青蛤(Cyclina sinensis)IκB基因的克隆及其在鳗弧菌(Vibrio anguillarum)刺激下的表达分析 |
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引用本文: | 魏星,张海静,潘宝平.青蛤(Cyclina sinensis)IκB基因的克隆及其在鳗弧菌(Vibrio anguillarum)刺激下的表达分析[J].海洋与湖沼,2015,46(4):793-799. |
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作者姓名: | 魏星 张海静 潘宝平 |
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作者单位: | 天津师范大学生命科学学院 天津市动植物抗性重点实验室 天津 300387,天津师范大学生命科学学院 天津市动植物抗性重点实验室 天津 300387,天津师范大学生命科学学院 天津市动植物抗性重点实验室 天津 300387 |
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基金项目: | 天津市科委应用基础与前沿技术重点项目资助,12JCZDJC22800号,09JCZDJC19300号,14JCZDJC34200号。 |
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摘 要: | 利用青蛤(Cyclina sinensis)转录组文库信息,设计引物并克隆得到了青蛤TLRs信号通路中的关键信号分子IκB(Cs IκB)基因的c DNA序列。该基因的开放阅读框为1134bp,编码377个氨基酸,分子量为41.79k Da,其结构具备IκB家族基因的典型特征,包括C端的6个锚蛋白重复序列(ankyrin repeat,ANK),N端的DS64GILS68降解序列以及C端的酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点(S373DDES377)。经BLASTX比对及分子系统学分析证明其是IκB家族的一员。进一步利用实时荧光定量PCR技术检测了Cs IκB基因在青蛤不同组织及其在鳗弧菌(Vibrio anguillarum)胁迫下在特定组织中的时序性表达情况。结果表明,该基因在样品的血淋巴、肝脏、外套膜、闭壳肌、鳃和性腺6种组织中普遍表达,其中以血淋巴中表达水平最高。在鳗弧菌刺激后3h Cs IκB在青蛤血淋巴中表达量明显上调,并于6h达到最大值,说明该基因参与了青蛤非特异免疫应答反应。
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关 键 词: | 青蛤 CsIκB 鳗弧菌 TLRs信号通路 荧光定量PCR |
收稿时间: | 2015/5/24 0:00:00 |
修稿时间: | 6/8/2015 12:00:00 AM |
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