饲料中添加枯草芽孢杆菌和壳寡糖对大黄鱼幼鱼血清免疫指标的影响

本实验采用2×3双因子实验设计,分别在基础饲料中添加0(对照)、0.5×107和1.0×107/g枯草芽孢杆菌,在每个枯草芽孢杆菌添加水平分别添加0(对照)、0.3％和0.6％的壳寡糖,配制出9种等氮等能的实验饲料,在海水浮式网箱中进行为期70 d的实验,探讨饲料中枯草芽孢杆菌和壳寡糖的添加对大黄鱼(Pseudosciaena crocea)血清免疫指标的影响.实验结果表明,在每个枯草芽孢杆菌水平下,饲料中添加0.3％和0.6％的壳寡糖显著提高了大黄鱼幼鱼血清溶菌酶的活性(P＜0.05),而对大黄鱼血清替代途径补体活力,超氧化物歧化酶(SOD)活力及过氧化氧酶( CAT)活力没有显著性影响.在每个壳寡糖水平,饲料中枯草芽孢杆菌的添加对大黄鱼血清免疫指标的影响不显著.饲料中枯草芽孢杆菌和壳寡糖对大黄鱼幼鱼血清免疫指标的影响不存在交互作用.总的来说,饲料中添加一定量的壳寡糖(0.3％～0.6％)在一定程度上影响了大黄鱼幼鱼的非特异性免疫反应.     

大黄鱼性早熟问题的研究—I.网箱养殖鱼性泉发育状况

用组织学方法研究了网箱养殖大黄鱼性腺发育的状况,结果表明,在所研究的１０个网箱（养殖期１ａ）中,其中６个网箱各有少数大黄鱼卵巢进入大生长期,卵母细胞胞质出现卵黄颗粒,其余网箱大黄鱼处于小生长期,在雄性,全部网箱大黄鱼精巢发育进入ＩＩＩ－ＩＶ期。根据这些结果,我们认为,在夏季７、８月间可能有５０％～６０％雌性和６０％～７０％雄性提早性腺成熟。     

低盐胁迫对大黄鱼非特异性免疫酶活力的影响

以大黄鱼(Larimichthys crocea)为研究对象,研究急性、慢性低盐度胁迫对大黄鱼存活状况及非特异性免疫酶活力的影响。结果表明：急性低盐(15、8)胁迫下,在7 d的实验周期中,大黄鱼肝脏的超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)活力呈先上升后下降的趋势,在第1天显著上升(p<0.05)后逐渐下降至显著低于对照组水平;肝脏的过氧化氢酶(catalase, CAT)活力整体呈先下降后上升再下降的趋势,在第1天显著下降后开始升高,第3天后开始下降,至第7天时CAT活力仍显著低于对照组水平;血清中的酸性磷酸酶(acid phosphatase, ACP)活力呈下降后逐渐升高的趋势,在第1天时显著下降后逐步升高,至第7天时仍显著低于对照组;而血清中的碱性磷酸酶(alkaline phosphatase, ALP)活力在实验开始的第1天到第3天逐渐升高,且均显著高于对照组,至第7天时开始下降至对照组水平;血清中的溶菌酶(lysozyme, LZM)含量呈波动变化,整体呈先上升后下降趋势。慢性低盐(8)养殖14 d后,大黄鱼的各项非特异性免疫酶活力均与...     

大黄鱼(Larimichthys crocea)新品种“东海1号”体长相关的DArT标记筛选

大黄鱼(Larimichthys crocea)是我国重要的海产经济鱼类。因多年未加选育的累代养殖,养殖大黄鱼生长缓慢,性早熟、免疫力低下,亟需对养殖大黄鱼进行遗传改良。多样性芯片技术(Diversity arrays technology,DAr T)具有高通量和低成本的显著特点,不需要明确物种的基因组DNA序列信息,因而广泛应用于动植物遗传图谱制作和遗传多样性分析。本研究旨在采用DAr T技术鉴定与"东海1号"大黄鱼体长相关分子标记。首先随机测得"东海1号"大黄鱼199个个体体长,均值为13.45cm,符合正态分布(P0.05),"极端大群体"和"极端小群体"之间差异显著(P0.01)。然后采用7组限制性内切酶组合(Pst I/Alu I、Pst I/Ban II、Pst I/Bsp1286I、Pst I/Bst NI、Pst I/Hae III、Pst I/Rsa I、Pst I/Taq I)分别进行酶切,获得基因组代表性DNA片段并用于文库构建。根据多态性克隆数和多态性率确定Pst I/Rsa I酶切组合为最优降低基因组复杂度方法。之后从Pst I/Rsa I基因组代表性DNA片段文库中扩增获得3360个片段,以此为多样性芯片探针进行芯片点制,杂交筛选获得18个大黄鱼体长相关DAr T候选标记。经过新群体样本再次验证,仍有8个DAr T标记与体长相关。本研究有助于选育生长性状优良的大黄鱼群体。     

