转录组和蛋白组分析海带褐藻多糖硫酸酯对RAW 264.7细胞的免疫调节作用

海带(Saccharinajaponica)是我国的主要经济褐藻,从海带中制备的褐藻多糖硫酸酯具有免疫调节等多种生物活性,但鲜有基于组学的研究报道。本文采用RNA高通量测序(RNA-sequencing,RNA-seq)转录组学技术以及平行反应监测(ParallelReactionMonitoring,PRM)靶向定量蛋白组学方法,探究海带褐藻多糖硫酸酯作用于小鼠巨噬细胞RAW 264.7后对巨噬细胞功能和通路的影响。结果表明,褐藻多糖硫酸酯(100μg/mL)作用于RAW 264.7细胞后,差异表达基因主要富集在免疫反应、先天性免疫应答等生物过程以及TNF、NF-κB、Toll样受体等信号通路,也可促进RAW 264.7细胞膜蛋白A类清道夫受体(SR-A)中SCARA3和Toll样受体中TLR4的表达。采用流式细胞仪对褐藻多糖硫酸酯作用后SR-A和TLR4的表达量进行蛋白水平的验证, SR-A和TLR4的表达量均有升高,证实了组学结果的可靠性。本研究结果为利用褐藻多糖硫酸酯开发具有免疫调节作用的功能食品或药物提供依据。     

海藻多糖微量元素配合物的生物活性初步研究

用广东沿海盛产的半叶马尾藻Ｓａｒｇａｓｓｕｍｈｅｍｉｐｈｙｌｌｕｍ为原料提取多糖，与Ｆｅ（３＋），Ｚｎ（２＋）等微量元素进行反应，形成能溶于水的海藻多糖配合物。分别以剂量为３００ｍｇ·ｋｇ（－１）的海藻多糖配合物饲喂ＮＩＨ系小鼠７－１５ｄ。结果发现，该多糖配合物能提高小鼠的血红蛋白和红细胞数量。其中，以Ｆｅ（３＋）海藻多糖配合物效果最显著。观察各种免疫指标，发现海藻多糖和海藻多糖微量元素配合物都能提高小鼠的免疫指标。海藻多糖微量元素配合物的效果比海藻多糖好。结果提示，微量元素参与了机体的免疫活动，并提高了免疫活性。     

高古罗糖醛酸含量的萱藻(Scytosiphon lomentarius)多糖细微结构研究

将青岛产幼生和成熟期萱藻(Scytosiphon lomentarius)提取分离得到多糖,经<'1>H-NMR分析,表明其为高古罗糖醛酸含量的褐藻胶,在对其G/M值分析基础上,进一步对其二糖嵌段F<,MM>,F<,MG>,F<,GM>,F<,GG>和三糖嵌段F<,GGG>,F<,GGM>,F<,MGM>,F<,MGG...     

含钾矿粉对胶质芽孢杆菌分泌胞外多糖的影响

研究了不同实验条件下,含钾矿粉对胶质芽孢杆菌（Bacillus mucilaginosus）分泌胞外多糖的影响,以进一步揭示细 菌与矿物的相互作用机理。实验分别采用无矿（不加含钾矿粉）无钾（不含可溶性钾）、无矿有钾（有可溶性钾）、有矿（100 mL培养液加0.3 g含钾矿粉）无钾及有矿有钾4组培养基培养胶质芽孢杆菌,进行产胞外多糖的分析比较。研究发现,在有 钾长石粉但不含钾离子的培养条件下,胶质芽孢杆菌产生的多糖和蛋白质含量最高;在既有钾矿粉又有可溶性钾离子存在 的培养条件下,菌体产生的蛋白质和胞外多糖含量稍低;在无钾矿粉的条件下,无论有没有钾离子的两种培养基中,蛋白 质和多糖含量都很低。研究结果表明,有无钾矿粉的不同培养条件能够引起胶质芽孢杆菌分泌胞外多糖的单糖组成成分产 生明显差异,胶质芽孢杆菌胞外分泌物与细菌对含钾矿粉中钾的利用密切相关。     

