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山东近海牙鲆(Paralichthys olivaceus)自然和养殖群体10个微卫星基因座位的遗传多态性分析 总被引:26,自引:7,他引:26
采用微卫星遗传标记技术对山东近海牙鲆自然群体和养殖群体的遗传多样性进行了研究。实验所用牙鲆于2003年5月分别采自山东近海和青岛胶南养鱼场,各20尾,取全血或肌肉组织,以酚-仿抽提方法提取基因组DNA,利用筛选获得的10对微卫星引物进行PCR扩增,反应产物经8%非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分离、EB显色,用ImageMasterl D Elite(Version 3.01)软件分析电泳结果,并计算了相应的遗传学参数。结果表明,在自然和养殖群体中,10个基因座位的等位基因平均数(α)分别为6.7和6.1,每个基因座位有效等位基因数(αe)分别为1.8—6.8和2.5—6.7,群体平均杂合度(H)分别为0.8120和0.7310;两个群体间的遗传相似性系数、遗传距离和基因分化系数为0.8558、0.1557和0.0558;自然群体内每个座位上的多态信息含量(PIC)为0.59—0.84、个体识别率(DP)为0.54—0.86、非父排除率(PPE)为0.41—0.72,其累积个体识别率和非父排除率均达到0.9999,表明所选座位属中高识别力的遗传标记,可以将它们应用于今后牙鲆雌核发育群体的遗传变异分析以及进一步的遗传育种的研究中。 相似文献
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牙鲆(Paralichthys olivaceus)是我国北方沿海地区的重要经济养殖品种,目前已形成工厂化生产规模。随着养殖密度的增加以及海水污染程度的日益严重,养殖牙鲆出现了各种疾病(曲凌云等,2000; Mo Zhaolan et al.,2001).造成了巨大的经济损失。
1999~2000年,山东省荣成、威海、青岛胶南及黄岛地区养殖牙鲆大面积发病,疾病发生时间多在每年的6~11月.病鱼多为3~10月龄。本文作者对以上牙鲆发病地区进行了临床病症的调查,并进行了病原的分离和初步鉴定。 相似文献
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鳗弧菌(Vibrio anguillarum)M3菌株生长条件及其对蛋白酶产量的影响 总被引:2,自引:5,他引:2
采用体外测定细菌浓度、胞外产物(ECP)蛋白含量和蛋白酶活力的方法,进行了鳗弧菌M3菌株在2216E培养基中的培养条件研究。结果表明,该菌株用固体培养基培养至24h左右,可得到较高的菌体浓度、ECP蛋白含量和蛋白酶活力。采用响应面分析方法设计实验,用SAS统计软件分析数据,得到NaCl浓度、pH值和温度对菌体生长及蛋白酶产量影响的回归模型。在2216E培养基的基础上,添加不同氮源、碳源物质以及不同浓度蛋白胨进行生长研究。结果表明,胰大豆蛋白胨能促进菌体生长及ECP蛋白分泌;NH4Cl与酪蛋白水解物可抑制蛋白酶的产生;牙鲆肌肉匀浆对菌体、ECP蛋白产量和蛋白酶产生有不同程度的促进作用;培养基中蛋白胨浓度为4%时菌体量与ECP蛋白含量达最高值,在蛋白胨浓度为2%时蛋白酶分泌量已稳定;1%的葡萄糖、蔗糖、甘油均能显著地提高菌体及ECP蛋白产量,却抑制了蛋白酶的产生。 相似文献
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自从1973年Wnt基因被发现以来 ,通过对线虫、果蝇、两栖类、哺乳动物以及人类Wnt家族基因、蛋白及其生物学功能的研究 ,表明Wnt家族基因产物与其它相关基因的蛋白组成了一条复杂的信号传导途径。该途径在胚胎发育、细胞分化以及组织器官形态发生中起着重要的作用。Wnt[1]基因起名来源于小鼠中的Int-1(Wnt-1的最初命名 )以及果蝇中的wingless(wg)。随着研究的进展 ,越来越多的Wnt同源基因从线虫到脊椎动物被发现。Wnt家族编码糖蛋白 ,通常大约350~400个氨基酸 ,其中有100个保守的氨基酸均匀分布于序列中 ,有些Wnt蛋白中的N末端、C末端… 相似文献
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在实验室中饲养鱼是一项单调而辛苦的工作,其中缺少有效的饲养工具是使工作人员劳动量加大的重要原因。为了提高工作效率,同时使实验工作取得更好的效果,笔者设计了一种新型的实验室养鱼工具,并将其应用于真绸实验室养殖中,取得了令人满意的效果。试图就实验室养鱼工具的设计提出自己的构想。1养鱼槽养鱼槽设计见图1。设计说明防溢管的目的是为了防止进水过多而满池,其高度宜与进水管相同,较排水管高;进水管与排水管使养鱼槽能形成“常流水”,为防止附着的污物污染水,进水管和排水管都应能够拆卸清洗;清池管用于将槽中水完全排… 相似文献