细胞色素b基因序列与7种石首鱼类的系统进化

通过比较一段381bp细胞色素b基因序列，分析了石首鱼科7种石首鱼的系统发育关系．该序列有51个单变异多态位点、128个简约信息多态位点，对应的氨基酸序列有41个氨基酸变异位点．根据Kimura 2参数构建的邻接树(NJ tree)和最大简约树(MP tree)都显示同样的结果：7种石首鱼类构成一个单系群．皮氏叫姑鱼位于单系群的基部，且与其他石首鱼分离时间很早；大黄鱼和棘头梅童鱼亲缘关系最近。并与钩牙皇石首鱼和波纹短须石首鱼构成姐妹群．黄姑鱼和鱿鱼也接近树的基部．     

大黄鱼生殖季节体长-体重关系的种内变异

鱼类体长和体重之间的关系，是研究鱼类生长的内容之一。在渔业资源及渔捞统计上，大量测量体长较之测量体重简易得多。因此，了解了某一鱼群体长-体重的关系，就可以根据体长组成，估计其渔获的重量组成状况，反之亦然。体长-体重关系还被用来作为判断数量变动状况的生物学征象之一。对我国烟台外海鲐鱼的研究也表明，在鲐鱼不同世代、不同年份的生长速度变化中，很显著的一个特征就是同一体长组的体重(纯体重)的改变，而且这种改变与该海区鲐鱼生殖鱼群的数量变动表现出一定的相关征象。 本文利用过去积累的资料，分析了大黄鱼Pseudosciaena crocea (Richardson)种内10个生殖鱼群的体长-体重关系的特点和种内变异。 由于大黄鱼属于卵子分次成熟排出的类型，生殖季节较长，同时性腺很重一一已发现雌鱼性腺最大者可达426克(占体重的29.9 %)，所以文中均采用除去性腺和消化道重量的纯体重。     

静水压休克诱导大黄鱼三倍体

采用静水压休克方法诱导大黄鱼三倍体，在水温20-26℃条件下，卵受精后2min用450kg/cm^2的静水压处理大黄鱼受精卵2min，三倍体诱导率65.6%，孵化率相对对照组达70%。文中还就处理条件与三倍体诱导率和胚胎存活率关系进行了讨论。     

溶藻弧菌的间接荧光抗体快速检测

建立了大黄鱼病原溶藻弧菌的间接荧光抗体检测方法，溶藻弧菌的特异性抗血清由新西兰兔制备，试管凝集法测定抗血清及交叉反应效价，吸附离心法去除交叉反应，荧光抗体为异硫氰酸荧光素标记的羊抗兔免疫球蛋白，现场检测对具典型弧菌病表症大黄鱼病原检出率为100％，表观健康大黄鱼病原检出率为30％，养殖海水检测结果均为阴性，结果表明，间接荧光抗体检测法不仅可以用于已感染发病大黄鱼的快速检测，而且还能用于已感染未发病大黄鱼的检测。     

大黄鱼病原菌──溶藻弧菌的ELISA快速检测研究

以灭活溶藻弧菌（0.05%甲醛，30℃,8h）制成菌苗，注射免疫实验兔获得抗血清。该抗血清经吸附后与副溶血弧菌、河流弧菌等10株对照菌株无交叉反应，用该抗血清进行溶藻水中溶藻弧菌浓度均低于最低检测限、外观健康大黄鱼肝脏中溶藻弧菌的阳性检出率为20%、患病大黄鱼的阳性检出率为80%，表明ELISA法不仅可以用于诊断大黄鱼的溶藻弧菌病，也可能检测无病症带菌大黄鱼。     

Ontogeny of immune organs during early development stage of P.crocea

A histological and ultrastructural study was performed on the development of the head kidney, thymus, and spleen in Pseudosciaena crocea aging in range from just hatching to the 60th day after hatching (DAH). Head kidney was first present on the 3rd DAH. Primordial haemopoietic stem cells were first observed in the head kidney which rapidly differentiate into different cellular types. Progenitor spleen was present on the 4th DAH, located close to the gut, which soon became rich in blood capillaries, red blood cells and thrombocytes. The thymus was obvious on the 4th DAH, and was located on either side of the upper corner of the opercular cavity, closely under the membrance of the opercuhr cavity. The thymus was the last lymphoid organ to appear but showed a quick development. This organ seemed to originate from haemopoietic stem cells migrating from the head region of the kidney. The thymus consisted of outer thymocytic and inner epithelioid zones. There was no obvious demarcation between them, but both zones were visible. Small lymphocytes appeared, or lymphoid organs become lymphoid, in the sequence thymus, head kidney and spleen. Only a small number of lymphocytes appeared in the later stages. Non-specific systems may play an important role in the immunocompetence mechanisms of P. crocea during its early development stage.