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坛紫菜碳酸酐酶基因的克隆、表达及酶活性分析
引用本文:郇 丽,贾兆君,张宝玉,牛建峰,林阿朋,何林文,王广策. 坛紫菜碳酸酐酶基因的克隆、表达及酶活性分析[J]. 海洋科学, 2014, 38(8): 8-15
作者姓名:郇 丽  贾兆君  张宝玉  牛建峰  林阿朋  何林文  王广策
作者单位:中国科学院 海洋研究所;中国科学院大学 研究生院;大连理工大学 生命科学与技术学院;中国科学院 海洋研究所;中国科学院 海洋研究所;中国科学院 海洋研究所;中国科学院 海洋研究所;中国科学院 海洋研究所
基金项目:公益性行业(农业)科研专项(200903030); 国家自然科学基金(41176134); 海洋公益性行业科研专项项目(201105023-7); 国家973 计划前期专项(2011CB411908)
摘    要:以坛紫菜丝状体为材料,采用RACE方法获得坛紫菜碳酸酐酶(CA)基因的全长cDNA。该cDNA全长1 081 bp,具有一个825 bp的开放阅读框,可编码274个氨基酸。序列同源性分析显示该cDNA序列推导的氨基酸序列与其他物种的碳酸酐酶具有较高的一致性,其中与条斑紫菜的一致性达到96%。氨基酸序列分析表明该蛋白为β-CA,含有两个CA活性位点,无跨膜结构,可能存在一个信号肽将其定位到叶绿体中,与藻类和细菌聚类。原核诱导表达得到一个72 kDa左右的融合蛋白,酶活测定结果显示此蛋白具有碳酸酐酶活性。该实验对进一步深入研究坛紫菜CA的功能及坛紫菜碳代谢、光合作用等生理过程具有重要的参考价值。

关 键 词:坛紫菜  碳酸酐酶  序列分析  原核表达  酶活性
收稿时间:2013-01-04
修稿时间:2013-03-12

Gene cloning, expression and enzyme activity analysis of the carbonic anhydrase from Porphyra haitanensis(Rhodophyta)
Abstract:
Keywords:Porphyra haitanensis   carbonic anhydrase   sequence analysis   prokaryotic expression   enzyme activity
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