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461.
【目的】对Galectin-3蛋白进行纯化,优化诱导相关表达条件,为大量获取罗非鱼Galectin-3蛋白提供方案。【方法】根据NCBI上已公布的罗非鱼(Oreochromismossambicus)Galectin-3基因序列,设计多对带Eco RI和Xhol酶切位点的引物,筛选出良性扩增引物,对罗非鱼cDNA经进行聚合酶链式反应(PCR)扩增、限制性快切酶双酶切、T4连接酶连接等步骤,构建罗非鱼Galectin-3基因的原核表达质粒pGEX-4T-Galectin-3,将重组质粒导入大肠杆菌BL21中,进行Galectin-3重组蛋白的表达。并比较不同的诱导温度、诱导时间、IPTG浓度条件下的表达效果,对Galectin-3蛋白表达最优条件进行筛选。【结果】构建了罗非鱼Galectin-3原核表达质粒,进行Galectin-3重组蛋白后发现37℃下,0.4 mmol/L浓度的IPTG诱导5 h即可诱导Galectin-3重组蛋白高效表达。免疫印迹结果显示,经蛋白纯化柱纯化后的pGEX-4T-Galectin-3重组蛋白可与GST-Tag单克隆抗体发生特异性反应,进而表明表达的重组蛋白是罗非鱼的Galectin-3蛋白。【结论】本研究成功构建了罗非鱼Galectin-3基因的原核表达载体,并确定了Galectin-3融合蛋白最适的表达条件:37℃下,0.4 mmol/L浓度的IPTG诱导5 h。 相似文献
462.
目的:制定接骨续筋散的质量控制方法。方法:采用薄层色谱法(TLC)对接骨续筋散中骨碎补、续断、西红花、赤芍、木香进行定性鉴别。采用高效液相色谱法(HPLC)对骨碎补中的柚皮苷进行定量分析。结果:在TLC色谱中可鉴别制剂中的骨碎补、续断、西红花、赤芍、木香;柚皮苷在0.032~3.150mg范围内呈现良好的线性关系(r=0.9999),样品中柚皮苷的平均加样回收率为100.53%(RSD=2.10%)。结论:建立了接骨续筋散的TLC定性鉴别方法和HPLC定量方法,方法准确、重现性好,可用于该制剂的质量控制。 相似文献
463.
目的:研究玄参中各主要环烯醚萜苷在干燥过程和水浴加热过程中的稳定性。方法:将4等份玄参叶分别采用室温(20℃)干燥20d及40℃、60℃、80℃直接烘干,5等份玄参根冷浸液不同水浴温度(40℃、60℃、70℃、80℃、90℃)加热1h,HPLC法测定玄参中主要环烯醚萜苷桃叶珊瑚苷、哈帕苷、哈帕俄苷含量。结果:不同烘干温度下测得玄参叶中各环烯醚萜苷含量,以室温及40℃最低,60℃最高,但与80℃差异不明显;玄参根冷浸液不同水浴温度加热1h后,4种成分含量变化不显著。结论:玄参鲜药材干燥温度对其主要环烯醚萜苷含量影响很大,但提取过程中的温度对其影响不大。 相似文献
464.
465.
466.
PSB精轧螺纹钢筋扩大头抗浮锚杆运用于工程中的实例和研究较少。基于成都某基坑工程的PSB精轧螺纹钢筋抗浮锚杆,采用抗拔试验、ABAQUS数值模拟的方法对其受力特征进行研究。研究表明,(1)PSB精轧螺纹钢筋抗浮锚杆具有良好的承载特性,其荷载-位移(Q-S)特征曲线的具有单调上升性状;(2)荷载-位移(Q-S)特征曲线具有分段性,荷载较小时,曲线斜率较大,荷载增大时,曲线斜率变小,呈近似线性变化;(3)最大加载(1412kN)条件下,最大位移量为15.05~19.20mm,最大塑性位移量为6.77~10.31mm,约占总位移量的45%~62%;(4)数值模拟显示,在杆体变截面处以上1.0m范围内钢筋轴向应力降幅达到了31%,说明锚杆周边土体的侧摩阻作用仍有很大的承载能力。 相似文献
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2019年8月2日河北省唐山市路南区某矿井区发生ML2.4巷道塌陷,基于塌陷周边台站观测到的短周期瑞雷波,提取面波基阶群速度频散曲线,并利用迭代反演方法得到研究区域地下10 km深度范围内的一维剪切波速度结构,用于精定位分析。速度分析结果表明,研究区域浅表剪切波速度约为2.46 km/s;深度为2 km时,塌陷周边存在小范围的低速区,速度约为2.57 km/s;深度约为4 km时,剪切波速度达3.47 km/s;深度为5~9 km时,唐山东部沉积盆地内存在1个剪切波低速层。精定位分析结果表明,增加浅层速度模型有助于提高深度较小的地震定位精度;塌陷周边的低速区向下延伸近20 km,为地震多发区。 相似文献
468.
高速铁路轨道中长波平顺性参数的计算方法是高速铁路轨道精测与精调的核心技术,现有的中长波平顺性参数计算多采用以轨道点法向偏移量代替矢距差(即设计矢距与实测矢距之差)的近似计算方法。由于该算法忽略实测弦线端点偏差的影响,导致轨道实测轨向(高低)计算结果与严密算法计算结果存在一定的偏差。鉴于现有近似算法存在准确度低的缺点,文中在现有近似算法的基础上提出一种改进算法,并通过对轨道实测坐标数据的计算和对比,验证改进算法的可行性和准确性,并提高高铁轨道中长波平顺性参数计算结果的准确度,可为高速铁路轨道精测与精调提供参考。 相似文献
469.
470.