| 南极冰藻 Chlamydomonas sp.ICE-L的 cDNA文库构建及品质检测 |
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| 引用本文： | 王能飞,沈继红,金治平,赵爱云,林学政. 南极冰藻 Chlamydomonas sp.ICE-L的 cDNA文库构建及品质检测[J]. 海洋科学进展, 2006, 24(4): 520-525 |
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| 作者姓名： | 王能飞 沈继红 金治平 赵爱云 林学政 |
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| 作者单位： | 国家海洋局,第一海洋研究所,山东,青岛,266061;国家海洋局,海洋生物活性物质重点实验室,山东,青岛,266061;青岛市天然产物研究开发实验室,山东,青岛,266061;清华大学,生物系,北京,100084;青岛大学,天然色素研究所,山东,青岛,266071 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金 , 山东省青岛市自然科学基金 , 国家海洋局青年海洋科学基金 , 中国极地科学战略研究基金 |
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| 摘 要： | 为构建南极冰藻Chlamydomonassp.ICE-L的cDNA文库,提取对数生长期南极冰藻ICE-L的总RNA,以此为模板,通过PowerScript逆转录酶逆转录合成第一链cDNA;再以第一链cDNA产物为模板,用LD-PCR合成第二链cDNA。该cDNA产物经分级分离转入大肠杆菌中,即获得南极冰藻ICE-L的cDNA原始文库,其滴度为1.6×106cfu/mL。扩增后的cDNA文库的滴度为1.0×1010cfu/mL。用PCR方法测得文库的重组率大于97%,插入cDNA的长度为0.5~1.8 kb,0.9 kb以上插入片段占50%以上。取适量扩增文库稀释并铺平板,挑取72个独立菌落,对其中22个独立菌落所插入的cDNA进行测序,克隆到了一个具有5′和3′非编码区的40S ribosomalprotein S5全长基因序列,GenBank收录号为AM167929。
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| 关 键 词： | PCR 南极冰藻 Ribosomal protein S5 cDNA 文库 |
| 文章编号： | 1671-6647（2006）04-0520-06 |
| 收稿时间： | 2006-01-17 |
| 修稿时间： | 2006-01-17 |
Construction and Quality Detection of Cdna Library From Antarctic Ice Alga Chlamydomomas sp. ICE-L |
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| WANG Neng-fei,SHEN Ji-hong,JIN Zhi-ping,ZHAO Ai-yun,LIN Xue-zheng. Construction and Quality Detection of Cdna Library From Antarctic Ice Alga Chlamydomomas sp. ICE-L[J]. Advances in Marine Science, 2006, 24(4): 520-525 |
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| Authors: | WANG Neng-fei SHEN Ji-hong JIN Zhi-ping ZHAO Ai-yun LIN Xue-zheng |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | polymerase chain reaction(PCR) Antarctic ice alga ribosomal protein S5 cDNA library |
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