RAPD技术在龙须菜遗传多样性研究中的应用 Ⅰ总DNA的提取及RAPD反应条件的优化 |
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作者姓名: | 李向峰 隋正红 张学成 |
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作者单位: | 青岛海洋大学海洋生命学院 |
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基金项目: | 国家“攀登计划B”项目,曾呈奎海洋科学发展基金 |
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摘 要: | 比较两种从龙须菜中提取总DNA的方法,这两种方法得到的染色体DNA具有较好的完整性,从DNA的产量、蛋白质含量等指标可以看出,CTAB法优于蛋白酶K法。实验对龙须菜RAPD反应条件进行了优化:在25μL反应体系中,含有Mg2+2.5mmol/L,dNTP100μmol/L,总DNA25ng,引物0.2μmol/L和Taq酶1U,经94℃变性1min,35℃退火1min,72℃延伸2min,35个循环,得到稳定的RAPD扩增图谱。
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关 键 词: | 龙须菜;蛋白酶K;十六烷基三甲基溴化铵法(CTAB);脱氧核糖核酸(DNA);随机扩增多态性DNA(RAPD) |
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