| 鳗弧菌膜绑定溶胞壁质转糖酶MltD的表达纯化及生物信息学分析 |
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| 引用本文： | 徐子男,张晓华. 鳗弧菌膜绑定溶胞壁质转糖酶MltD的表达纯化及生物信息学分析[J]. 中国海洋大学学报(自然科学版), 2011, 0(Z2): 101-106 |
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| 作者姓名： | 徐子男 张晓华 |
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| 作者单位： | 中国海洋大学海洋生命学院; |
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| 基金项目： | 国家重点基础研究发展计划项目(2006CB101803); 中国科学院实验海洋生物学重点实验室项目资助 |
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| 摘 要： | 本研究将新发现的鳗弧菌毒力相关基因mltD(膜绑定溶胞壁质转糖酶基因)克隆于表达载体pET-32a(+),在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,并以镍琼脂糖亲和层析柱纯化表达的融合蛋白;经SDS-PAGE分析,纯化的融合蛋白为单一条带,分子量约为70.2 kDa,与理论预测值相符。生物信息学分析表明,鳗弧菌MltD由523个氨基酸组成,与其他弧菌的MltD氨基酸序列有较高的相似性;二级结构以α螺旋和无规则卷曲为主;功能区包括N端的信号肽区域、1个糖基转移酶结构域和C端的3个溶解酶结构域;蛋白的N端具有一段脂蛋白信号肽,信号肽外的其他部分为非细胞质蛋白。鳗弧菌MltD蛋白为亲水性;不稳定系数为27.40,属于稳定性蛋白;整个蛋白分子共有24个可能的抗原决定簇,具有较强的抗原性。推断MltD蛋白为1种外周膜脂蛋白,在弧菌中相对保守,抗原性强,可应用于抗弧菌病疫苗的开发研制。
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| 关 键 词： | 鳗弧菌 MltD蛋白 原核表达 纯化 生物信息学分析 |
Expression,Purification and Bioinformatic Analysis of Membrane-Bound Lytic Murein Transglycosylase D(MltD) Protein in Vibrio anguillarum |
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| XU Zi-Nan,ZHANG Xiao-Hua. Expression,Purification and Bioinformatic Analysis of Membrane-Bound Lytic Murein Transglycosylase D(MltD) Protein in Vibrio anguillarum[J]. Periodical of Ocean University of China, 2011, 0(Z2): 101-106 |
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| Authors: | XU Zi-Nan ZHANG Xiao-Hua |
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| Affiliation: | XU Zi-Nan,ZHANG Xiao-Hua(College of Marine Life Sciences,Ocean University of China,Qingdao 266003,China) |
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| Abstract: | In this study,membrane-bound lytic murein transglycosylase D(mltD) from Vibrio anguillarum was chosen as the research object.MltD gene was subcloned into an expression plasmid pET-32a(+),and overexpressed in Escherichia coli strain BL21(DE3).The expressed MltD protein was purified by Ni2+-affinity chromatography.The molecular weight of recombinant protein was assessed to be about 70.2 kD by SDS-PAGE analysis,which was consistent with the therotical value.Bioinformatic analysis showed that the MltD consisted... |
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| Keywords: | Vibrio anguillarum membrane-bound lytic murein transglycosylase D(MltD) prokaryotic expression purification bioinformatic analysis |
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