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转“全鱼”溶菌酶基因大菱鲆的研究 总被引:7,自引:0,他引:7
用大西洋条鳕(Macrozoarces americanus)抗冻蛋白启动子opAFP promoter和牙鲆(Paralichthys olivaceus)c型溶菌酶基因构建“全鱼”溶菌酶基因元件opAFP—ly,首次应用电脉冲精子介导法将该基因片段导入到大菱鲆(Scophthalmus maximus)受精卵内,获得原代转基因大菱鲆。先后采用单因子方法和正交实验方法,重复实验确定了最适导入条件:脉冲电压为400V/cm,脉冲次数为5,脉冲宽度为25ms,外源DNA浓度为50mg/L。利用最适导入条件,实现基因元件大规模转移。采用PCR技术对1月龄的原代转基因大菱鲆仔鱼的染色体DNA进行分析,结果表明外源基因的整合率可达28%。 相似文献
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将青岛文昌鱼(Branchiostoma belcheri tsingtauense)肌球蛋白重链基因片段亚克隆到pET-30a质粒,构建出重组表达载体并转化入大肠杆菌Escherichia coli BL21中.经SDS-PAGE和Western杂交检测表明,在IPTG诱导下含有重组载体的菌株可表达分子质量约30 ku的融合蛋白.诱导条件优化实验结果显示,该菌株经0.2 mmol/L IPTG诱导1 h就可大量表达此蛋白.可溶性实验确认该重组蛋白是可溶性蛋白.本研究为文昌鱼肌球蛋白重链特异性抗体的制备奠定了基础. 相似文献
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The culture of Sertoli cells has become an indispensable resource in studying spermatogenesis. A new Sertoli cell line (POSC) that consisted predominantly of fibroblast-like cells was derived from the testis of the olive flounder Paralichthys olivaceus and sub-cultured for 48 passages. Analysis of the mtDNA COI gene partial sequence confirmed that the cell line was from P. olivaceus. Cells were optimally maintained at 25°C in DMEM/F12 medium supplemented with fetal bovine serum, basic fibroblast growth factor, and epidermal growth factor. The growth curve of POSC showed a typical “S” shape. Chromosome analysis revealed that the cell line possessed the normal P. olivaceus diploid karyotype of 2n=48t. POSC expressed dmrt1 but not vasa, which was detected using RT-PCR and sequencing. Immunocytochemistry revealed that the cells exhibited the testicular Sertoli cell marker FasL. Therefore, POSC appeared to consist of testicular Sertoli cells. Bright fluorescent signals were observed after the cells were transfected with pEGFP-N3 plasmid, with the transfection efficiency reaching 10%. This research not only offers an ideal model for further gene expression and regulation studies on P. olivaceus, but also serves as valuable material in studying fish spermatogenesis, Sertoli cell-germ cell interactions, and the mechanism of growth and development of testis. 相似文献