用6—甲氨基嘌呤诱导贻贝四倍体胚胎

在滤过海水中以４×１０＾－４ｍｏｌ·Ｌ＾－１６－甲氨基Ｃ嘌呤（６－ＤＭＡＰ）处理贻贝Ｍｙｔｉｌｕｓ ｅｄｕｌｉｓ受精卵或胚胎，受精激活后５０或１２０ｍｉｎ处理２０－３０ｍｉｎ，分别抑制第一或第二次有丝分裂，以诱导四倍体胚胎。顶荧光显微观察表明，６－ＤＭＡＰ有效地抑制了第一和第二次卵裂。它使细胞核染色质分散，抑制了原核的移动和染色体的分离，并防碍卵裂沟和极叶的形成，从而诱导出四倍体胚胎。对第一次卵裂     

不同卵密度对太平洋牡蛎三倍体诱导效果影响的研究

本实验主要研究用70mg／L浓度的6－MDAP（二甲基氨基嘌呤）对太平洋牡蛎的受精卵进行三倍体诱导，研究受精卵的密度对诱导效果的影响，以及诱导后受精卵的孵化率和畸形率。实验结果表明：当受精卵的密度为4万个／ml时三倍体率最高，相应的孵化率最高，综合来看，4万/ml的卵密度是生产上较好的受精卵处理密度。     

Effects of base analogues 5-bromouracil and 6-aminopurine on development of zebrafish Danio Rerio

Zebrafish （Danio rerio） genetic screens allow isolation of a wide array of problems in vertebrate biology. The effects of base analogues 5-bromouracil and 6-aminopurine on the development of zebrafish embryos are reported for the first time in this study. The early development of the zebrafish embryos was little affected by 5-bromouracil and 6-aminopurine, while the late development （organogenesis） was significantly impaired. Embryos exposed to 5-bromouracil mainly showed curled tail, wavy body, golden pigmentation and the mouth with protruding lower jaw. 6-aminopurine-treated embryos had defective anterior structures, curled tails and wavy body. RAPD analysis showed that the majority of 5-bromouracil-and 6-aminopurine-treated larvae and fish shared banding patterns in common with the control, suggesting that most mutagenesis induced by these agents are point mutations. However, some fish derived from 5-bromouracil-treated embryos had golden（gol） pigmentation; and RAPD analysis revealed that their band patterns differed from those of the control.Possibly, 5-bromouracil can occasionally cause relatively extensive changes in the fish genome. The results of this study may provide valuable help for detailed studies of mutagenesis.     

6-DMAP和低渗诱导长牡蛎“海大2号”三倍体的研究

为探索低渗和6-二甲基氨基嘌呤(6-DMAP)诱导长牡蛎(Crassostrea gigas)三倍体最佳条件以及6-DMAP和低渗配合使用诱导三倍体的可行性,本研究通过低渗、6-DMAP以及6-DMAP与低渗配合三种方法诱导长牡蛎“海大2号”三倍体。研究显示,低渗处理组中,当第一极体(PB1)出现40%时,在盐度为8的低渗海水中持续处理15 min,综合评价指数最高,为34.33%,此时2日龄长牡蛎的三倍体率和存活率分别为73.77%±1.89%和45.78%±6.23%,8日龄长牡蛎的三倍体率和存活率分别为50.65%±4.89%和21.17%±5.54%。6-DMAP处理组中,当PB1出现40%时,75 mg/L的6-DMAP持续处理15 min,综合评价指数最高(36.52%),此时2日龄长牡蛎的三倍体率和存活率分别为74.81%±0.68%和46.30%±1.54%,8日龄长牡蛎的三倍体率和存活率分别为60.37%±0.61%和30.25%±2.85%。6-DMAP和低渗配合组中,当PB1出现40%时,在盐度为8的低渗海水中,以50 mg/L的6-DMAP持续处理15 min,...     

三种化学诱导剂诱导太平洋牡蛎三倍体的比较研究

从三倍体率、D幼孵化率、幼虫生长速度、生产成本等方面比较了细胞松驰素 B、二甲基氨基嘌呤、咖啡因三种化学诱导剂诱导太平洋牡蛎产生三倍体的效果。 CB的三倍诱导率最高 ,为91.5% ,但 D幼孵化率最低 ,仅为 5.8% ,且成本最高 ,为 6 - DMAP和咖啡因的 4倍和 50倍。 6 -DMAP的三倍体诱导率略低于 CB,为 88.0 % ,但 D幼孵化率最高 ,为 6 0 .5% ,其成本仅为 CB的1/ 4。咖啡因的三倍体诱导率最低 ,为 82 .4 % ,幼虫孵化率为 30 .2 % ,但其成本最低 ,仅为 CB的 2 %和 6 - DMAP的 8%。三种诱导剂诱导的三倍体群幼虫在生长速度及成活率方面无显著差别。     

