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波纹龙虾C-型凝集素PhLecA的基因克隆与表达
摘    要:C-型凝集素是存在于所有后生动物中的一类Ca2+依赖性糖蛋白,能够识别并结合细菌和真菌表面的糖类物质,在机体免疫防御中发挥重要作用。采用RT-PCR和末端快速扩增技术(rapid amplification of c DNA ends,RACE)首次克隆了波纹龙虾Panulirus homaus C-型凝集素Ph Lec A的c DNA全长,共863bp,其中开放阅读框729 bp,编码一个243个氨基酸残基的蛋白,其中含一个17个氨基酸残基的信号肽和一个CRD(carbohydrate recognition domain)结构域。通过半定量RT-PCR检测发现,Ph Lec A的m RNA广泛分布于波纹龙虾各个组织,胚胎期以及幼体期,其中在肝胰腺组织表达量最高,胃肠组织及复眼色素形成期次之。采用定量PCR方法对WSSV(white spot syndrome virus)、哈维氏弧菌免疫刺激后波纹龙虾肝胰脏中的Ph Lec A转录水平检测,结果显示,波纹龙虾注射WSSV、哈维氏弧菌后,Ph Lec A表达量均发生了变化,总体趋势为先上调,然后下调至正常水平。研究显示,Ph Lec A可能在波纹龙虾对病毒、细菌的免疫应答过程中起重要作用。

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