合浦珠母贝26S蛋白酶体S4,S7亚基基因片段的分离与分析

26S蛋白酶体是真核生物中一种具有ATP依赖性的蛋白酶复合体,主要通过泛肽途径选择性降解细胞内与代谢调控、细胞周期有关的功能蛋白及异常蛋白,参与多种细胞活动的调控过程。26S蛋白酶体由具有催化活性的20S亚复合体和一个具有调节作用的19S亚复合体组成,其中19S亚复合体中的ATP酶亚基是调节26S蛋白酶体活性的重要组件。本通过简并引物PCR手段,从软体动物合浦珠母贝(Pinctada fucata)中扩增到参与构成19S亚复合体的S4和S7(MSS1)两个亚基的基因片段。这两个基因片段所编码的ATP酶组件包含有Gx4GKT,DEID,SAT和H／QRxGRxxR等26S蛋白酶体ATP酶亚基的共同功能基序。这是首次在软体动物中报道26S蛋白酶体的ATP酶亚基基因序列,为研究软体动物中26S蛋白酶体的结构与功能奠定了分子基础。     

三倍体合浦珠母贝不育性研究

对三倍体合浦珠母贝Ｐｉｎｃｔａｄａｍａｒｔｅｎｓｉｉ（Ｄ．）春、秋两繁殖盛期的生殖腺进行了组织学观察，并对其配子形成及受精、发育进行了研究。结果表明：合浦珠母贝三倍体的生殖腺发育差，生殖细胞数量少，极少个体能见到成熟卵母细胞和精子；三倍体的配子能完成受精作用，能发育至直线铰合期。配子多为非整倍体，其染色体数目多为１４—２８，胚胎染色体数目主要为２８—４２，故胚胎不能正常发育。因此，三倍体合浦珠母贝是不育的．     

合浦珠母贝敌害生物嵌线螺的生物防治初探

从海南岛三亚海区11种常见的肉食性腹足类中，筛选出2种能捕食嵌线螺Cymatium但不危害合浦珠母贝Pinctada martensii的物种；织锦芋螺Conus textile和方斑东风螺Bab-ylonia areolata。将这2种腹足类作为嵌线螺的生物防治物种，对防止嵌线螺危害合浦珠母贝具有良好作用，但在珍珠贝养殖生产中将织锦芋螺作为嵌线螺的生物防治物种时，需要解决防逃问题，若将方斑东风螺作为嵌线螺生物防治物种，则需解决其生存的饵料问题。     

合浦珠母贝卵子电击脉冲参数的初步研究

运用电脉冲转基因仪对合浦珠母贝卵子进行电脉冲处理以优化电穿孔法转基因的电击参数。实验中调制百分比：100％；脉冲间隔：1．0s：电极距离：2mm；脉冲个数：5个，参数保持不变。用不同的电脉冲参数组合（脉冲电压100-400V、脉冲持续时间0．5～3．0ms、脉冲频率10～50kHz，共28个组合）对卵子电击，然后加入精子进行授精，统计各组受精率和孵化率，以受精率和孵化率达到50％以上为衡量指标。结果表明，合浦珠母贝卵子对低脉冲频率和高电压非常敏感，当频率低于20kHz或脉冲电压高于400V时对卵子损伤较大。脉冲持续时间对其影响不大，适应范围较宽。优化的转基因电击脉冲参教组合为：脉冲电压1.0kV／cm，脉冲持续时间20ms，脉冲频率50kHz，或者脉冲电压1．5kV／cm，脉冲持续时间1．5ms，脉冲频率50kHz。     

射肋珠母贝培育珍珠的初步试验

射肋珠母贝Pinctada radiata(Leach)属热带海洋贝类,喜欢在珊瑚礁上群居,在水深2～5m的海区中分布很多。我国海南省陵水县黎安港资源较丰富。该贝个体小,壳形斜,壳表有放射肋而得名(图略),一般壳高为5.5cm,壳内面珍珠层呈金黄或紫色,光泽鲜艳。我们于1989年初,在海南省陵水县南海水产研究所热     

