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皱纹盘鲍(Haliotis discushannai Ino)胚胎RNA分离和cDNA文库构建
引用本文:刘晓,赵敏,高其康,张国范. 皱纹盘鲍(Haliotis discushannai Ino)胚胎RNA分离和cDNA文库构建[J]. 海洋与湖沼, 2006, 37(4): 355-360
作者姓名:刘晓  赵敏  高其康  张国范
作者单位:1. 中国科学院海洋研究所,青岛,266071
2. 中国科学院海洋研究所,青岛,266071;中国科学院研究生院,北京,100039
3. 浙江大学分析测试中心,杭州,310029
基金项目:国家自然科学基金项目,30271018号,国家863计划项目,2004AA626070号,青岛市自然科学基金项目,032JZP9号资助
摘    要:从皱纹盘鲍胚胎样本中分离RNA并构建了cDNA文库。分别收集孵化8、10和12h的皱纹盘鲍胚胎,用抽滤除菌的海水反复悬浮胚胎,将这3个发育阶段的胚胎样本等量混合后用TRIZOL试剂提取总RNA,将提取物用酚氯仿异戊醇再抽提2次,分离获得高质量的总RNA。从总RNA中分离mRNA,构建了皱纹盘鲍混合胚胎的cDNA文库,未扩增胚胎文库的滴度为5.0×106pfu/ml,重组率为94.12%,插入片段均大于400bp,70.6%克隆的插入片段分布在1000—1500bp之间,扩增后的文库滴度为3.06×109pfu/ml。

关 键 词:皱纹盘鲍  胚胎  cDNA文库  基因表达
收稿时间:2005-02-16
修稿时间:2006-01-22

ISOLATION OF RNA AND CONSTRUCTION OF FULL-LENGTH CDNA LIBRARY OF EMBRYO HALIOTIS DISCUS HANNAI INO
LIU Xiao,ZHAO Min,GAO Qi-Kang and ZHANG Guo-Fan. ISOLATION OF RNA AND CONSTRUCTION OF FULL-LENGTH CDNA LIBRARY OF EMBRYO HALIOTIS DISCUS HANNAI INO[J]. Oceanologia Et Limnologia Sinica, 2006, 37(4): 355-360
Authors:LIU Xiao  ZHAO Min  GAO Qi-Kang  ZHANG Guo-Fan
Affiliation:Institute of Oceanology, Chinese Academy of Sciences, Qingdao 266071;Institute of Oceanology, Chinese Academy of Sciences, Qingdao, 266071;Graduate School, Chinese Academy of Sciences, Beijing, 100039;Zhejiang University, Hangzhou, 310029;Institute of Oceanology, Chinese Academy of Sciences, Qingdao 266071
Abstract:
Keywords:Haliotis discus hannai Ino   Embryo   cDNA library   Gene expression
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