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Piwi基因参与两性卤虫(Artemia franciscana)的生殖调控研究
引用本文:任翊卓,韩学凯,左佳俊,欧阳雪梅,段虎,隋丽英. Piwi基因参与两性卤虫(Artemia franciscana)的生殖调控研究[J]. 海洋与湖沼, 2021, 52(6): 1567-1576
作者姓名:任翊卓  韩学凯  左佳俊  欧阳雪梅  段虎  隋丽英
作者单位:亚洲区域卤虫参考中心 天津科技大学海洋与环境学院 天津 300457
基金项目:天津市自然科学基金项目,18JCQNJC78500号;天津市科技支撑计划项目,17ZXZYNC00060号;教育部长江学者和创新团队发展计划资助项目,IRT-17R81号。
摘    要:Piwi(P-element induced wimpy testis)基因编码Piwi蛋白,在生殖干细胞的自我更新、减数分裂过程、RNA沉默和转录调控中起重要作用。为探究Piwi基因参与两性卤虫生殖发育的作用,从两性卤虫Artemia franciscana转录组中筛选获得Piwi基因开放阅读框,进行序列分析和结构域预测等生物信息学分析,采用qPCR技术研究该基因在A.franciscana生殖腺发育不同时期表达特征,并利用RNAi显微注射技术探究其功能。生物信息学分析表明,A.franciscana Piwi基因的开放阅读框长2 619 bp,编码872个氨基酸;Piwi基因编码的蛋白分子量为98.11 kDa,等电点为9.50,为碱性亲水性蛋白,无信号肽和跨膜结构;存在Piwi和PAZ结构域及ArgoL1结构域,二级结构以α-螺旋为主,三级结构与之对应;系统进化树显示A.franciscana与蚤状溞和大型溞的Piwi序列相似性最高。qPCR结果表明,Piwi基因在卵巢的卵黄发生晚期和晚期胚胎表达量最高,显著高于卵黄发生早期和早期胚胎(P<0.01);Piwi基因在精巢的未成熟期表达量最高,显著高于成熟早期、成熟中期和成熟晚期(P<0.01)。RNAi结果显示,该方法能显著降低Piwi基因的表达水平(P<0.01),并导致A.franciscana所产后代均为休眠卵,说明Piwi基因不但在A.franciscana生殖发育调控起重要作用,而且可能在其繁殖方式决定过程中起关键作用。研究结果为两性卤虫Piwi/piRNA功能和分子机制调控的研究提供了基础信息,将有助于揭示Piwi基因参与调控两性卤虫生殖发育机制。

关 键 词:Artemia franciscana  Piwi基因  生殖腺  基因表达特征  RNAi
收稿时间:2021-03-16
修稿时间:2021-04-29

THE REPRODUCTIVE REGULATION OF Piwi IN BISEXUAL ARTEMIA FRANCISCANA
REN Yi-Zhuo,HAN Xue-Kai,ZUO Jia-Jun,OUYANG Xue-Mei,DUAN Hu,SUI Li-Ying. THE REPRODUCTIVE REGULATION OF Piwi IN BISEXUAL ARTEMIA FRANCISCANA[J]. Oceanologia Et Limnologia Sinica, 2021, 52(6): 1567-1576
Authors:REN Yi-Zhuo  HAN Xue-Kai  ZUO Jia-Jun  OUYANG Xue-Mei  DUAN Hu  SUI Li-Ying
Affiliation:Asia Regional Artemia Reference Center, College of Marine and Environmental Sciences, Tianjin University of Science and Technology, Tianjin 300457, China
Abstract:
Keywords:Artemia franciscana  Piwi gene  gonad  gene expression character  RNAi
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