜条件

研究了米曲霉产蛋白酶的分布,优化了米曲霉产中性蛋白酶的适宜培养条件以及培养基的最优组成。研究发现米曲霉产中性蛋白酶的能力为最强。米曲霉产中性蛋白酶的适宜培养条件为:m(麸皮)∶m(豆粕粉)=4∶1,水的质量分数为60%,培养基中各无机盐质量分数为:KNO30.2%,MgSO40.05%,Na2HPO40.13%,pH值为6.0,接种量为每10 g培养基接种1.0×108个孢子,最佳培养温度为30℃,最佳培养时间为48 h。在此培养条件下,最高酶活力达3 999.2 U.g-1。