对虾一种无包涵体杆状病毒病原的PCR检测

为建立对虾无包涵体杆状病毒的快速诊断技术,应用PCR技术分别对暴发性流行病发生前、流行中和发病后的对虾样品进行了检测.根据已克隆的对虾杆状病毒部分基因组序列而设计的引物能特异性地扩增出靶DNA片段,最低可以检测1pg的病素DNA.由典型发病症状对虾的胃、腮、肝胰腺、中肠、游泳足、肌内和心脏等器官和组织中成功地检测到病毒.不同组织和器官经扩增得到的信号强弱不同:病虾的胃扩增得到的信号最强,中肠、肌肉、心脏和游泳足次之,腮和肝胰腺信号最弱,说明病毒在不同组织和器官中数量及感染程度不同.在对虾发病前及发病后,用二次PCR还能检测表面不发病呈隐性感染状态的对虾携带的病毒;而对野生健康虾的检测结果为阴性.研究表明,PCR是检测对虾暴发性流行病快速、灵敏而准确的方法,对病毒病的早期诊断、防治和高健康对虾品种的选育具有指导意义.     

对虾暴发性流行病及其预防研究

１９９３～１９９４年我国沿海养殖对虾发生了特大的暴发性流行病，损失惨重。本文报道该病的特点、症状及危害，并在患病的中国对虾、日本对虾、长毛对虾的中肠、肝胰腺的上皮细胞核和细胞质及腹肌纤维间质中发现大量具有囊膜的杆状病毒。通过病毒引起宿主靶组织细胞的病理变化、无包涵体等特性分析，认为该病毒属于有囊膜杆状病毒科Ｃ亚群，不同于已知的对虾所有杆状病毒，为对虾的一类新致病病毒。文中还分析了主要致病原因，通过调查和试验提出８条有针对性的预防措施。     

养殖对虾暴发性流行病—中国对虾肝胰腺坏死病研究

1993年我国沿海各省市养殖对虾发生了暴发性流行病,造成了极大的损失。本文报导我们在浙江省舟山市调查和研究的结果,发现肝胰腺坏死杆状病毒和弧菌并发感染是引起对虾死亡的主要原因。     

中国对虾（Penaeuschinensis）核包涵体型杆状病毒装配的电镜观察

９４－９５斫养殖对虾病毒爆发流行期间，对患病中国对虾肝胰上皮细胞和胃肌细胞进行了电镜检测，发现一种核包涵体型杆状病毒（１４０－１６０ｎｍ×２８０－３３０ｎｍ），对其装配机质的超微结构研究表明，核包涵 体型杆状病毒以核内装配为主，部分病毒基质转入胞质进行了装配。     

几种理化因子对斑节对虾白斑杆状病毒(WSBV)感染力的影响

将部分纯化的ＷＳＢＶ暴露于不同理化条件下,通过人工感染的方法测定ＷＳＢＶ的感染力。结果表明,病毒在纯水中１ｈ能保持感染活性,全在３ｍｏｌ／Ｌ ＮａＣｌ的高盐溶液中１ｈ失去感染力;ＷＳＢＶ在３０℃中４ｈ感染活性丧失,在７０～９０℃中１０ｍｉｎ均失去感染力;当环境ｐＨ值为５以下或１２．６以上时,ＷＳＢＶ在１ｈ后丧失感染活性;ＮＰ０－４０,Ｔｒｉｔｏｎ－Ｘ－１００,ＣｌＯ２或甲醛等均能灭活ＷＳＢＶ。     

