| 海洋微生物低温碱性脂肪酶的纯化与性质研究 |
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| 引用本文： | 董宏伟,孙 谧,王跃军,于建生.海洋微生物低温碱性脂肪酶的纯化与性质研究[J].海洋与湖沼,2004,35(4):376-383. |
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| 作者姓名： | 董宏伟 孙 谧 王跃军 于建生 |
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| 作者单位： | 中国水产科学研究院黄海水产研究所,青岛,266071;青岛科技大学化工学院,青岛,266042;中国水产科学研究院黄海水产研究所,青岛,266071;青岛科技大学化工学院,青岛,266042 |
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| 基金项目： | 国家“8 6 3”计划资助项目,2 0 0 1AA6 2 5 0 70号 |
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| 摘 要： | 以海洋微生物通过发酵制备的脂肪酶为材料 ,对该酶的分离纯化条件及理化性质进行了研究。在脂肪酶纯化中 ,采用氯仿萃取、中空纤维柱超滤及CM SepharoseFF阳离子交换柱层析等技术对发酵制备的脂肪酶进行了纯化 ,结果得到达到电泳纯的脂肪酶。在脂肪酶理化性质研究中 ,采用SDS PAGE电泳对该脂肪酶分子量进行测定 ,并在实验中以橄榄油为底物采用脂肪酶酸碱滴定测活法 ,对脂肪酶的最适水解条件、各种因素对脂肪酶稳定性的影响进行了研究。结果显示 ,该脂肪酶分子量为 ( 38 0± 1 )kD ,最适水解温度为 35℃ ,最适pH为 8 5 ,为一低温碱性脂肪酶。该脂肪酶可在 35℃以下、pH =4 0— 9 0范围内保持良好的稳定性 ,与常见金属离子、化学试剂等的配伍性较好 ,并且具有良好的耐盐及抗氧化性能。研究中还以p NPL(月桂酸对硝基苯酚酯 )为底物采用脂肪酶化学发光测活法 ,对脂肪酶进行了酶促动力学的研究。结果表明 ,该脂肪酶在最适条件下Km 值为 7 80 5 μmol/L ,Vmax为 1 2 385mmol/ (L·min)。通过对Zn2 +抑制脂肪酶水解活性的研究 ,发现Zn2 +对脂肪酶具有可逆抑制作用 ,从而筛选到该脂肪酶的可逆抑制剂Zn2 +。
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| 关 键 词： | 海洋微生物 低温碱性脂肪酶 分离纯化 理化性质 |
| 收稿时间： | 2003/9/25 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2003年9月25日 |
PURIFICATION AND CHARACTERIZATION OF A LOW-TEMPERATURE ALKALINE LIPASE FROM MARINE MICROORGANISMS |
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| DONG Hong-Wei,SUN Mi,WANG Yue-Jun and YU Jian-Sheng.PURIFICATION AND CHARACTERIZATION OF A LOW-TEMPERATURE ALKALINE LIPASE FROM MARINE MICROORGANISMS[J].Oceanologia Et Limnologia Sinica,2004,35(4):376-383. |
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| Authors: | DONG Hong-Wei SUN Mi WANG Yue-Jun and YU Jian-Sheng |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Marine microorganism Low-temperature alkaline lipase Separation and purification Characterization |
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