基于网络药理学与实验研究探讨枳葛保肝降脂方治疗酒精性肝病的作用机制

目的：基于网络药理学与实验研究探讨枳葛保肝降脂方治疗酒精性肝病(ALD)的可能作用机制。方法：筛选枳葛保肝降脂方的潜在有效成分,通过蛋白质-蛋白质相互作用（PPI）网络、基因本体（GO）功能、京都基因与基因组百科全书（KEGG）通路富集分析、分子对接及实验研究对核心靶点、通路等进行验证。通过HE病理染色、ELISA、PCR、Western Blot等方法检测枳葛保肝降脂方对ALD大鼠肝组织及血清相关指标的影响。结果：获得枳葛保肝降脂方靶点321个,ALD相关基因1 635个,交集基因178个,其中核心靶点15个。核心靶点基因包括人细胞质肌动蛋白1（ACTB）、白细胞介素- 6（IL-6）等。GO功能主要涉及调控外来生物刺激、氧化应激、肽反应等多种生物过程。KEGG通路主要富集在磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B（PI3K/Akt）信号通路、肿瘤坏死因子（TNF)信号通路、白细胞介素17（IL-17）信号通路等。葛根素、木犀草素可能是枳葛保肝降脂方治疗ALD的核心活性化合物。HE染色结果显示,模型组大鼠部分肝细胞排列紊乱,肝细胞坏死,并伴有大量的脂滴空泡;与模型组相比,各治疗组大鼠肝组织病变均有不同程度的改善。模型组白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子 α(TNF-α)、TNF-α mRNA、IL-6 mRNA及蛋白磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、磷酸化磷脂酰肌醇3-激酶 (p-PI3K)、蛋白激酶 B(AKT)、磷酸化蛋白激酶 B(p-AKT)水平与正常组比较,美他多辛组及中药各剂量组IL-6、TNF-α、IL-6 mRNA、TNF-α mRNA及蛋白PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT水平与模型组比较,差异均有统计学意义（P＜0.01或P＜0.05）。结论：枳葛保肝降脂方通过多成分、多靶点、多信号通路治疗ALD,可以通过上调p-PI3K、p-AKT的表达,抑制炎症进而起到治疗 ALD的作用。