6-DMAP诱导太平洋牡蛎三倍体——4.四倍体现象的研究

１９９６～１９９７年,在进行６－二甲基氨基嘌呤（６－ＤＭＡＰ）诱导太平洋牡蛎产生三倍体的实验过程中,发现一定数量的四倍体。解剖法获取精卵,人工授精。染色体倍性鉴别采用染色体计数法。（１）三因素四水平Ｌ１６（４５）正交设计。试验平行重复２次。最高四倍体诱导率为４０．０±０．０％。太平洋牡蛎四倍体各诱导因素的最优水平组合：当精卵混合２０ｍｉｎ时,将受精卵浸泡在含６－ＤＭＡＰ４５０μｍｏｌＬ－１的海水中１０ｍｉｎ;决定四倍体产生的三因素的主次顺序：６－ＤＭＡＰ浓度→诱导时机→诱导持续时间。（２）三因素三水平Ｌ９（３４）正交设计。试验平行重复３次。最高四倍体诱导率为９．６±４．９％。诱导太平洋牡蛎四倍体各因素的最优水平组合：当５０％受精卵出现第一极体时,将受精卵浸泡在含６－ＤＭＡＰ４５０μｍｏｌＬ－１的海水中１５ｍｉｎ;决定四倍体产生的三因素的主次顺序：诱导时机→６－ＤＭＡＰ浓度→诱导持续时间。     

栉孔扇贝第1卵裂抑制型雌核发育二倍体的研究

利用6-二甲基氨基嘌呤(60μg/cm3;6-DMAP)和细胞松弛素B(0.5μg/cm3;CB)抑制受精卵的第1次卵裂,授精后60和65 min分别用CB和6-DMAP持续处理20和15 min,可诱导出12.5%和27.5%的第1卵裂抑制型雌核发育二倍体.细胞学观察显示,6-DMAP抑制第1次卵裂产生的雌核发育二倍体主要在第1次有丝分裂后期的受精卵,由于破坏了纺锤体和阻止了染色体分离,导致一个二倍性雌核的形成,而CB有效地阻止了第1次卵裂的胞质分裂.尽管倍化率和D型幼虫发生率较低,但该研究首次报道了栉孔扇贝第1卵裂抑制型雌核发育二倍体诱导的可行性.     

中国对虾及中华绒螯蟹多倍体诱导中6-DMAP在卵子中残留量的检测

海洋动物多倍体的诱导目前已成为海水养殖中品种改良的重要手段(楼允东，1984)。在美国，太平洋牡蛎和虹鳟的多倍体诱导已大规模应用于生产，并获得良好的经济和社会效益。我国也先后开展了鱼类(桂建芳等，1991；尤锋，1993)、中国对虾(戴继勋等，1993；相建海等，1992)、贝类(喻子牛等，1995)及中华绒螯蟹(陈立侨等，1997)等多种海洋动物多倍体诱导的研究，并取得了一些进展。6-二甲基氨基嘌呤(6-DMAP)由于其低毒、经济和高效，目前已成为海洋动物多倍体诱导中经常使用的诱导剂，但至今，国内外尚无关于6-DMAP在卵子内的残留的报道。在环境保护和生物安全倍受关注的今天，人们非常关心多倍体诱导食物的安全性问题，本文首次利用高压液相色谱技术检测了在中国对虾和中华绒螯蟹多倍体诱导处理后，卵子和幼体内6-DMAP的残留量，并对检测结果进行了分析讨论。     

用6－甲氨基嘌呤诱导贻贝四倍体胚胎

在滤过海水中以４×１０（－４）ｍｏｌ·Ｌ（－１）６－甲氨基Ｃ嘌呤（６－ＤＭＡＰ）处理贻贝Ｍｙｔｉｌｕｓｅｄｕｌｉｓ受精卵或胚胎，受精激活后５０或１２０ｍｉｎ处理２０—３０ｍｉｎ，分别抑制第一或第二次有丝分裂，以诱导四倍体胚胎。顶荧光显微观察表明，６－ＤＭＡＰ有效地抑制了第一和第二次卵裂。它使细胞核染色质分散，抑制了原核的移动和染色体的分离，并防碍卵裂沟和极叶的形成，从而诱导出四倍体胚胎。对第一次卵裂的抑制产生８２．８％的四倍体胚胎；第二次卵裂抑制产生５８．６％的四倍体胚胎。由于６－ＤＭＡＰ如此有效，而且价格便宜以及对人体无害，与沿用的化学诱导剂细胞松弛素Ｃ．Ｂ．相比，它应该可以成为双壳类软体动物染色体操作研究的理想化学诱导剂之一。