病毒膜蛋白及其表达和纯化技术的研究进展

病毒囊膜是包膜病毒除核衣壳外的另一主要成分。它主要由多种蛋白质构成，称为膜蛋白，膜蛋白以单聚体，二聚体，三聚体，甚至更多的聚合体的形式存在，具有中和抗体，与靶细胞受体结合，凝集红细胞，诱导细胞融合等多种功能，膜蛋白可采用将其基因整合入载体，并在昆虫细胞，哺乳细胞或细菌中获得体外表达，膜蛋白可在去污剂的作用下形成蛋白质－脂－去污剂的复合物而被溶解，其中去污剂的临界微团浓度，亲水物－亲脂物平衡值，荷电、紫外穿透性等是选择合适去污剂的主要参考因子，溶解后的膜蛋白多利用聚丙烯酰胺凝胶电泳、凝胶过滤层析，离子交换层析，亲和层析，高效液相层析等技术并结合梯度离心；分级沉淀等进行分离、纯化。     

白斑综合症病毒(WSSV)的宿主调查

用地高辛 (DIG)标记的WSSVDNA探针斑点杂交与原位杂交技术 ,在中国对虾、斑节对虾、南美白对虾、刀额新对虾、脊尾白虾、天津厚蟹、日本大眼蟹体内检测到了WSSV ,它们是WSSV的天然宿主 ;在经人工感染的哈氏美人虾、短脊鼓虾、克氏原螯虾、肉球近方蟹、滕壶体内检测到了WSSV ;在球形侧腕水母、病虾池的桡足类等浮游生物、卤虫无节幼体以及人工浸泡感染卤虫成体体内没有检测到WSSV。经原位杂交检测 ,虾类的甲壳下上皮、胃上皮、附肢、造血组织、鳃等组织器官均可被WSSV侵染 ,其中甲壳下上皮和鳃对WSSV敏感 ;蟹类的甲壳下上皮和鳃对WSSV敏感 ;在中国对虾、南美白对虾、脊尾白虾、注射感染的克氏原螯虾的精巢中 ,精荚的结缔组织细胞和血细胞呈阳性 ,在中国对虾、脊尾白虾以及注射感染的短脊鼓虾的卵巢中 ,结缔组织细胞和滤泡细胞被WSSV感染。     

中国明对虾精氨酸激酶与白斑综合征病毒结构蛋白VP31的作用初探

白斑综合征病毒(white spot syndrome virus,WSSV)是危害对虾的主要病原,给全球水产养殖业带来了巨大经济损失。为研究阻断WSSV的途径,前期研究WSSV与宿主相结合的受体蛋白发现,白斑综合征病毒囊膜蛋白VP31可以与中国明对虾(Fenneropenaeus chinensis)精氨酸激酶(FcAK)发生结合作用。精氨酸激酶(AK)通过调节无脊椎动物体内磷酸精氨酸与三磷酸腺苷(ATP)之间平衡在能量代谢、储存和利用方面具有重要作用。作者通过重组表达的rFcAK与rVP31的far-Western blotting分析,证实两者有结合作用,此外,rFcAK还与WSSV的VP19、VP28等6种结构蛋白有结合作用。双向电泳分析观察到,rFcAK与rVP31的磷酸化反应后,rVP31部分发生pI降低现象,提示rVP31可能发生了磷酸化。生物信息学分析表明VP31存在21个精氨酸残基,FcAK具有12个精氨酸结合位点,这可能为VP31和FcAK的结合活性提供了靶位。为进一步研究WSSV与宿主结合机理及阻断感染的机制提供思路。     

凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)Runt转录因子的基因克隆及其功能分析

Runt结构域转录因子家族(Runx)在哺乳动物体内存在三种基因型,分别起着造血,骨生成和控制上皮细胞增殖的作用。本文应用反转录和c DNA末端快速扩增(RACE)技术,首次在凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)中克隆并测序了一种Runt(lvrunt)基因全长。lvrunt c DNA全长1754bp,含有1个663bp长的开放阅读框,编码221个氨基酸,理论分子量为23.6k Da,具有Runt-family结构域。对凡纳滨对虾鳃、肠、肝胰腺、类淋巴、心脏、肌肉组织和血淋巴lvrunt的转录特征进行分析,结果显示该基因几乎特异性地在血淋巴细胞中表达,而在其他组织中表达较低。肌肉注射重组造血激素蛋白(r AST)或白斑综合征病毒(WSSV)粗提液均可显著提高lvrunt在凡纳滨对虾体内的转录表达。上述结果提示,lvrunt主要在血细胞发挥作用,可能作为造血激素的下游基因起到调节血细胞增殖和分化的作用,并在受到病毒感染后,参与提升血细胞数量或者促进血细胞分化的过程。     

