| 逐步添加法制备单链环状DNA的影响因素探究 |
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| 引用本文： | 樊一乔,安然,李琦,李敬,梁兴国.逐步添加法制备单链环状DNA的影响因素探究[J].中国海洋大学学报(自然科学版),2019(2):36-43. |
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| 作者姓名： | 樊一乔 安然 李琦 李敬 梁兴国 |
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| 作者单位： | 中国海洋大学食品科学与工程学院;青岛海洋科学与技术国家实验室海洋药物与生物制品功能实验室 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(31571937;31301420);中央高校基本科研业务费专项(201713050)资助~~ |
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| 摘 要： | 单链环状DNA在纳米技术、分子生物学和医药学等领域具有广泛的应用前景,但难以大量制备一直是制约其研究和应用的难题之一。本文针对一种高效大量制备单链环状DNA的方法-逐步添加法,系统地探究了逐步添加法中各主要条件对制备单链环状DNA的影响,确定了逐步添加法中的主要关键条件为:T4DNA连接酶Buffer浓度、单链DNA浓度、添加间隔时间、温度和Splint GC含量。以72nt的核酸链为例,使用逐步添加法将单链环状DNA的制备得率提高至99%,产量与常用的一步法相比提高至4.9倍。本研究为高效、大量制备单链环状DNA提供了指导,为以单链环状DNA为基础的研究奠定了基础。
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| 关 键 词： | 逐步添加法 单链环状DNA 纳米技术 关键因素 高效制备 |
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