基于网络药理学及实验验证探究金水六君煎对人支气管上皮细胞黏液高分泌的影响 |
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引用本文: | 李福星.基于网络药理学及实验验证探究金水六君煎对人支气管上皮细胞黏液高分泌的影响[J].应用海洋学学报,2023,39(9):161. |
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作者姓名: | 李福星 |
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作者单位: | 湖南中医药大学,湖南 长沙,410208 |
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摘 要: | 目的:通过网络药理学挖掘金水六君煎治疗气道黏液高分泌的潜在靶点,并采用体外实验探究金水六君煎对人支气管上皮细胞黏液高分泌的干预作用及作用机制。方法:采用网络药理学预测金水六君煎治疗气道黏液高分泌潜在靶点。将24只雄性SPF大鼠随机分为2组,中药组与正常组分别用金水六君煎[5.26g/(kg·d)]和等体积0.9%氯化钠注射液灌胃,5 d后麻醉下取大鼠含药血清和正常血清;将第5代人支气管上皮细胞分为正常组、模型组、不同浓度(10%、15%、20%)含药血清组、阿奇霉素组;正常组予常规培养液培养12 h后,加入15%正常大鼠血清干预12 h;其余各组采用香烟提取物(CSE)联合脂多糖(LPS)干预12h构建人支气管上皮细胞黏液高分泌模型,模型组干预后,加入15%正常大鼠血清干预12 h;不同浓度含药血清组干预后,分别加入10%、15%、20%含药血清继续干预12 h;阿奇霉素组干预后,加入含25μmol/L阿奇霉素血清继续干预12 h。采用CCK8检测细胞活力;采用Western blot法验证潜在靶点。结果:网络药理学预测黄芩素、松柏苷是与疾病靶点连接最广泛的活性物质,蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络与分子对接发现关键靶点可能为基质金属蛋白酶9(MMP9)、血管内皮生长因子(VEGF)。实验研究结果显示,干预后各组细胞活性较正常组降低(P<0.05),15%含药血清组和阿奇霉素组细胞活性较模型组升高(P<0.05),10%、20%含药血清组细胞活性较阿奇霉素组低(P<0.05)。黏蛋白5AC(MUC5AC)是黏液高分泌的重要蛋白,其表达增加代表模型建立成功。干预后各组MMP9、VEGF、MUC5AC蛋白相对表达量较正常组增加(P<0.05),15%含药血清组和阿奇霉素组MMP9、VEGF、MUC5AC蛋白相对表达量较模型组降低(P<0.05)。结论:金水六君煎对MUC5AC、MMP9、VEGF呈现抑制作用,揭示其机制可能是通过多靶点、多成分作用于气道黏液高分泌。
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关 键 词: | 金水六君煎 气道黏液高分泌 细胞实验 人支气管上皮细胞 |
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