无人机遥感技术在北京首云铁矿储量动态监测中的应用

如何快速、准确、廉价地开展矿山监测一直是国土资源遥感领域的研究热点。以北京首云铁矿为例,首先在2014年8月和2016年10月分别对其进行了无人机(unmanned aerial vehicle,UAV)野外调查;然后,利用无人机摄影测量技术(UAV structure from motion,Sf M)获取了高精度的数字地表模型(digital surface model,DSM)以及数字正射影像图(digital orthophoto map,DOM);最后,利用改进的地形变化算法(DSM of difference,Do D)快速计算出矿山动用储量体积变化,通过乘以该矿山平均含矿率、矿石平均体重以及矿石平均品位即得到储量变化。研究结果表明,对于露天开采的矿区,利用无人机遥感技术能够快速、准确计算出矿山动用储量,实现对露天矿山动用储量的动态监测,为矿山储量动态监测以及矿山环境监测提供了新的思路。     

落地通信基站机房地震易损性及震后功能失效概率评估

机房是移动通信基站的重要组成部分,其地震易损性将决定基站在震后的功能状态,即基站所辖范围内的移动通信服务在震后是否可以正常使用。在对我国北方某市典型落地通信基站机房进行实地考察的基础上,确定了影响机房地震后使用功能的重要设施（即基站板房、内部走线架、通信机柜和蓄电池组）;随后采用有限元软件ABAQUS分别建立了这些设施的数值模型,通过Pushover分析确定了每种设施的损伤模式、损伤水平评价指标及其数值;通过IDA分析得到了每种设施的抗震性能,并通过对IDA分析结果的统计得到了这些重要设施的地震易损性曲线;最后,给出了基于故障树模型的典型通信基站机房震后功能评估的方法。该工作将作为基本环节用于城市及地区移动通信系统的地震后功能状态评估与预测。     

基于Xu-White模型横波速度预测的误差分析

在砂泥岩剖面中,基于Gassmann方程和Xu-White岩石物理模型,利用常规测井资料及实验室岩石物理数据进行横波速度估算.模型中考虑了泥质砂岩中基质性质、泥质含量、孔隙度大小和孔隙形状以及孔隙饱含流体性质对岩石速度的影响.综合分析了模型中砂、泥岩和孔隙流体弹性参数以及孔隙纵横比等输入参数的误差对预测横波速度精度的影响.数值模型试验表明,在Xu-White模型中采用变化的孔隙纵横比估算出的横波速度远远比采用固定孔隙纵横比估算出的横波速度准确.     

Impact of <Emphasis Type="Italic">Vibrio parahaemolyticus</Emphasis> and white spot syndrome virus (WSSV) co-infection on survival of penaeid shrimp <Emphasis Type="Italic">Litopenaeus vannamei</Emphasis>

White spot syndrome virus (WSSV) is an important viral pathogen that infects farmed penaeid shrimp, and the threat of Vibrio parahaemolyticus infection to shrimp farming has become increasingly severe. Viral and bacterial cross or superimposed infections may induce higher shrimp mortality. We used a feeding method to infect Litopenaeus vannamei with WSSV and then injected a low dose of V. parahaemolyticus (WSSV+Vp), or we first infected L. vannamei with a low-dose injection of V. parahaemolyticus and then fed the shrimp WSSV to achieve viral infection (Vp+WSSV). The eff ect of V. parahaemolyticus and WSSV co-infection on survival of L. vannamei was evaluated by comparing cumulative mortality rates between experimental and control groups. We also spread L. vannamei hemolymph on thiosulfate citrate bile salt sucrose agar plates to determine the number of Vibrio, and the WSSV copy number in L. vannamei gills was determined using an absolute quantitative polymerase chain reaction (PCR) method. LvMyD88 and Lvakt gene expression levels were detected in gills of L. vannamei by real-time PCR to determine the cause of the diff erent mortality rates. Our results show that (1) the cumulative mortality rate of L. vannamei in the WSSV+Vp group reached 100% on day 10 after WSSV infection, whereas the cumulative mortality rate of L. vannamei in the Vp+WSSV group and the WSSV-alone control group approached 100% on days 11 and 13 of infection; (2) the number of Vibrio in the L. vannamei group infected with V. parahaemolyticus alone declined gradually, whereas the other groups showed significant increases in the numbers of Vibrio (P<0.05); (3) the WSSV copy numbers in the gills of the WSSV+Vp, Vp+WSSV, and the WSSV-alone groups increased from 10⁵ to 10⁷ /mg tissue 72, 96, and 144 h after infection, respectively. These results suggest that V. parahaemolyticus infection accelerated proliferation of WSSV in L. vannamei and vice versa. The combined accelerated proliferation of both V. parahaemolyticus and WSSV led to massive death of L. vannamei.     

96孔酶标板法测定对虾血淋巴的过氧化物酶相对活性的初步研究

过过氧氧化化物物酶酶（（ＰＰＯＯＤＤ））广广泛泛存存在在于于真真核核生生物物体体内内 ,,在在清清除除自自由由基基 ((ＯＯ - - )) ,,防防止止生生物物分分子子损损伤伤方方面面有有十十分分重重要要的的作作用用。。因因此此通通过过测测量量对对虾虾血血淋淋巴巴的的过过氧氧化化物物酶酶活活性性大大小小可可以以推推测测对对虾虾的的生生理理状状态态 ,,甚甚至至可可用用其其辅辅助助检检测测或或诊诊断断对对虾虾病病害害的的生生理理指指标标。。丁丁美美丽丽等等采采用用改改良良的的连连苯苯三三酚酚自自氧化化法法测测定定中…