合浦珠母贝铁的穆斯堡尔谱学研究

应用^57Fe穆斯堡尔谱学的方法研究了四个不同生长期合浦珠母贝铁的化学状态和Fe^2 /Fe^3 的值，它们的Fe^2 和Fe^3 的相对含量分别为4.1%～29.4%和76.6%～95.9%,Fe^2 /Fe^3 值的变化为0.043～0.42。3个月龄的Fe^2 /Fe^3 值大于10个月龄，从10个月龄到22个月龄的Fe^2 /Fe^3 值呈增加的趋势，这可能反映了不同生长期合浦珠母贝对不同价态的铁的需求。     

合浦珠母贝二倍体、三倍体和非整倍体群体的基因杂合度与生长比较

采用淀粉凝胶电泳方法对合浦珠母贝Pinctadamartensi(D.)雌性三倍体与雄性二倍体交配,细胞松弛素B抑制其受精卵第一极体释放产生的二倍体、三倍体及非整倍体3个群体进行了同工酶研究。二倍体、三倍体及非整倍体群体在6个多态位点的平均基因杂合度分别为0.255±0.087,0.286±0.097,0.275±0.089,三倍体的杂合度高出二倍体约12%,表明多倍体诱导能增加诱导群体的杂合度。但在单个位点上,三倍体的杂合度不一定高于二倍体;在各自群体内,平均杂合位点数与生长间无明显的相关性,单个位点上的杂合子也未完全表现出其生长大于纯合子,且差异不明显(p>0.05)。因此,合浦珠母贝三倍体的快速生长难以完全用杂合度增高假说解释,只能说明诱导处理能使三倍体的杂合度增高,而能量再分配和"巨型性"可能对其快速生长起着不可忽视的作用。非整倍体群体的杂合度高于二倍体群体,但其生长却小于二倍体,其原因可能是染色体的增减对机体的生长有一定的影响。     

马氏珠母贝SNP标记开发及家系遗传多态性分析

利用13个源自转录组序列的SNP标记对3个马氏珠母贝(Pinctada fucata)家系进行遗传多态性分析及聚类分析。结果显示,家系1#、3#、6#的平均期望杂合度(He)分别为0.307 8、0.318 9和0.382 7;平均观测杂合度(Ho)分别为0.342 2、0.341 0和0.394 2;平均多态信息含量(PIC)分别为0.243 5、0.247 9和0.297 7。结果表明,3个马氏珠母贝家系具低度或中度遗传多态性,为马氏珠母贝内SNP应用于遗传多态性分析等提供了基础。利用SNP标记对3个家系进行聚类分析,发现半同胞家系1#和3#在家系及个体聚类中均先聚在一起,然后再与亲缘关系较远的家系6#聚在一起。新开发的SNP标记能较准确地对家系及个体进行聚类,为SNP标记应用于马氏珠母贝遗传关系分析提供了研究基础。     

马氏珠母贝养殖群体两种规格个体的类胡萝卜素含量比较

以马氏珠母贝育种对照群体为实验材料,从群体中选择生长差异个体分别构成大规格与小规格子群体,测定两个子群体鳃、肝胰腺、闭壳肌、外套膜边缘膜与外套膜中央膜类胡萝卜素含量。结果表明:大规格与小规格子群体的鳃、肝胰腺、闭壳肌、外套膜边缘膜与外套膜中央膜的类胡萝卜素含量差异不显著(P0.05),大规格子群体各组织的类胡萝卜素含量略大于小规格子群体。大与小规格子群体肝胰腺的类胡萝卜素含量显著高于其它4种组织(P0.05)。子群体对类胡萝卜含量影响不显著(P0.05),组织对类胡萝卜含量影响显著(P0.05)。肝脏是马氏珠母贝类胡萝卜素转化及沉积的主要器官之一。