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采用5′RACE和巢式PCR的方法确定盐藻(Dunaliella salina)一种盐诱导碳酸酐酶基因的转录起始位点,通过序列分析得出转录起始位点为A,从而确定核心启动子及上游调控区的位置。应用巢式PCR技术分别扩增盐藻这种碳酸酐酶基因上游调控区的2个片段,长度大约分别为0.8和1.2kb,序列经测定无误后分别与带β-葡糖苷酸酶(GUS)报告基因的载体相连接,经酶切鉴定这两种表达载体构建正确。用基因枪法将这两个载体导入盐藻细胞中,经染色检测,GUS基因在转化藻株中得到瞬时表达。 相似文献
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1 INTRODUCTION The unicellular Dunaliella salina, is one of the well studied microalgae for mass culture and is of commercial importance as a source of natural beta-carotene (Avron and Ben-Amot, 1992). D. sa- lina has desirable properties of halotolerance… 相似文献
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盐藻胞浆hsp70 cDNA的克隆及其mRNA的诱导表达 总被引:2,自引:0,他引:2
用cDNA末端快速扩增方法克隆得到了一个2652bp的盐藻(Dunaliella salina)胞浆hsp70 cDNA全长,编码着650个氨基酸残基的多肽。推导的氨基酸序列有2个ATP酶结合位点和一个多肽结合区。由克隆得到的盐藻cDNA推导的氨基酸序列,经GenBank blast后与数据库中胞浆hsp70序列一致。与莱茵衣藻(Chlamydomonas reinhardtii)、人、小麦(Triticum astivum)和啤酒酵母(Saccharamyces.cerevisiae)胞浆hsp70的序列一致性分剂为83%、80%、81.5%和80.5%。Northern印迹显示,90min后,mRNA量在40℃热休克时是光诱导时的3倍。光诱导则使hsp70 mRNA积累相对迟缓。结果表明,所克隆得到的hsp70基因蛋白产物定位在盐藻细胞浆中,光诱导和热休克均可以使hsp70 mRNA水平明显增高,但以热休克为显著。 相似文献
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