| 海洋无脊椎动物组织总RNA提取方法的探讨 |
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| 引用本文： | 冯政夫,王 琳,李文侠,部 凡,胡彦江,朱 伟.海洋无脊椎动物组织总RNA提取方法的探讨[J].海洋科学,2014,38(11):24-28. |
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| 作者姓名： | 冯政夫 王 琳 李文侠 部 凡 胡彦江 朱 伟 |
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| 作者单位： | 青岛农业大学 生命科学学院,山东 青岛,266109 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(31272678), 山东省现代农业产业技术体系项目(SDAIT-15-011-10), 青岛农业大学实验技术研究项目(SYJK 12-14) |
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| 摘 要： | RNA提取是分子生物学研究的基础实验,由于海洋无脊椎动物组织结构以及体成分的特殊性,导致现有的RNA提取方法不能完全胜任此工作。作者以刺参(Apostichopus japonicus)、栉孔扇贝(Chlamys farreri)和凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)为研究对象,对异硫氰酸胍RNA提取方法进行了改进。栉孔扇贝和凡纳滨对虾的肝胰腺富含RNase,刺参体壁结构致密、富含胶原蛋白,而成熟期精巢富含多糖,因此在这些动物组织中提取RNA时,在原有方法基础上增加了瞬时匀浆、增加氯仿及酸性酚的抽提次数,或添加高盐溶液等方法。实验结果显示,改进方法后获得的RNA具有完整的28S、18S和5S r RNA条带,A260nm/A280nm和A260nm/A230nm比值分别为1.89~2.0和1.98~2.11,β-actin基因扩增条带清晰,所获得的组织RNA的纯度和质量符合c DNA合成和基因功能研究的要求。
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| 关 键 词： | 无脊椎动物 RNA提取 刺参(Apostichopus japonicus) 栉孔扇贝(Chlamys farreri) 凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei) |
| 收稿时间： | 2014/1/28 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2014/5/22 0:00:00 |
Extraction of total RNA from marine invertebrate tissue |
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| FENG Zheng-fu
,
WANG Lin
,
LI Wen-xia
,
BU Fan
,
HU Yan-jiang
,
ZHU Wei.Extraction of total RNA from marine invertebrate tissue[J].Marine Sciences,2014,38(11):24-28. |
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| Authors: | FENG Zheng-fu WANG Lin LI Wen-xia BU Fan HU Yan-jiang ZHU Wei |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | marine invertebrate RNA extraction Apostichopus japonicus Chlamys farreri Litopenaeus vanna |
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