健脾消癌方对人结肠癌HCT116细胞AKT、mTOR表达的影响

目的：探讨健脾消癌方（JPXA）含药血清对人结肠癌HCT116细胞丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶（AKT）、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）表达以及对细胞增殖、细胞周期及凋亡的影响。方法：取不同浓度的JPXA含药血清作用于HCT116细胞，筛选JPXA含药血清处理HCT116细胞的半抑制浓度（IC50），并将HCT116细胞分为实验组和对照组，予以相应处理后，采用CCK-8法检测细胞增殖能力，PI-FACS法检测细胞周期变化，Annexin V-APC 单染法流式细胞仪检测凋亡水平，并采用Rt-PCR检测AKT mRNA、mTOR mRNA水平，采用Western Blot检测AKT、p-AKT、mTOR及磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（p-mTOR）水平。结果：与对照组相比，实验组HCT116细胞增殖能力显著下降，能使细胞周期停留在G1期及S期，且细胞凋亡水平上升，差异均有统计学意义（P<0.05）。与对照组相比，实验组AKT mRNA、mTOR mRNA表达水平及AKT、p-AKT、mTOR、p-mTOR蛋白含量明显下降（P<0.05或P<0.01）。结论：JPXA能抑制AKT、mTOR表达，对结肠癌细胞的增殖、克隆能力有一定抑制作用，并可在一定程度上促进结肠癌细胞的凋亡。