高纯河豚毒素对蛙坐骨神经动作电位的影响

用电生理学方法观察了4种不同浓度的高纯河豚毒素(tetrodotoxin,TTX)对蛙离体坐骨神经动作电位的影响.实验结果表明:1μmol/dm3TTX在给药后7 min能显著抑制动作电位的上相幅度(P<0.05),但在给药后10 min才显著抑制动作电位的下相幅度(P<0.01);20μmol/dm3TTX在给药后3 min内能完全抑制动作电位的形成.1μmol/dm3TTX在给药后1~5min对动作电位传导速度的影响没有统计学意义,5μmol/dm3TTX在5min时可显著抑制传导速度(P<0.05),而10μmol/dm3TTX在2min时便显著抑制传导速度(P<0.05).实验结果提示高纯河豚毒素对蛙离体坐骨神经动作电位的影响存在剂量效应关系.     

中国沿海部分地区半褶织纹螺的毒性及毒素组成分析

为确定中国沿海不同地区织纹螺中的毒素成分,本研究在江苏省、浙江省和福建省设立了多个采样点,对采集的半褶织纹螺样品进行了毒性测试和毒素组成分析。研究结果显示,采集的织纹螺样品毒性范围为2—664MU(mouse unit)/g湿重,其中,采自江苏省连云港地区的织纹螺样品毒性远高于其它地区。应用高效液相色谱-质谱联用(high-performance liquid chromatography-mass spectrometry,LC-MS)方法对样品中的毒素成分进行分析,在各地的织纹螺样品中均检测到了河豚毒素(TTX)及trideoxy TTX、4-epi TTX和anhydro TTX等衍生物,但各种毒素成分所占的比例存在差异。自江苏省连云港市和浙江省舟山市采集的织纹螺样品中,Trideoxy TTX是主要的毒素成分,TTX和其它两种毒素成分次之;而自江苏省盐城市、浙江省宁波市及福建省宁德市和莆田市采集的织纹螺样品中,TTX的含量最高。采集自江苏省连云港和浙江省舟山市的大部分织纹螺样品中,肌肉组织的毒素含量最高,其次是消化腺组织,其余组织中的毒素含量最低。高毒性成分TTX的最高值主要出现在肌肉组织或消化腺组织中。从实验结果可以看出,各地的有毒织纹螺中毒素成分基本一致,而各种毒素成分所占的比例有一定的差异,织纹螺的毒性与高毒性成分TTX的含量有关。     

河豚毒素的微生物起源

河豚毒素（TTX）是一种毒性很强的海洋生物活性物质，为典型的神经Na^＋通道阻断剂。最初从纯科（Tetrodontidae）鱼中发现，故被Tahara命名为Tetrodotoxin（TTX）。TTX的分子结构为氨基全氢喹唑啉化合物，分子式C11H17N3O8，相对分子质量为319，该分子中含有原酸酯结构，几乎所有的碳原子均具不对称取代。它微溶于水和浓酸，极易溶于含醋酸的水溶液，不溶于有机溶剂，纯品为无嗅无色针状固体结晶，易被碱还原。TTX非常稳定，在日光下曝晒20d或在盐水中盐腌30d，其毒性仍不能被全部破坏，只有在高温加热30min以上或在碱性条件下才能被分解。其具有胍基是TTX的活性部位，通过它TTX可特异地结合于神经细胞膜钠通道上，进而抑制Na^＋内流，阻断神经兴奋的传导。     

产河豚毒素菌株的筛选、鉴定及透析培养

河豚毒素(Tetrodotoxin, TTX)在镇静、镇痛、麻醉、戒毒等神经性疾病治疗方面效果显著且无致瘾性,因此具有极好的应用前景,但由于其从河豚体内提取的成本过高,所以难以大量推广应用。越来越多的证据表明TTX来源于河豚体内共生的微生物。我们从野生横纹东方鲀(Takifugu oblongus)肝脏中分离得到了一株产TTX较高的芽孢杆菌3G2(Bacillus sp. 3G2),通过ELISA和胶体金的方法检测到其发酵液TTX含量为35 ng/mL。将该菌株接种于专用透析培养器中,不断流加新鲜培养基实现连续培养,同时实现简化分离工艺,对发酵液进行小鼠生物活性检测、TTX试纸条检测,并通过河豚毒素抗体免疫共沉淀纯化得到TTX粗品后进行高效液相色谱鉴定均表明发酵液中含有TTX且含量较高。本研究通过筛选产TTX的优质菌株进一步了证实河豚毒素外源性假说,并初步验证了透析法生产河豚毒素的优越性,为后续商业应用提供实践性基础。     

