黑鲷(Acanthopagrus schlegeli)肿瘤坏死因子α cDNA的克隆及特征分析

采用同源克隆的方法，从黑鲷中获得肿瘤坏死因子(TNFα)全长cDNA序列。该序列含1288个核苷酸，可编码253个氨基酸的TNF前体蛋白。它是一种跨膜蛋白，无糖基化位点和信号肽结构。黑鲷TNFα与其它鱼类的TNFα的相似性很高，占据进化上独立的分支；与哺乳类TNFα和TNFG源于共同的祖先。基因结构分析显示，该基因含有TNF家族pmfile和TNF家族的标签序列；在参与TNFα基因二硫键形成的两个半胱氨酸和TNFα三聚体形成的位点高度保守；空间结构模拟显示，它与哺乳类TNFα的空间结构相似，都是由两个β折叠片组成，每个折叠片包含5个反向平行的β链。表达研究结果表明，黑鲷TNFα在检测的各个组织中均为组成型表达，表现为在刺激与非刺激鱼体中，都可以检测到黑鲷TNFα的表达，但是其表达水平在不同组织中有很大差异。黑鲷TNFα在头肾、脾脏和鳃的表达量较高，而在心脏、肝脏、血液、肾脏和大脑中表达量较低。     

模拟热浪天气对冠心病影响及其机理实验研究

通过模拟热浪天气对冠心病小鼠影响实验研究,探讨高温热浪对冠心病影响的机理.应用TEM1880气象环境模拟箱模拟一次实际的热浪天气过程,按体重大小将18只冠心病小鼠分配至6个区组,每个区组3只,再将3只小鼠随机分配到对照组、热浪组、热浪BH4组中,每组共有6只小鼠.放入模拟箱内,使其受热浪天气影响,模拟热浪天气结束后,采用断头采血和摘取心脏,测量各组小鼠的ET-1、NO、HSP60、SOD、TNF、sICAM-1和HIF-1α的含量.结果表明,热浪天气可导致冠心病小鼠心肌组织SOD活性明显下降,而NO、HSP60、TNF、sICAM-1和HIF-1α的含量增加,但对ET-1水平没有任何影响.通过各项生化指标分析得知,热浪可诱导冠心病小鼠心肌组织HSP60含量明显增加,过多的HSP60可以活化免疫细胞,诱导内皮细胞、巨噬细胞分泌大量ICAM-1、TNF-α等炎性细胞因子,进而激活体内炎症系统,破坏冠状血管内皮细胞结构,使血管内膜通透性增高,心脏组织SOD活性下降,使氧化血液中的脂蛋白加剧,大量的胆固醇加速了胆固醇穿透内膜在血管内壁上的沉积,形成动脉粥样硬化,致使冠心病病情加重;从而诱导ICAM-1、血栓素等血管活性物增加,造成血粘度增加,促使血栓的形成;抑制脂蛋白酯酶活性,诱导脂质浸润血管内膜,形成动脉硬化斑块,同时控制巨噬细胞的胆固醇代谢,利于脂质物质沉积于血管壁而增加冠脉疾病风险.该实验是高温热浪导致冠心病病情加重,甚至死亡的初步机理研究成果,可为我国高温热浪预警服务和冠心病防御等提供理论依据.