气相色谱法分析海洋沉积物中多糖的组成

碳水化合物是海洋有机质的主要组成部分，海洋中的碳水化合物主要以聚合物的形式存在，其分子组成信息对研究它们的来源及其在生物地球化学循环中的作用具有重要意义。作者应用毛细管气相色谱法分析了海洋沉积物中多糖的组成。利用2．0mo1／L三氟乙酸，在80℃水解8h，把沉积物中的多糖水解成单糖，从而把单糖萃取到水相中。水解液在60℃旋转蒸发除去三氟乙酸，用等量的阴离子和阳离子交换树脂混合柱脱除残留离子，以Milli—Q水洗脱。洗脱液经蒸发、干燥后，用吡啶溶解，在0．2％LiClO4吡啶溶液催化下，于60℃经48h达到互变异构平衡。平衡异构体经Regisil试剂衍生化成三甲基硅醚(1MS)，用HP5890气相色谱仪进行分析。使用长30m、内径0．32mm的HP—5石英毛细管柱，配FID检测器，进样口和检测室温度保持在300℃，采用无分流进样，以N2作载气，流速为2．0ml/min，柱箱在140℃保留4min，然后以2℃／min的速度升温到220℃，保留10min。以每种单糖的相对保留时间定性；选择每种单糖中分离效果好、组成占优势的异构体峰面积作为单糖定量的依据，采用内标标准曲线法定量。应用这一方法分析了厦门港沉积物样品，确定了沉积物中7种主要中性单糖的组成。方法的样品加标准回收率为77．0％一115％，相对标准偏差为1．8％一11％；空白加标准回收率在93．8％一113％之间，相对标准偏差为0．6％一9．5％；当信噪比为3时，各单糖的检出限为0．02一0．06mg／L;内标戊五醇的全程回收率为79．8％(n＝6，RSD=5．2％)。     

红树林海洋细菌的分离鉴定及其活性物质初步分析

从广西北部湾红树林海洋淤泥中分离筛选到270株海洋细菌,用喉癌细胞Hep-2的细胞毒作用为筛选模型,用SRB法检测这270株海洋细菌的抑制肿瘤细胞生长活性,其中13株呈阳性反应。依据形态和生理生化反应特征及16SrRNA基因序列分析,确定其中一株为短小芽孢杆菌Bacillus pumilusPLM4。取该菌株液体培养上清液,检测对人喉癌细胞Hep-2的生长抑制率为63.9%,经过凝胶过滤层析分析获得2个活性峰,其中活性高的峰估计平均分子量为116kd。采用经典显色反应法初步判断该活性物质为多糖。     

免疫多糖对养殖南美白对虾作用的研究

于１９９５年６月在威海市水产开发公司对虾育苗场采集南美白对虾,经暂养后,选取体长６－７ｃｍ的个体,利用由海藻中提取的与微生物多糖有类似结构和性质的免疫多糖作为饵料添加剂,以口服形式对南美白对虾进行免疫,刺激其免疫系统。     

Extraction,isolation and structural characterization of polysaccharides from a red alga <Emphasis Type="Italic">Gloiopeltis furcata</Emphasis>

Three kinds of polysaccharides:GFW,GFH and GFA,were sequentially extracted from a red alga Gloiopeltis furcatawith 25℃and 85℃water,and 60℃ 4%NaOHwater solution.Based on the defatted alga,the yields of the polysaccharide were57.9%,2.5%and 2.6%,respectively.Their monosaccharide compositions,average molecular weights and structural characters weredetermined by gas chromatography(GC),high performance liquid chromatography(HPLC),fourier transform infrared spectroscopy(FTIR)or13C-NMR spectroscopy.The results show...     

海藻硫酸多糖911抗乙脑病毒作用的观察

采用体外微量细胞病变抑制实验及体内半数致死量LD_(50)测定法,分别观察海藻硫酸多糖911对乙型脑炎病毒的作用。结果表明,海藻硫酸多糖911在体外适宜的浓度条件下,对乙型脑炎病毒有一定的抑制作用,但对病毒无中和作用。体内给药,911对乙型脑炎病毒无明显抑制作用。     

几种褐藻中褐藻多糖硫酸酯的分离及分析

分别从３种马尾藻及３份不同产地的海带中提取出褐藻多糖酸酯，并比较了它们的得率和化学组分。得率最高的在大连产海带，为５．５％。马尾藻褐藻多糖硫酸酯组成都很复杂，硫酸根含量都比较低。