利用WSBV的引物扩增中国对虾的杆状病毒DNA

利用台湾报道的ＷＳＢＶ的ＰＣＲ引物,成功地扩增出了１４００ｂｐ左右的中国对虾的杆状病毒的ＤＮＡ片段,与预计的产物长度吻合。该引物对经初步离心处理的病虾组织也能扩增出特异性ＤＮＡ条带,而对正常虾组织ＤＮＡ、昆虫杆状病毒（ＡｃＭＮＰＶ）ＤＮＡ进行扩增,均获得阴性结果。说明该引物的特异性较高,对中国对虾的杆状病毒的检测具有一定的实际应用价值。实验结果同时说明ＷＳＢＶ与中国对虾的杆状病毒有同源序列存在,具有一定的保守性;用该引物进行的ＰＣＲ扩增为中国对虾的杆状病毒与其他相关病毒的比较研究提供了一种技术手段。     

Detection of prawn white spot baculovirus by polymerase chain reaction

INTRODUCTIONAprawnbaculovirushasbeenresponsibleformostoftheseriousshrimpdiseaseinChinasince1992.Studiesonthepathology,Pathogenesisandmorphologyofthevirusshowedthatitwasanon-occlUSiontheybaculoviruswhichcouldinfectPenaeusjaponicus,P.nzonham,P.chinests...     

对虾白斑杆状病毒(WSBV)对斑节对虾的实验感染与病理学研究

用取自发病虾塘患典型白斑病的病虾为毒源 ,对健康斑节对虾Penaeusmonodon进行人工感染 ,按Koch氏法证实了对虾白斑杆状病毒 (WSBV)是白斑病的病原。对人工感染WSBV后患典型白斑病的斑节对虾的胃、肠及皮下结缔组织进行石蜡切片和超薄切片 ,研究WSBV引起的组织病理变化和宿主细胞感染WSBV后的超微病变过程。结果表明 :感染WSBV后病虾的不同组织均存在广泛的变性、坏死 ,上皮细胞大量解体、脱落 ;部分细胞核肿大、游离 ;结缔组织糜烂 ,呈现空泡化 ;未发现包涵体。透射电镜照片显示 :感染WSBV后的病虾在感染前期 ,靶细胞核膨胀 ,核仁消失 ,核外膜破损 ,染色质靠边分布 ,内质网断裂 ,核糖体脱落 ,线粒体肿胀 ,高尔基体萎缩 ,溶酶体空泡化 ;感染中期 ,病毒粒子在细胞核内大量复制 ,直至充满整个核 ,细胞核内无结构化 ,核膜及质膜皱缩 ;感染后期 ,核胀破 ,病毒粒子从核内释放 ,细胞核呈空囊状 ,胞质内髓样结构明显 ,细胞器解体 ,细胞功能丧失。     

Study on purification and ultrastructure of a baculovirus in Penaeus chinensis

ThisworkwassupportedbytheNationalClimbingProjectB(GrantNo.PDB6-6-1).INTRODUCTIONMorethantenkindsofviruseswhicharepathogenictopenaeidshrimphavebeenrePortedsinceviralpathogenwasfirstobservedincellsofPenaeusduorarumin1974(Couch,l974).TheviraldiseaseshavedonegreatharmtoChineseshrimpculturesincel993whenanepidemicdiseaseofprawnsbrokeoutfromsouthtonorthalongthecoast.Theshrimpproductiondroppedsharplyfrom22OOOotonsin1992to87OOOtonsinl994and53OOOinl993(Wangetal.,1997).Itisurgentthatfastdia…     

从中国对虾分离纯化的一种杆状病毒及其超微结构的研究

从患病和濒死的中国对虾(Penaeus chinensis)头胸部分离提纯出一种杆状病毒,同时经对病虾的鳃、胃和中肠组织进行超薄切片及电镜观察,亦在上述组织的细胞核内发现大小相同、形态一致的大量杆状病毒粒子.成簇的病毒粒子主要在核内装配,并导致细胞结构的病变.病毒粒子大小约为320～400nm×100～130nm,两端钝圆,中部膨大,有囊膜,分内外两后,核衣壳大小为250～300nm×70～100nm.细胞内未观察到有核型多角体或颗粒体类包涵体存在.根据病毒学分类原则,该病毒应属于杆状病毒属无包涵体杆状病毒亚群,即杆状病毒C亚群.