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凡纳滨对虾水孔蛋白-4的cDNA克隆及盐度胁迫对其肝胰腺mRNA表达水平的影响
引用本文:高 沿,胡超群,任春华,钱 璟,何香燕,江 晓,黄 文.凡纳滨对虾水孔蛋白-4的cDNA克隆及盐度胁迫对其肝胰腺mRNA表达水平的影响[J].海洋科学,2017,41(2):61-70.
作者姓名:高 沿  胡超群  任春华  钱 璟  何香燕  江 晓  黄 文
作者单位:中国科学院 南海海洋研究所, 中国科学院热带海洋生物资源与生态重点实验室 广东省应用海洋生物学重点实验室;中国科学院大学,中国科学院 南海海洋研究所, 中国科学院热带海洋生物资源与生态重点实验室 广东省应用海洋生物学重点实验室,中国科学院 南海海洋研究所, 中国科学院热带海洋生物资源与生态重点实验室 广东省应用海洋生物学重点实验室,中国科学院 南海海洋研究所, 中国科学院热带海洋生物资源与生态重点实验室 广东省应用海洋生物学重点实验室,中国科学院 南海海洋研究所, 中国科学院热带海洋生物资源与生态重点实验室 广东省应用海洋生物学重点实验室;中国科学院大学,中国科学院 南海海洋研究所, 中国科学院热带海洋生物资源与生态重点实验室 广东省应用海洋生物学重点实验室,中国科学院 南海海洋研究所, 中国科学院热带海洋生物资源与生态重点实验室 广东省应用海洋生物学重点实验室
基金项目:广东省中国科学院全面战略合作专项(2013B091300020);广东省省级科技计划项目(2014B030301064, 2015B020231007); 国家高技术研究发展计划(“863”计划)(2012AA10A404-4)
摘    要:为了探索水孔蛋白(Aquaporin,AQP)在凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)渗透压调节过程中作用,本研究通过RACE方法获得克隆的凡纳滨对虾AQP(命名为LvAQP4)的c DNA全长序列,并分析了盐度胁迫对其肝胰腺m RNA表达的影响。结果发现:LvAQP4 c DNA序列全长为1 048 bp,其中包括75 bp的5¢UTR,187 bp的3¢UTR和786 bp的ORF。根据ORF序列推导出LvAQP4编码261个氨基酸,预测其分子质量为27.85 k Da,等电点为8.11。推导的氨基酸序列与其他甲壳物种的AQP相似度为48.8%到97.3%。进化分析显示LvAQP4属于AQP1-like亚族、AQP4类。定量PCR(q PCR)检测到LvAQP4在不同组织中均有表达,其中鳃的表达量最高,肝胰腺、肌肉、脑和眼柄中也较高,而血淋巴、肠、胃和胸神经节中表达量则较低。在高盐(盐度40)刺激下,凡纳滨对虾的肝胰腺LvAQP4 m RNA表达量会随着时间推移而上升,到6 h达到最高,而后逐步下降。而在低盐(盐度4)刺激下,凡纳滨对虾的肝胰腺LvAQP4 m RNA表达量并无明显变化。在原代分离和培养的肝胰腺细胞中,培养液中加入额外的Na Cl会剂量依赖地提高LvAQP4 m RNA表达水平。同样,通过在培养液中额外加入蔗糖提高培养液渗透压,也会剂量依赖地提高LvAQP4 m RNA表达水平,但作用不如Na Cl明显。这些结果表明盐度与肝胰腺LvAQP4的表达量有关,LvAQP4对凡纳滨对虾的渗透压调节具有非常重要的作用。

关 键 词:凡纳滨对虾(Litopenaeus  vannamei)    LvAQP4    盐度胁迫    渗透压调节
收稿时间:2016/2/1 0:00:00
修稿时间:2016/5/24 0:00:00

Molecular cloning of aquaporin-4 (AQP4) gene in the Pacific white shrimp (Litopenaeus vannamei) and the effect of salinity stress on its expression in hepatopancreas
GAO Yan,HU Chao-qun,REN Chun-hu,QIAN Jing,HE Xiang-yan,JIANG Xiao and HUANG Wen.Molecular cloning of aquaporin-4 (AQP4) gene in the Pacific white shrimp (Litopenaeus vannamei) and the effect of salinity stress on its expression in hepatopancreas[J].Marine Sciences,2017,41(2):61-70.
Authors:GAO Yan  HU Chao-qun  REN Chun-hu  QIAN Jing  HE Xiang-yan  JIANG Xiao and HUANG Wen
Abstract:
Keywords:Litopenaeus vannamei  LvAQP4  salinity stress  osmoregulation
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