具荧光活性的节旋藻藻蓝蛋白α亚基在大肠杆菌中的重组表达 |
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引用本文: | 衣俊杰,臧晓南,张学成,袁定阳,赵炳然,唐俐.具荧光活性的节旋藻藻蓝蛋白α亚基在大肠杆菌中的重组表达[J].中国海洋大学学报(自然科学版),2011,41(5):59-62,70. |
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作者姓名: | 衣俊杰 臧晓南 张学成 袁定阳 赵炳然 唐俐 |
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作者单位: | 1. 中国海洋大学海洋生命学院,山东青岛,266003 2. 国家杂交水稻工程技术研究中心,湖南长沙,410125 |
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基金项目: | 国家转基因生物新品种培育重大专项项目 |
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摘 要: | 为探索节旋藻藻蓝蛋白的生物合成机理,以钝顶节旋藻(Arthrospira platensisFACHB314)基因组DNA为模板克隆了藻蓝蛋白α亚基基因cpcA、催化脱辅基蛋白与色基结合的裂合酶基因cpcE和cpcF,以及催化色基合成的铁氧蛋白氧化还原酶基因pcyA;以Synechocystissp.PCC6803基因组DNA为模板克隆了亚铁血红素氧化酶基因hox1。然后分别将cpcA、cpcE和cpcF基因构建到质粒pACYCDuet-1中,将hox1和pcyA基因构建到质粒pET-24a(+)中,用电击法将二者共同转化E.coliBL21(DE3),经诱导表达得到具有荧光活性的节旋藻藻蓝蛋白α亚基。在590 nm激发波长下,荧光发射峰为637.8 nm,证实了节旋藻自身的裂合酶CpcE和CpcF能够催化色基PCB与藻蓝蛋白脱辅基结合产生有荧光活性的藻蓝蛋白α亚基,为表达有荧光活性的藻蓝蛋白提供理论和实验基础。
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关 键 词: | 节旋藻 藻蓝蛋白α亚基基因 裂合酶基因 重组 大肠杆菌 |
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