海洋微生物毒素研究进展

浩瀚的海洋世界具有高盐、高压、低温、寡营养等诸多特点。海洋中生存着丰富多样的海洋微生物,它们产生了多种多样的生物活性物质,如生物信息物质、药用活性物质、海洋生物毒素和生物功能材料等。其中海洋生物毒素是当前研究中的一个热点,它具有化学结构多样、分子量小、生物活性高及作用机理独特等诸多特点。几乎所有的海洋生物种类都有产毒的个体,近年来的研究表明,作为一个庞大的类群,海洋微生物产毒种类繁多,如细菌、真菌、放线菌以及微藻等。与此同时人们还发现海洋微生物与其它的一些生物毒素之间存在着复杂的关系,研究较多的河豚毒素源于微生物的的观点已逐渐为人们所接受。和其它的毒素一样,微生物毒素既有对人类有害的一面,也有造福人类的一面,而微生物毒素在进一步研究利用中的优势地位也使人们对其投注了更多的目光。作者拟就海洋微生物毒素的产毒种类、毒素特点、检测方法以及资源化利用等方面作一简要综述。     

河豚毒素研究进展

近年来 ,海洋生物活性物质 (包括生物功能材料、生物毒素和海洋药物等 )的研究和开发利用已成为海洋生物资源高值化的热门研究课题。迄今发现的３０００多种包括萜类、肽类、聚醚类、生物碱、皂苷类等在内的海洋生物活性物质因其具有抗菌、抗病毒、抗肿瘤、抗炎症、强心等一种或多种生物活性 ,已经在功能食品、食品添加剂、药物、化工等领域发挥了重要的作用。海洋生物活性物质今后的研究方向和重点一方面应该继续探索未知的活性物质、另一方面应该对已知活性物质进行功能性拓展研究和开发。本文对河豚毒素 (Ｔｅｔｒｏｄｏｔｏｘｉｎ,ＴＴ…     

北极海洋细菌BSw20353的胞外蛋白酶性质

从北极楚科奇海水中分离到一株产蛋白酶耐冷河豚毒素假交替单胞菌BSw20353。该菌可合成多种胞外蛋白酶,而培养温度影响蛋白酶的合成。分离纯化出其中一种在15℃、25℃培养时均有生成的酶:该酶最适作用温度55℃;最适pH8;金属离子Hg2+、Sr2+抑制酶活,Fe2+、Mn2+则具有激活作用;该酶属于金属蛋白酶,受螯合剂邻二氮杂菲、EDTA及EGTA抑制,基本不受丝氨酸蛋白酶抑制剂PMSF、TPCK及TLCK抑制,半胱氨酸蛋白酶抑制剂E-64对该酶无抑制作用,天冬氨酸蛋白酶抑制剂pepstatin则具有一定抑制作用;SDS、二硫苏糖醇、碘乙酸可抑制酶活;而在变性剂尿素、盐酸胍作用下,酶活反而有所增高。     

河豚毒素的理论及应用研究进展

河豚毒素是河豚在长期进化过程中自然选择的结果.为了解释河豚能够适应并富集河豚毒素的原因,着重从分子遗传学的角度,介绍了河豚为了适应河豚毒素而发生的基因突变以及河豚毒素在河豚体内的富集方式并从促进河豚的安全食用及河豚毒素在医学上的广泛应用出发,结合国内外研究现状介绍了河豚毒素的分离检测手段以及河豚毒素作为一种工具药在临床上的应用研究.随着研究的深入,食用野生河豚的安全性将会得到进一步增强,河豚毒素在医学领域里将会有广阔的应用前景.     

超声波辅助提取河豚毒素的研究

以月腹刺鲀(Gastrophysus lunaris)卵巢为原料,利用超声波辅助提取河豚毒素(Tetrodotoxin,TTX)。通过单因素实验及二次回归旋转组合设计实验研究液料比、超声温度、超声时间等因素对提取率的影响,确定超声波辅助提取河豚毒素的最佳工艺条件。结果表明:在实验范围内影响河豚毒素得率的各因素大小依次为液料体积质量比、超声温度、超声时间;超声波辅助提取河豚毒素的最佳工艺条件为液料体积(mL)质量(g)比3.03∶1,超声温度39℃,超声时间22 min,该工艺条件下提取河豚毒素得率为63.57μg/g。     

河豚毒素的分布及动物对它的拮抗作用

综述了河豚毒素在各种脊椎动物、无脊椎动物(体内或体表)和微生物中的分布,分析了不同动物对河豚毒素的拮抗作用的方式和机理,并提出了进一步研究的一些建议。