水温对文昌鱼生殖活动的影响及其内分泌机制

采用慢性实验方法,研究在不同水温条件下饲养性腺发生前的文昌鱼(Branchiostoma belcheri)对其性腺分化和发育的影响。另外,在繁殖季节研究在低温16℃、中温22℃和高温28℃下饲养性成熟的文昌鱼对其产卵和排精的影响。同时,采用免疫组织化学方法对几种生殖相关激素在不同发育期文昌鱼的生殖调控轴(脑-哈氏窝-性腺)中的分布进行免疫识别,并用磁酶免定量测定方法检测睾酮和17 β-雌二醇在文昌鱼性腺中的含量,以分析和探讨水温影响文昌鱼生殖活动的内分泌机制。结果表明:低温有利于文昌鱼性腺向雌性分化,雌雄比例为4.2:1,中温和高温组则不受影响,雌雄数量大致相等。高水温则有利于文昌鱼的精巢发育和生精活动。28℃海水适于文昌鱼的产卵和排精。根据免疫组织化学和磁酶免定量测定的结果分析提示,温度影响文昌鱼性别分化和发育以及繁殖活动的内分泌机制是:首先水温经皮肤或哈氏窝化学感受器,刺激神经系统(脑泡)释放GnRH。然后GnRH促进哈氏窝分泌LH,从而可能刺激性腺产生和分泌性类固醇激素,始动文昌鱼性腺的发育至成熟及其生殖活动。此外,脑中芳香化酶可能介导文昌鱼性别分化。     

Preliminary study of gonadotropin-releasing analogue (GnRH-A) initiated gonadal development of amphioxus

Amphioxus in the seasonally regressed phase of gonadat development were used in this study. Each sample animal was injected with 40 nanogram of synthetic gonadotropin-releasing hormone analogue (GnRH-A) in distilled water every other day for up to 16 days; control animals received similar volumes of distilled wnter only. Both hormone-treated samples and control animals were examined under microscope every eight days and every twelve days. Then all the animals were killed on the 16th day. Gonads earlier development and a more advanced degree of gametogenesis are in the hormone-treated group than in the control group. Thus, GnRH-A can initiate and accelerate the gonadal development in gonadally regressed am-phioxus. GnRH-A in some form may be important in regulating the gonadal development in amphioxus as well as in vertebrates.     

厦门文昌鱼人工繁殖和幼虫发育及其变态的研究

用组织学和胚胎学方法对厦门国家级自然保护区文昌鱼的生殖季节、胚胎发育和幼虫培育进行详细研究,结果表明,自然保护区文昌鱼生殖季节可分为两个繁殖时期,从6月初开始至7月初为繁殖高峰期,8和9月为繁殖小产期.观察人工繁殖得出,文昌鱼(Branchiostoma belcheri)产卵时间在傍晚19:00前后,可以观察到雌、雄文昌鱼的产卵和排精行为:雄性文昌鱼先离开沙,并跃出水面快速游动和排精,接着雌鱼也跃出水面,所有的卵通过破裂的性腺壁进入到围鳃腔并通过围鳃孔到水中受精,受精率在98.5%以上,还观察了文昌鱼幼虫发育并变态为幼鱼(长度为1.05～13.5mm)的全过程.     

文昌鱼胚胎整装荧光原位杂交技术的建立

文昌鱼(Branchiostoma belcheri tsingtauense)是进化发育生物学研究的重要模式生物,文昌鱼胚胎整装荧光原位杂交(WFISH,whole-mounted fluorescent in situ hybridization)技术将有助于鉴定文昌鱼胚胎发育过程中具有重要调控作用的功能基因。报告了文昌鱼胚胎整装荧光原位杂交技术,用以快速灵敏分析特定基因在文昌鱼胚胎发育过程中的时空表达图式。用体外转录合成的地高辛标记文昌鱼FGFR基因的反义RNA探针,检测到FGFR在文昌鱼原肠胚中表达于发生内陷的中内胚层细胞中,而预定发育为外胚层的细胞不表达FGFR。     

