| 几种海洋微藻基因组DNA的分离提取及PCR检测 |
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| 引用本文： | 张桂和,徐碧玉,王珺. 几种海洋微藻基因组DNA的分离提取及PCR检测[J]. 热带海洋学报, 2007, 26(1): 68-72 |
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| 作者姓名： | 张桂和 徐碧玉 王珺 |
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| 作者单位： | 海南大学;海南大学 |
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| 基金项目： | 海南省自然科学基金;海南省教育厅科研项目;海南大学校科研和教改项目 |
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| 摘 要： | 用改良CTAB法分别提取6种海洋微藻的基因组DNA,发现提取的DNA纯度、产率高(>100μg.g-1鲜重),DNA完整性好。以6种海洋微藻的基因组DNA为模板,并以5'TTCGAGCCAG3'(OPC-01)为随机引物,对PCR反应条件进行研究。结果表明,25μl反应体系中,Mg2 、Taq DNA聚合酶、引物、模板DNA和dNTP 5种主要成分的适宜浓度或用量分别是:2.0mmol.L-1、1.6U、20pmol.L-1、50ng和2.5mmol.L-1。扩增程序优化为:94℃预变性5min,94℃变性1min,36℃退火1min,72℃延伸2min,循环45次,最后于72℃再延伸10min。酶切实验结果表明,6种海洋微藻的基因组DNA都能被EcoRⅠ酶切,酶切图谱呈弥散状,满足分子水平操作的要求,可直接应用于进一步的分子生物学实验。
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| 关 键 词： | 海洋微藻 DNA提取 CTAB 酶切 PCR检测 |
| 文章编号： | 1009-5470（2007）01-0068-05 |
| 收稿时间： | 2006-03-29 |
| 修稿时间： | 2006-07-31 |
Genomic DNA extraction from several marine microalgae species and their examination by polymerase chain reaction (PCR) |
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| ZHANG Gui-he,XU Bi-yu,WANG Jun. Genomic DNA extraction from several marine microalgae species and their examination by polymerase chain reaction (PCR)[J]. Journal of Tropical Oceanography, 2007, 26(1): 68-72 |
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| Authors: | ZHANG Gui-he XU Bi-yu WANG Jun |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | CTAB |
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