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大菱鲆Hepcidin基因的克隆和真核表达载体的构建
引用本文:丛柏林,韩光,黄晓航,刘胜浩,林学政,陈靖. 大菱鲆Hepcidin基因的克隆和真核表达载体的构建[J]. 海洋科学进展, 2008, 26(1): 74-81
作者姓名:丛柏林  韩光  黄晓航  刘胜浩  林学政  陈靖
作者单位:国家海洋局,第一海洋研究所,山东,青岛,266061;海洋沉积与环境地质国家海洋局重点实验室,山东,青岛,266061;国家海洋局,第一海洋研究所,山东,青岛,266061
摘    要:Hepcidin是鱼类的一种重要的抗菌肽.通过比较GenBank中不同Hepcidin基因的同源相似性,设计出特异性的引物,以我国海水养殖大菱鲆(Scophthalmus maximus L)肝脏为模板利用RT-PCR 技术克隆获得了一条基因.使用生物信息学手段对该基因序列进行了比对和分析,证实这条基因为Hepcidin1 precursor基因,属于Hepcidin基因家族.通过设计引物在Hepcidin基因的5′和3′端分别引入EcoR I和NotⅠ酶切位点.经过双酶切后获得具有EcoR I和Not I酶切位点的Hepcidin成熟肽片段,并与同样使用该酶线性化的表达载体pPIC3.5K连接.构建了表达载体pPIC3.5K/Hepc1,并将其导入到酵母基因组中,完成了真核表达载体的构建,为Hepcidin的真核表达作了基础性的准备工作.

关 键 词:抗菌肽  Hepcidin基因  大菱鲆  基因克隆  真核表达
文章编号:1671-6647(2008)01-0074-08
收稿时间:2006-12-29
修稿时间:2006-12-29

Cloning and Eukaryotic Expression Vector Construction of Hepcidin Gene from Turbot (Scophthalmus maximus L)
CONG Bai-lin,HAN Guang,HUANG Xiao-hang,LIU Sheng-hao,LIN Xue-zheng,CHEN Jing. Cloning and Eukaryotic Expression Vector Construction of Hepcidin Gene from Turbot (Scophthalmus maximus L)[J]. Advances in Marine Science, 2008, 26(1): 74-81
Authors:CONG Bai-lin  HAN Guang  HUANG Xiao-hang  LIU Sheng-hao  LIN Xue-zheng  CHEN Jing
Abstract:
Keywords:antimicrobial peptide   Hepcidin gene   turbot   eukaryotie expression
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