弓背青鳉3种雌激素受体基因的克隆及其表达分析

【目的】克隆弓背青鳉(Oryzias curvinotus)雌激素受体基因(Estrogen receptor, er),分析在组织、胚胎发育时期中表达特征和雌二醇暴露后表达响应,为探究er介导雌激素调控机制提供理论依据。【方法】通过弓背青鳉肝脏转录组数据筛选进行er序列扩增,实时定量PCR(RT-q PCR)检测不同组织、不同胚胎发育时期和雌二醇暴露后的er表达量。【结果】3种ocuerα/erβ1/erβ2的编码区序列分别为1 860 bp、1 689 bp和2 007 bp,编码氨基酸个数相应为619、562和688。定量结果显示,3种er主要在肝脏和性腺高表达。胚胎发育过程中,ocuerα在卵裂期至囊胚期表达量低,在囊胚期后表达量逐渐上升持续到孵化;2种ocuerβ亚型均在胚胎发育初期有较高表达,随后ocuerβ1在原肠胚后开始降低,ocuerβ2在囊胚期后开始降低,在器官发育后期表达量均逐渐上升直至孵化。弓背青鳉仔鱼雌二醇暴露结果显示,各浓度雌二醇暴露均能使ocuerα和弓背青鳉卵黄蛋白基因(Vitellogenin,vtg)表达量上升,ocuerβ1仅在20μg/L上调,ocuerβ2表达量下调。【结论】ocuer不同亚型在介导雌激素调控中起着重要作用。     

有机磷农药类雌/抗雄激素效应研究进展

<正>有机磷农药是世界范围内使用最广、用量最大的高效广谱杀虫剂之一[1],产量占我国农药总产量的40%以上[2]。农药的使用量中只有不到1%能对靶生物起作用,大部分漂浮在空气或残留在土壤中,并通过降雨、沉降和径流进入河流湖泊造成水体污染。2010年我国珠江河口流域水体中有机磷农药检测浓度范围为18.76~344.94 ng/L,其中甲拌磷已接近人类可接受范围的临界点[3]。此外,邕江、桑沟湾海域、厦门近海     

罗氏沼虾雌激素相关受体(ERR)基因原核表达与纯化

根据已知罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)雌激素相关受体基因序列(Gen Bank登录号KU899089),设计含有酶切位点的特异性引物,PCR扩增得1 374 bp的开放阅读框序列,构建原核表达载体p ET-32a-ERR,并优化诱导浓度、诱导时间、诱导温度等表达条件。结果表明,ERR蛋白在温度35℃、IPTG浓度0.1 mmol/L条件下,诱导4 h时表达量较佳。     

褐牙鲆卵黄原蛋白免疫胶体金技术的开发及其在环境雌激素检测中的应用

为快速检测海洋环境雌激素,本研究利用20 nm胶体金颗粒和褐牙鲆(Paralichthys olivaceus) Vtg单/多克隆抗体开发了夹心法免疫胶体金检测试纸条,并对胶体金标记条件、T线和C线抗体浓度等参数进行了优化,构建了褐牙鲆Vtg的快速检测技术。实验结果表明该胶体金试纸条工作范围为15.7～1 000 ng·mL^-1(R²>0.98),检出限为7.8 ng·mL^-1。本研究制备的胶体金试纸条检出限与目前常用的多种Vtg的ELISA方法相近,但是检测时间仅为15 min,比常规方法节省了约14 h。此外,该试纸条在存放30和90 d后,对Vtg的检测结果并无明显偏差,表现出较好的稳定性和可重复性。最后,通过测定多种常见环境雌激素(双酚A、雌二醇、乙炔雌二醇)暴露对雄性成年褐牙鲆血浆中Vtg的诱导情况,进一步验证了该试纸条在海洋环境雌激素活性检测中的应用。     

探讨心宁汤主药对冠心病的影响

在冠心病的发生发展过程中,心血瘀阻是主要表现之一。心宁汤主药为丹参、三七。丹参、三七组成活血化瘀、通络止痛的代表药对。雌激素有保护血管内皮、抑制血管平滑肌增殖、降低血脂、抗凝血作用。植物雌激素有类雌激素或抗雌激素作用的活性。因此,本文探讨名方心宁汤中主药是否具有类雌激素作用,以此为临床用药提供理论依据。     

环境内分泌干扰物诱导鱼类产生卵黄原蛋白的研究进展

目前已经被确认的环境内分泌干扰物达100余种,其中能够诱导鱼类产生卵黄原蛋白(Vitellogenin, VTG)的环境内分泌干扰物包括农药、多氯联苯类化合物、邻苯二甲酸酯类化合物等几大类.由于环境内分泌干扰物结构的复杂性,其诱导机制成为近年研究的热点.本文综述了能够诱导鱼类产生VTG的环境内分泌干扰物的种类、筛选方法及作用机制.     

植物雌激素对鱼类影响的研究进展

植物雌激素是一类植物来源的具有雌激素活性的非甾族杂环多酚类化合物,也是一类潜在的环境内分泌干扰物,可以影响鱼类的生理、生殖等正常活动.本文介绍了植物雌激素的分布与来源,综述了各种植物雌激素对鱼类生长、行为和生殖的影响,并从植物雌激素与受体结合、抑制类固醇类激素的代谢、酶调节等几种可能的途径,讨论了植物雌激素对鱼类内分泌扰乱作用的机理.     

表面改性的C-18硅胶吸附剂萃取水中的雌激素

为了有效富集水体中的痕量雌激素(雌酮、雌二醇、雌三醇、雌炔醇),对常用的C-18硅胶颗粒表面进行了改性.将含疏水烷基的20碳烷或25碳烷加入到C-18硅胶吸附剂中,通过正交试验选择改性作用的最佳条件.用填有上述改性填料的SUPELCO小柱富集水中的雌激素,浓缩后的目标组分经TFA或MSTFA衍生化后进行GC-FID色谱分析,并采用GC-MS法测定了河水中的雌激素含量.结果表明,C20与C25的添加量为120 μL/50 μL时,C-18硅胶吸附剂富集水体中痕量雌激素的能力大为提高,回收率为80%～120%.     

硬骨鱼类雌激素受体及其在生殖调节中的作用研究

在脊椎动物中,雌激素的生理作用是通过雌激素受体(ER)介导的,这种转录因子属于类固醇激素核受体家族成员.从哺乳动物到硬骨鱼类,均存在2种ER类型,即ERα和ERβ.与高等脊椎动物不同的是,由于基因重复等原因,硬骨鱼类ERβ存在异型体结构,称为ERβ1和β2或者ERβ和γ,它们在鱼类胚胎发育和性腺发育过程中表现为不同的组织分布和表达类型.一般认为,雌激素主要调节雌性个体的生理功能.然而,鱼类的精巢也表现明显的雌激素受体活性,说明雌激素也参与调节硬骨鱼类精巢的生理功能.     

植物雌激素影响鱼类生殖发育的作用机理研究进展

植物雌激素(Phytoestrogen,PE)是一类植物来源的杂环多酚类化合物,在结构和功能上与17β-雌二醇(雌二醇)类似,能够结合雌激素受体,具有弱的雌激素活性.已发现的植物雌激素有40多种,主要分布于38科植物中,大致可归纳为10种结构类型,包括黄酮类、苯丙素类、蔗类、内脂或香豆素类、芳香醚类、生物碱类、三萜类...