三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)CYP4C基因的cDNA克隆及表达分析 |
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作者姓名: | 张晓燕 李健 刘萍 陈萍 孙铭 杨爱国 |
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作者单位: | 中国水产科学研究院黄海水产研究所;上海海洋大学;中国海洋大学;青岛汇泉海洋科技开发有限公司; |
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基金项目: | 国家863计划课题,2012AA10A409号;中央级公益性科研院所基本科研业务费项目资助,20603022012021号 |
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摘 要: | 采用RT-PCR及Smart-TM Race技术,首次获得三疣梭子蟹CYP4C基因cDNA全长序列。该基因全长1888bp,编码一个由514个氨基酸组成的多肽,预测分子量大小为59.54kDa,理论等电点为8.08。氨基酸序列中含有CYP基因家族特有的K螺旋保守序列(ExxR)和血红素结合区(FxxGxxxCxG)。同源性及系统进化分析表明,三疣梭子蟹CYP4C基因与岸蟹、凡纳滨对虾、日本沼虾、中国对虾、沟虾、红螯螯虾的同源性分别为88%、72%、66%、59%、60%、59%。荧光定量RT-PCR结果表明,CYP4C在肝胰腺、肌肉、眼柄、鳃和心脏中均有分布,在肝胰腺中表达量最高。高盐(45)胁迫后,三疣梭子蟹CYP4C的表达量显著高于对照组,随着胁迫时间的延长出现逐渐降低的趋势,在胁迫48h后表达量达到对照组水平;低盐(11)胁迫条件下,CYP4C的表达水平随着胁迫时间的延长呈现逐渐下降的趋势,且从胁迫6h开始显著低于对照组。研究推测,CYP4C基因参与三疣梭子蟹盐度适应调节,是蜕皮机制的调控因子之一。
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关 键 词: | 三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus) CYPC 基因克隆 表达 盐度胁迫 |
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