草鱼呼肠孤病毒vp5基因诱饵重组载体的构建、转化与自激活作用检测

根据草鱼呼肠孤病毒(Grass Carp Reovirus,GCRV)的vp5基因设计特异性引物,并扩增其开放阅读框序列(open reading frame,ORF),然后连接至pGBKT7载体上构建酵母双杂交诱饵载体pGBKT7-vp5,转化至酵母菌Y2HGold,并进行PCR鉴定以及自激活性和毒性检测。PCR、酶切以及测序表明,pGBKT7-vp5重组诱饵载体构建成功。自激活性和毒性检测显示,阳性重组菌株pGBKT7-vp5/Y2HGold和阴性对照菌株pGBKT7/Y2HGold在SD/-Trp平板上出现大小相一致的乳白色菌落,且在SD/-Trp/X-α-Gel、SD/-Trp/AbA+/X-α-Gel平板上生长出蓝色菌落,而在SD/-Trp/-Ade/-His无菌落出现。表明重组菌株pGBKT7-vp5/Y2HGold表达的融合蛋白激活了报告基因AUR1-C和MEL1,没有激活报告基因ADE2和HIS3并且对宿主菌无毒性。该重组诱饵载体可用于酵母双杂交系统进一步筛选cDNA文库中与其相互作用的蛋白。     

草鱼网围养殖区声波的研究

对网围养殖区内草鱼的活动声涮进行了采集与分析．并将采集的声波进行了回放。结果表明．草鱼网围养殖区声波频率范围为0～3．2kHz．整个频段内没有宽带波峰。在草鱼饥饿、食饵和饱食的不同状态下养殖区内的水声特性有一定的差异。研究表明在网围养殖区通过声波回放能对草鱼起到诱集作用．在投饵回放、投饵不同放及不投饵回放声波的情况下，草鱼的响应时间分别为2．55、3．50、4．80min．存在显著差异。回放持续性声波和间隔性声波在响应时间上不存在显著差异。     

400 Hz矩形波连续音对鲤、草鱼音响驯化的试验研究

音响驯化技术被广泛应用于海洋牧场及淡水水域对鱼类行为的控制,但在采用何种频率和波形声音方面的研究积累尚少。试验室条件下,利用400 Hz矩形波连续音对鲤、草鱼进行了音响驯化试验。结果表明,鲤、草鱼的反应时间和聚集时间均逐日减少。平均反应时间分别为25.4 s和34.6 s,平均聚集时间分别为48.9 s和56.9 s;聚集率则逐日增加.驯化5 d后,鲤、草鱼的聚集率均达到100%,平均聚集率分别为89.7%和94.1%。由此可见.400 Hz矩形波连续音对鲤、草鱼均有明显的驯化作用。     

外源视黄酸对草鱼早期胚胎发育的影响

以１０＾－６Ｍ和１０＾－５Ｍ的视黄酸体外处理草鱼（Ｃｔｅｎｏｐｈａｒｙｎｇｏｄｏｎ ｉｄｅｌｌｕｓ）早期胚胎,结果发现其影响了胚胎的形态发育,影响其中轴器官的形成和神经系统的分化,使胚胎前部结构全部或部分缺失,由此诱导的神经器官,如眼、听囊、嗅囊等缺失或不分化,胚胎的尾部缩短;同时也减少了色素细胞的形成。并且这种畸形程度随着处理浓度加大,时间加长而加剧。但是原肠中期以后处理的胚胎,神经系统发育基本正常,因此说明视黄酸并不抑制原肠作用和随后的神经诱导。它可能是通过抑制某些基因的表达而影响神经外胚层的区域性分化。     

儿茶酚胺类药物对草鱼鱼种生长激素分泌的影响

通过腹腔注射药物,尾静脉取血,放射免疫测定激素含量等方法研究了Ｌ－多巴等几种药物对草鱼鱼种生长的激素分泌的影响,发现腹腔注射Ｌ－多巴,阿朴吗啡可以显著提高草鱼鱼种血清生长激素水平,而腹腔注射多巴胺,去甲肾上腺素,肾上腺素和６－羟多巴则可明显降低草鱼鱼种血清生长激素水平。     

鲢序列已知标记连锁图构建及鲢-草鱼标记共线性分析

鲢、草鱼是传统池塘养殖的四大家鱼的2个重要成员,其遗传资源评估与管理、性状遗传基础研究、功能基因从头克隆等迫切需要序列已知标记连锁图谱工具。本研究将已有鲢连锁图谱新整合53个草鱼微卫星DNA标记和28个鲢InDel-RFLP标记,构建了鲢已知序列标记连锁图谱,标记数326个,达到中等密度水平。构建的图谱将为鲢、鳙资源评价和管理、性状遗传基础研究等提供工具。另外,本研究初步比较了鲢、草鱼间标记共线性排列,发现两物种染色体既存在共线性,也存在明显重排。     

草鱼出血病病毒的研究进展

根据８０－９０年代中国关于草鱼出血病病毒研究的进展,就草鱼出血病病毒的发现、形态结构特征、理论特性、基因组结构及其所编码的多肽、基因组的转录和翻译过程,病毒的繁殖动态、体外细胞培养特性,病毒对鱼体的致病机理和宿主范围,草鱼出血病的诊断和防治等问题进行综合评述,总结概括了草鱼出血病病毒的研究现状以及研究中需要亟待解决的问题,并提出该领域以后的重点研究方向。     

用逆转录聚合酶链反应检测草鱼出血病病毒的研究

于１９９４年５月－１９９５年７月，根据已克隆的草鱼出现血病病毒ＧＣＨＶ－８６１株ｃＤＮＡ的部分序列，设计合成了两对ＰＣＲ引物，采用ＲＴ－ＰＣＲ技术对ＧＣＨＶ－８６１ＧＣＨＶ－８７３两病毒株的ｄｓＲＮＡ进行扩增，结果表明，两对引物仅能特异地检测了ＧＣＨＶ－８６１病毒株核素的存在，而不能对ＧＣＨＶ－８７３病毒株的核酸进行特异扩增，该方法是最小可检测出０．１ｐｇ纯化的ＧＣＨＶ－８６１病毒ｄｓＲＮＡ，采用     

伊乐藻对草鱼圈养区环境的影响

通过人工围隔内伊乐藻种植区、无草区和围隔外湖区对照点的水质,底质定期观测,研究了伊乐藻对围栏养鱼环境的影响。结果表明:(1)围栏养鱼残饲和排泄物增加了水中N、P和COD含量,使DO与pH值降低,但伊乐藻对N的净化能力较强,使种植区TN和ION比无草区低14.5％和33.1％;(2)围栏养鱼对底泥的影响,无草区无明显变化,伊乐藻种植区养鱼前期N、P、C含量均低于本底值,养鱼后期有明显的增加趋势;(3)据N、P投入、输出计算,输出和迁移至伊乐藻与鱼体的大于投入的,计算表明,在伊乐藻生长旺季,养鱼与种植面积之比为1:3.58时,不会增加水中N、P含量。(4)养殖水体稀释扩散试验结果,在有草水体中围栏养殖水体对环境影响不大。     

逆转录聚合酶链式反应中dsRNA模板的快速制备

应用ＲＴ－ＰＣＲ技术检测草鱼出血病病毒。建立了一种快速、简易而可靠的ｄｓＲＮＡ模板的制备方法。应用该方法制备模板进行ＲＴ－ＰＣＲ扩增，可以有效地检测出病鱼组织及病毒感染的培养细胞裂解液中的草鱼出血病病毒，且全过程只需３～４ｈ，大大缩短了检测时间