| 牙鲆RAG2 基因的质粒构建和体外原核表达 |
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| 引用本文： | 王先磊,谭训刚,张培军,徐永立. 牙鲆RAG2 基因的质粒构建和体外原核表达[J]. 海洋科学, 2012, 36(9): 59-63 |
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| 作者姓名： | 王先磊 谭训刚 张培军 徐永立 |
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| 作者单位： | 1. 中国科学院 海洋研究所, 实验海洋生物学重点实验室 山东 青岛 266071
2. 青岛国家海洋科学研究中心, 山东 青岛 266071 |
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| 基金项目： | 国家863 计划资助项目(2012AA092203); 国家自然科学基金项目(30800838); 山东省自然科学基金项目(Y2008E12) |
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| 摘 要： | 将牙鲆(Paralichthys olivaceus)RAG2 cDNA序列插入到体外表达质粒pProEXTM HT,在大肠杆菌(Escherichia coli) BL-21中进行体外表达,分析了诱导时间和 IPTG 浓度对重组蛋白产生量的影响,确定了最佳诱导条件为:诱导时间为3 h, IPTG诱导浓度0.2 mmol/L.本研究同时对RAG2重组蛋白的可溶性进行确认,并利用BD TALONTM 金属亲和柱纯化了RAG2蛋白.本研究结果为进一步深入研究RAG2蛋白的生物学功能奠定了良好的基础.
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| 关 键 词： | 牙鲆(Paralichthys olivaceus) RAG2 重组 纯化 |
| 收稿时间： | 2011-11-04 |
| 修稿时间： | 2012-02-17 |
Construction and expression of a prokaryotic vector of recombinant olive flounder RAG2 |
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| Abstract: | The full length of olive flounder RAG2 cDNA was ligated to plasmid pPROEXTM HT, and was transferred into Escherichia coli (BL-21) for recombinant protein expression. It showed that the protein expression was induced by IPTG. The optimal concentration of IPTG and optimal induction time were 0.2 mmoL/L and 3 h, respectively. The recombinant RAG2 protein was purified by BD TALONTM Metal Affinity Resins. This study will be useful for further research on the function of flounder RAG2. |
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| Keywords: | Olive flounder (Paralichthys olivaceus) RAG2 recombination purification |
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