盐度驯化对虹鳟幼鱼鳞片再生过程MMP2和MMP9基因表达的影响

【目的】揭示MMP2和MMP9在虹鳟(Oncorhynchus mykiss)幼鱼鳞片再生过程中的作用及盐度驯化对鳞片再生的影响。【方法】基于虹鳟转录组数据提取MMP2和MMP9基因序列信息,基于二基因氨基酸序列进行MMPs基因的系统进化分析;设置盐度驯化组(盐度27)和对照组(盐度3),分别采集两组虹鳟幼鱼在鳞片再生过程中不同时间(1、3、7、14、21 d)的正常鳞和再生鳞样品,利用实时荧光定量PCR技术检测MMP2和MMP9基因的表达水平。【结果】系统发育树分析表明,虹鳟MMP2和MMP9均与大西洋鲑(Salmo salar)相应MMPs先聚为一支,再与其他鱼类MMPs聚为硬骨鱼类分支;对照组再生鳞MMP2和MMP9表达水平均总体呈先升后降趋势,在7 d时表达量最高;盐度驯化组再生鳞MMP2基因表达水平变化趋势为先升后降,在3 d时表达量达到最大值,而MMP9基因的表达水平呈降低趋势。【结论】MMP2和MMP9在鳞片再生过程中基因表达水平的变化可作为成骨细胞和破骨细胞增殖分化的特征之一;盐度驯化抑制了虹鳟鳞片再生过程中MMP2和MMP9表达水平,表明盐度变化对骨再生过程有抑制作用...     

军曹鱼(Rachycentron canadum)性腺分化及首周年发育的组织学观察

本研究采用石蜡组织切片和H.E.染色法对军曹鱼原始性腺的形成、分化及精巢和卵巢首周年发育的组织结构变化进行观察。结果显示,军曹鱼原始生殖细胞在7孵化日龄(days post hatching,dph)时迁移到达生殖嵴,随后体细胞出现聚集和分裂,并于15 dph将原始生殖细胞完全包绕形成原始性腺。军曹鱼卵巢分化的时间要早于精巢,34 dph的稚鱼性腺组织尚未分化,但可观察到两种存在明显组织学差异的性腺类型,其中一种类型的性腺出现卵原细胞群,而另一种类型的性腺横切面较狭长,生殖细胞数量明显较少,因此推定为未分化精巢;卵巢的解剖学分化开始于44 dph,其标志为卵巢腔的形成;50 dph时精巢开始细胞学上的分化,此时精原细胞由基底膜包被形成囊泡状的细胞团。在首周年发育期间 (60～360 dph),军曹鱼的精巢发育包含I、II、III、IV、V 5个时期,而卵巢发育只包含I、II、III 3个时期。60 dph时,精巢和卵巢均处于I期;90 dph时,精巢发育至II期,卵巢仍处于I期;120 dph时,超过半数的精巢已发育至 III期,仅少部分卵巢发育至II期;150 dph时,精巢已发育至III期,而大部分卵巢发育至II期;185 dph时,精巢仍为III期,卵巢均已发育至II期;210 dph时,大部分精巢发育至IV期,卵巢仍处于II期;360 dph时,精巢已发育至V期,大部分卵巢发育至III期。上述研究结果可丰富军曹鱼的繁殖生物学研究基础,阐明其早期性腺发育规律,还可为其人工繁殖提供理论依据。