福建北部海域海地瓜（Acaudina molpadioides）的性腺发育研究

海地瓜（Acaudina molpadioides）是一种低值海参,本研究运用组织学和形态学方法对福建北部海域海地瓜的性腺发育特征及其周年变化进行了研究,并进一步探究了性别比、生殖周期、精卵排放类型、繁殖季节等繁殖生物学相关内容。结果表明,雌、雄海地瓜的性腺发育均可划分为休止期 (I)、发育早期 (II)、增长期 (III)、成熟期 (IV)、部分排放期 (V) 和排空期 (VI),雌、雄性腺发育程度基本同步。海地瓜性腺发育有明显的周年变化规律:大多数海地瓜在5月性成熟后开始陆续排放配子,配子排放过程中伴随着生殖管的自体破坏然后重生,即性腺开始新一轮发育,新的生殖细胞在11月开始生成并逐步发育直至翌年5月成熟。海地瓜性别比接近1∶1,生殖周期为1年,繁殖期为5?8月（夏季）,属于多次排精卵类型。     

厦门皱瘤海鞘性腺发育的组织学研究

皱瘤海鞘雌性同体。性腺组织学观察结果表明，在厦门皱瘤海鞘卵巢和精巢发育和成熟可分为５人时期，在同一人体中，卵巢和精巢的发育不同步，因而不发生自体受精，另外，根据性腺发育的季节性观察，皱瘤海鞘常年都可繁殖，但生殖旺季在６月。     

文昌鱼线粒体基因组特征分析及分子标记探讨

线粒体基因组已被广泛应用于后生动物分子系统发育和群体遗传的研究。文昌鱼（Amphioxus）作为研究脊椎动物起源和进化的模式动物,在脊椎动物起源和进化研究中占据极为重要的位置。作者综合分析文昌鱼2科7个种的51条线粒体基因组全序列,全面揭示了文昌鱼线粒体基因组的基本特征。文昌鱼线粒体基因组均编码后生动物标准的37个基因...     

文昌鱼与比较基因组学和分子发育生物学

文昌鱼是现存的与脊椎动物原始祖先最接近的无脊椎动物，长期以来一直作为研究动物进化和胚胎发育的典型材料。目前，文昌鱼的基因序列和表达模式已经被广泛用于不同物种之间的比较基因组学研究和发育同源性分析中。文昌鱼独特的进化地位和它未经复制的基因组使其在比较基因组学中有着无可比拟的优越性，通过对文昌鱼、无脊椎动物和脊椎动物的基因组之间的比较，可以揭示脊椎动物原始祖先基因组的结构和演化过程进而探索人类的起源。同时，通过对文昌鱼和其它物种发育基因表达图式的比较可以显示不同生物身体部位之间的同源关系，并可以了解发育基因是如何引起不同物种之间形态变化的。     

湛江硇洲岛文昌鱼(Branchiostoma belcheri)的食性研究

于2006年4~7月在湛江硇洲岛海域采集文昌鱼,进行春夏季节不同性别、不同体长组等的胃含物观察分析。结果表明,湛江硇洲岛文昌鱼消化道残留食物成分以泥沙碎屑为主,可辨生物成分有34种,大部分为底栖硅藻,占58.8%,也有少量甲藻、瓣鳃类幼虫、底栖桡足类幼虫和原生动物等。春夏季节的文昌鱼的摄食喜好不尽相同,饵料生物的出现率随着季节的变化有所变化。不同性别文昌鱼的摄食喜好比较相近。文昌鱼到了性腺成熟后才开始进食动物性食物。研究结果表明,文昌鱼摄食藻类、微生物等而自身转化为其他动物的较高营养层次食物,在海洋食物网中具有一定的重要作用。     

从无脊椎动物到脊椎动物的纽带——头索动物文昌鱼

头索动物文昌鱼是现存的最接近脊椎动物的无脊椎动物,它的形体结构简单却具有脊索动物的基本特征,而且其没有经过大规模复制的基因组结构与脊椎动物的始祖很接近。文昌鱼占据着重要的进化地位,并且长期以来在进化生物学和发育生物学等研究领城中一直作为模式动物,本文从文昌鱼的发现、形态结构、物种及分布、生活习性和胚胎发育等方面作以阐述。     

