基于一测多评法的半夏碱基和核苷含量测定

目的：采用高效液相色谱法（HPLC）建立半夏中2种碱基（尿嘧啶、次黄嘌呤）和3种核苷（尿苷、鸟苷、胸苷）的定量检测方法，以验证该方法在半夏质量控制中应用的可行性和技术适应性。方法：超声提取半夏粉末，采用HPLC法检测尿嘧啶、次黄嘌呤、尿苷、鸟苷、胸苷的含量。使用Agilent ZORBAX SB-C¹⁸色谱柱（4.6 mm×250 mm，5μm），以水-甲醇为流动相，流速0.8 ml/min，检测波长260 nm，柱温30℃，进样量10μl，梯度洗脱（0～7 min，2%～2%甲醇；7.1～13 min，3%～3%甲醇；13～25 min，3%～20%甲醇；25～40 min，20%～98%甲醇）。以鸟苷为内参物，建立尿嘧啶、次黄嘌呤、尿苷、胸苷相对于鸟苷的相对校正因子，并进行含量计算，实现一测多评。同时采用外标法测定10批半夏药材中5种成分的含量，比较计算值与实测值的差异，验证一测多评的准确性。结果：此种方法建立的相对校正因子在不同仪器中的耐用性良好。计算值与实测值之间无显著性差异（RSD<1.3%）。结论：本研究建立的半夏中5种成分同时测定的一测多评法，简单易行，成本较低，可为后续物质基础及作用机制研究提供借鉴。

Content determination of Pinellia ternate bases and nucleosides based on quantitative analysis of multi-components by single marker