梅氏新贝尼登虫(Neobenedenia melleni)卵黄铁蛋白的cDNA克隆、原核表达及抗血清制备

从cDNA文库中获得了梅氏新贝尼登虫卵黄铁蛋白(NmYF)的编码序列。序列全长739个核苷酸,3′-末端具有polyA尾,单一大开放阅读框编码一个由226个氨基酸组成的分子量为26.1kDa的蛋白。序列比较表明,NmYF与卫氏并殖吸虫卵黄铁蛋白最相似,氨基酸序列同源性为23.7%。系统进化树分析表明,NmYF、卫氏并殖吸虫卵黄铁蛋白和头槽绦虫卵黄铁蛋白形成了一个小的进化簇,而体铁蛋白序列形成了一个大的进化簇,揭示了卵黄铁蛋白和体铁蛋白间的差异以及进化上的相关性。这是梅氏新贝尼登虫卵黄铁蛋白基因序列的首次报道。随后,构建了插入有全长NmYF基因开放阅读框序列的原核表达质粒pET-22b-NmYF,转化大肠杆菌BL21pLysE菌株,经IPTG诱导表达后,SDS-PAGE检测表明预期大小的目的蛋白大量表达。随后制备了目的蛋白的多克隆抗血清,它能与目的蛋白起强的特异性反应,但与细菌自身蛋白不起反应,可用于后续研究。     

中华鳖卵黄抗体的检测

用新鲜的中华鳖卵提取卵黄粗提物 ,再与兔抗鳖 Ig M抗血清反应 ,琼脂免疫扩散法发现鳖卵黄粗提物可与兔抗鳖 Ig M的抗血清发生免疫沉淀反应 ,且效价可达 1∶ 4 ,表明鳖卵黄中存在着抗体 ,进而用 ELISA法测定到鳖卵黄中抗体的含量只有 2 4 0 .5μg/m L,明显低于血清中抗体的含量。因而认为中华鳖母源抗体可通过卵黄传递给稚鳖 ,使稚鳖在孵化后可获得较弱的被动免疫力以抵抗病原体的感染。     

长毛对虾卵子发生的研究Ⅱ.卵黄发生

自1985—1988年,每年4,5月间取厦门海区捕捞的长毛对虾雌虾卵巢为材料,应用光镜和电镜技术并结合细胞化学方法,研究长毛对虾的卵黄发生。结果表明,卵黄粒在卵黄发生的卵母细胞核外围的卵质中最早出现;卵黄粒的形成有多种途径,最先参与卵黄粒形成的细胞器是线粒体;随后高尔基液泡、内质网膜囊、溶酶体及核糖体等细胞组分参与了卵黄粒的形成。还讨论了滤泡细胞与卵黄蛋白来源之间的关系。     

海水中Ca2+,Mg2+, K+含量对黑鲷胚胎及早期仔鱼发育的影响

１９９２￣１９９３年，用不同Ｃａ＾２＋，Ｍｇ＾２＋和Ｋ＋含量的人工配制海水，孵化黑鲷（Ｓｐａｒｕｓ ｍａｃｒｏｅｐｈａｌｕｓ Ｂａｓｉｌｅｗｓｋｙ）受精卵，培育前期仔鱼。实验揭示了：在没有Ｃａ＾２＋的海水中不能孵出仔鱼，在没有Ｍｇ＾２＋的海水中能孵出少量畸形仔鱼；低Ｋ＾＋对黑鲷受精卵孵化无明显影响，但对早期仔鱼的影响明显。针对咸淡水域海水鱼类育苗的特点，提出了调配海水中适宜的Ｍｇ＾２＋／Ｃａ＾２＋