剑尾鱼微卫星DNA的筛选

以剑尾鱼(Xiphophorus helleri)为材料，经Mbo I限制性内切酶消化基因组DNA后，选取500～2000bp的片段连接到经BamH I酶切的pUC18载体上，转化大肠杆菌DH5α构建部分基因组文库。采用设计合成的(AC)7、(GT)7重复序列为引物，PCR筛选部分基因组文库，对其中9个重组阳性克隆进行测序，结果共获得24个微卫星序列，其中Perfect(完美型)13个，占54．2％；Imperfect(非完美型)3个，占12．5％；Compound(混合型)8个，占33．3％。表明(AC／GT)n在剑尾鱼的基因组DNA中含量非常丰富。同时，根据其中3个克隆微卫星的侧翼序列设计引物，PCR扩增剑尾鱼基因组DNA，结果均扩增到目的片段。而且，这3对引物扩增出来的微卫星片段在非选育的剑尾鱼中显示出多态性．而在近交系19代则表现为单态，为剑尾鱼的实验动物化遗传研究提供了理论依据。