Expression, purification and polyclonal antibody generation of p23, an Hsp90 cochaperone, in the amphioxus Branchiostoma belcheri

1Introduction p23, the 23-kDa protein originally identified asa component of the complex of heat shock protein 90(Hsp90) with the progesterone receptor (Johnson etal., 1994), is a ubiquitous and highly conservedprotein from yeast to humans (Garcia -Ranea …     

鲻鱼脑垂体组织生理学的研究

本文应用多种脑垂体染色技术和免疫组织化学方法对鲻鱼脑垂体各部分的组织结构进行较详细观察。结果表明,鲻鱼脑垂体可分为神经垂体和腺垂体两部分。腺垂体又 可分为前外侧部、中外侧部的体积随性腺发育成熟而增大。嗜生细胞（促性腺激素细胞）的分布从中外侧部扩展至前外侧部,同时还可区分促甲状腺细胞与促性腺激素细胞在中外侧部的形态和分布。免疫组织化学方法进一步证实脑垂体梁色技术所鉴定各种类型细胞的正确性。这项研究对     

威海海域文昌鱼的形态特征与分类学地位探讨

2002年3月,威海海域发现文昌鱼.研究观察了威海海域文昌鱼的主要形态特征,并与Branchiostoma belcheri和Branchiostoma japonicum做了相应比较,初步探讨其分类地位.结果表明,威海海域文昌鱼在体长与体高的比值(平均10.78±0.69)、肌节总数(平均67.12±0.87)、腹孔前肌节数(平均38.83±0.53)、腹孔～肛门肌节数(平均17.61±0.78)、肛门后肌节数(平均10.67±0.80)、背鳍室数目(平均308.55±15.65)、腹鳍室数目(平均57.26±5.07)、左侧生殖腺数目(平均25.69±2.24)和右侧生殖腺教目(平均28.20±2.03)等主要形态特征上与青岛海域的B.japonicum尤为接近.威海海域4月份性腺发育状况也与B.japonicum相符而不同于B.belcheri.认为威海海域文昌鱼为B.japonicum.为威海海域文昌鱼研究提供了基础资料,也为文昌鱼资源的保护和开发提供了必要依据.     

皱瘤海鞘神经递质和性类固醇激素含量与性腺发育成熟的关系

运用免疫组织化学和化学发光免疫分析方法研究了皱瘤海鞘(Styela plicata)神经递质多巴胺(DA)、5-羟色胺(5-HT)及其受体以及性类固醇激素含量与性腺发育成熟的关系.结果显示,DA和5-HT免疫活性定位在脑神经节中大小2种类型的神经细胞,DA免疫活性还定位在不同发育时期神经腺上皮细胞.5-HT受体免疫活性存在于脑神经节小型神经细胞和大生长期神经腺上皮细胞.在小生长期和大生长期性腺中均检测到DA、5-HT及其受体,提示DA和5-HT可能参与调节皱瘤海鞘的性腺发育.皱瘤海鞘为雌雄同体,化学发光免疫分析证实,海鞘性腺能够合成和分泌性类固醇激素,大生长期性腺中雄激素、孕激素和雌激素的含量分别为25.8±0.0、38.9±0.2和14.3±0.6pg/mg,提示性腺既是生殖组织也是内分泌组织.上述发现为证明尾索类海鞘可能像头索类文昌鱼一样,具有原始的生殖内分泌调控轴(脑神经节-神经腺-性腺)提供科学依据.     

昌黎县海洋环境承载力评估研究

选取昌黎县海岸线人工化指数、海域开发资源效应指数、海水水质等指标构建昌黎县海洋资源环境承载力评价指标体系,采用专项评价和综合评价相结合的方法,对河北省昌黎县资源环境承载力进行评估研究。结果表明,受入海悬沙量变化和入海污染物的影响文昌鱼栖息地遭到严重破坏,海洋生态承载状况为严重超载,因此需要采取控制污染源,加强监管等手段来改善文昌鱼生长环境压力。     

