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大黄鱼β2-微球蛋白基因的克隆及其在大肠杆菌中的重组表达 总被引:1,自引:0,他引:1
主要组织相容性复合体(major histocompatibility complex,MHC)是一类高度多态的基因群,它广泛分布于各种脊椎动物体内,在启动特异性免疫应答中起关键作用.MHC根据结构分为Ⅰ型和Ⅱ型两种.β2-微球蛋白(β2mcroglobulin,β2m)是MHCI型分子的轻链.本文根据大黄鱼β2m的表达序列标签(expressed sequence tags,EST)序列设计合成了特异性引物,利用RT—PCR技术从大黄鱼脾脏组织中克隆了β2m基因(Pscr-β2m);构建了合β2m因的原核表达载体(pGEX4T-2-β2m,在0.1mmol/dm^3IPTG诱导下重组β2m得到了表达;采用Sepharose 4B亲合层析纯化目的蛋白并制备了抗体;Western—blotting分析证实了该抗体具有与天然大黄鱼脾脏组织中β2m蛋白反应的特性.这些结果为进一步研究鱼类β2m构与功能的关系,以及制备MHCI类分子四聚体奠定基础. 相似文献
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