厦门文昌鱼雌雄同体的观察

本文报道了厦门文昌鱼雌雄同体的现象,在性腺中出现精巢和精卵巢相间排列。     

亚致死剂量铜对文昌鱼和玫瑰无须钯的组织病理学影响

采用半静水实验法测试研究了重金属Cu^2＋对文昌鱼（Branchiostoma belcher）和玫瑰无须喜巴（Puntius conchonius）的急性致死毒性和亚急性毒性。实验结果表明，Cu^2＋对文昌鱼和玫瑰无须喜巴24，48，72，96h的半致死浓度分别为0．561，0．373，0．261，0．211mg／L及0．976，0．783，0．562，0．473mg／L，其安全质量浓度分别为0．021和0．047mg／L。亚急性毒性实验中，文昌鱼和玫瑰无须喜巴分别用浓度为20％和30％的96h LC50的Cu^2＋处理。不同器官的组织病理学观察结果表明，过量Cu^2＋对玫瑰无须喜巴的鳃、肝脏、肾脏等器官产生毒害，对文昌鱼鳃和肝盲囊细胞也产生了严重的毒害，表现为细胞空泡化等明显的结构破坏。实验结果显示文昌鱼的肝盲囊和脊椎动物的肝脏一样，也是受过量铜显著毒害的主要靶器官器官。因此，文昌鱼的肝盲囊至少在经受过量Cu^2＋毒害方面与脊椎动物肝脏具有相似性，从生理功能方面为类文昌鱼祖先的盲囊（digestive caecum）是脊椎动物肝脏的前体这一假说提供了资料。     

文昌鱼幼体体腔、血管发育的初步研究

本文研究了24,48h文昌鱼幼体体腔、血管的发育状况,旨在为研究文昌鱼体腔细胞、粒细胞的起源和分化提供依据。1　材料和方法1.1　实验材料青岛文昌鱼(BranchiostomabelcheriTsingtauense)24,48h幼体。1.2　方法文昌鱼幼体经2.5%戊二醛(0.1mol/L二甲砷酸钠配制,pH7.3)固定1h,1%锇酸固定1h,然后经系列酒精脱水,Epon812包埋。半薄切片(2μm)经碱性美蓝-品红染色[1],光镜观察、照相。半薄切片定位的样品经超薄切片,醋酸双氧铀、柠檬酸铅染色,JEM-100cx电镜观察、照相。2　结果2.1　光镜观察结果青岛文昌鱼卵子在室温条件下自受精后50～60min…     

Ultrastructural study of oogenesis in Xiamen amphioxus

ＵｌｔｒａｓｔｒｕｃｔｕｒａｌｓｔｕｄｙｏｆｏｏｇｅｎｅｓｉｓｉｎＸｉａｍｅｎａｍｐｈｉｏｘｕｓ￥ＦａｎｇＹｏｎｇｑｉａｎｇａｎｄＱｉＸｉａｎｇ（ＲｅｃｅｉｖｅｄＡｐｒｉｌ１０，１９９３；ａｃｃｅｐｔｅｄＪｕｌｙ９，１９９３）Ａｂｓｔｒａｃｔ：─—Ｕ...     

海湾扇贝促性腺激素释放激素基因克隆及表达分析

促性腺激素释放激素(Gonadotropin Releasing Hormone,GnRH)是脊椎动物下丘脑-垂体-性腺轴的关键信号分子。近年来的研究显示,GnRH也存在于贝类等无脊椎动物,且在雌雄异体性别分化与繁殖中起重要作用,然而雌雄同体贝类GnRH的研究仍处于空白。本文以海湾扇贝为研究对象,利用RACE技术克隆获得GnRH的cDNA全长序列,该基因长1335 bp,编码101个氨基酸,前体包含1个由24个氨基酸组成的信号肽以及1个具有酰胺化修饰的活性肽(QNFHYSNGWQP-amide)。GnRH在脑足神经节和脏神经节中均有表达,且在2015年10月-2016年1月,GnRH在脑足神经节中的表达量显著高于脏神经节(P<0.05);GnRH在两个神经节中的表达均呈现先上升后下降的趋势,峰值出现在11月份,推测可能与性腺发育启动有关。本研究为深入理解GnRH在贝类繁殖调控中的作用奠定了基础。