细胞穿膜肽转导大型海藻及对其光合作用的影响

细胞穿膜肽能够介导外源物质进入细胞,是一种简单高效的分子运输手段。传统的大型海藻外源物质转导方法较为复杂,并且效率偏低。目前尚没有将细胞穿膜肽应用于大型海藻的报道。本实验利用细胞穿膜肽九聚精氨酸(R9)对浒苔、紫菜和海带这三种常见的大型海藻进行转入,观察其转导效果,并测定转导后藻体光合作用效率的变化。实验结果表明,细胞穿膜肽R9能够成功的转入三种大型海藻,转入的效率与藻体细胞壁结构有一定联系;转导后藻体的Fv/Fm、ETR(I)和ETR(II)没有明显变化,说明R9对大型海藻的光合作用没有负面影响。本实验建立了一种新型的大型海藻外源物质转导方法,为今后的大型海藻育种,分子转化以及外源物质转入机制等研究奠定了基础。     

营养盐浓度和初始细胞密度对东海原甲藻与塔玛亚历山大藻种间竞争的影响

以我国东海2种重要赤潮原因种--东海原甲藻(Prorocentrum donghaiense)和塔玛亚历山大藻(Alexandrium tamarense)为研究对象,研究了高、低磷酸盐浓度以及初始细胞密度对这2物种种群增长与种间竞争的影响.结果表明,不同实验条件下2物种有不同的竞争结果,营养盐限制环境中主要表现为资源利用性竞争,东海原甲藻为竞争优势种;丰富营养盐环境中,种间竞争具有明显的密度依赖性,根据初始细胞密度的不同,2竞争物种既可以相互排斥,也可能共存.该结果与东海赤潮特征即2物种既可以分别形成单相型赤潮,又可以共同形成双相型赤潮相一致.     

应用FG细胞检测淋巴囊肿病毒中和抗体方法的建立

将提纯的淋巴囊肿病毒(LCDV)接种于牙鲆鳃细胞系(FG),可以观察到明显的细胞病变,半数细胞培养物感染量(TCID50)为22.88/40 μL.微量细胞病变中和实验显示患淋巴囊肿病的牙鲆血清以及通过免疫获得的兔抗LCDV血清对LCDV感染都具有明显的中和作用,具有中和效果的血清最高稀释度分别为1:64和1:160.本文建立的FG细胞检测LCDV中和抗体方法可以作为筛选LCDV中和抗体的有效途径,且重复性和稳定性较好.     

产四氢嘧啶中度嗜盐菌TA-4的分离和特性研究

从同安盐田土壤中分离到一株中度嗜盐菌TA-4,经过16S rDNA序列分析、形态学和生理生化特征分析,该茵株初步鉴定为盐单胞菌(Halomonas salina).TA-4能在2%-25%NaC1的培养基中生长,最适生长NaC1浓度为6%,最适生长温度为35℃,最适pH为7.0～8.0.在高盐条件下,TA-4能够在细胞内合成四氢嘧啶以维持渗透压的平衡,在15%培养基中其含量达到60.3mg/g细胞干重.渗透冲击试验表明TA-4细胞内的四氢嘧啶含量受培养基中的盐浓度调控,并且在低渗冲击时能够快速分泌到细胞外,在高渗冲击冲剂后的6h内又可以恢复到原来的90%以上.     

不同培养条件对坛紫菜叶状体体细胞发育分化影响的研究

本文以野生坛紫菜(Porphyra hatanensis)叶状体为材料,通过海螺酶酶解获得叶状体单离体细胞,探讨了细胞密度、光照强度对坛紫菜叶状体体细胞发育分化的影响.研究结果表明:细胞密度对坛紫菜叶状体单离体细胞的分裂、出苗具有明显的影响.其中,细胞培养3～5d时,分裂率随着细胞密度的增大而降低;5d时,1×103个/孔组的分裂速度显著大于其余各组的(p＜0.05);12～19d时,随着细胞密度的增大,体细胞出苗率相应减小.光照强度对坛紫菜叶状体单离体细胞的分裂、出苗也具有显著影响.细胞培养5d时,分裂率随着光照强度的增大而增大;5-7d时,体细胞分裂速度随着光照强度增大而增大;9～19d培养期内,出苗率随着光照强度的增大而增大.本实验结果为坛紫菜转基因育种等研究提供了可资借鉴的基础资料.     

强肾扶正汤合含铂化疗方案治疗非小细胞肺癌45例临床观察

目的：观察强肾扶正汤合含铂化疗方案治疗非小细胞肺癌的临床疗效。方法：将90例非小细胞肺癌患者随机分为2组,每组各45例。对照组单用含铂化疗方案治疗,治疗组在对照组治疗基础上加强肾扶正汤治疗。2组均治疗3个月后比较综合疗效、KPS评分及不良反应发生情况。结果：总稳定率治疗组为75.56%,对照组为51.11%,组间比较,差异有统计学意义（P＜0.05）;2组KPS评分治疗前后组内比较及治疗后组间比较,差异均有统计学意义（P＜0.05）;不良反应发生率治疗组为15.56%,低于对照组的33.33%,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论：强肾扶正汤合含铂化疗方案可提高非小细胞肺癌治疗效果,且毒副作用小,安全性较高。     

强心安神方对阿霉素致大鼠心肌损伤模型心肌细胞能量代谢的影响

目的：通过研究强心安神方对阿霉素性心肌损伤大鼠模型心肌酶、心肌细胞线粒体呼吸功能和细胞色素C氧化酶活性（COX）的影响,探讨该药的作用机制。方法：将Wistar大鼠分为正常对照组、模型组、西药组及强心安神方低、高剂量组,对除正常对照组外的其余组大鼠采用腹腔注射阿霉素法制备心肌损伤模型,予药物干预4周,检测各组大鼠血清心肌酶[包括肌酸激酶同工酶（CK-MB）及乳酸脱氢酶（LDH）的表达,提取大鼠心肌细胞线粒体测定线粒体呼吸功能（呼吸控制比,RCR）及COX活性。结果：与正常对照组比较,模型组CK-MB、LDH表达均升高,COX活性增加,差异有统计学意义（P＜0.01或P<0.05）;强心安神方高、低剂量组大鼠各项指标与西药组比较,差异均有统计学意义（P＜0.05）,强心安神方高、低剂量组之间各项指标差异无统计学意义（P>0.05）。结论：强心安神方对损伤心肌细胞的保护作用可能与其降低CK-MB及LDH、改善心肌细胞线粒体呼吸功能及COX活性有关。     

激光显微切割条斑紫菜叶状体的参数优化

本研究以经济红藻条斑紫菜(Pyropia yezoensis)为研究对象,应用激光显微切割技术(Laser Microdissection,LMD)分离不同时期、不同部位、不同组织紫菜叶状体细胞团.统计细胞团中成活细胞比例,测定成活率,并应用叶绿素荧光成像法测定成活细胞光合活性,建立适合不同类型细胞的激光显微切割流程....     

基于网络药理学与体外细胞实验探讨复方清痹片治疗类风湿性关节炎的作用机制

目的：基于网络药理学与体外细胞实验探讨复方清痹片治疗类风湿性关节炎(RA)的作用机制。方法：基于TCMID、TCMSP和DrugBank数据库筛选复方清痹片的活性成分并预测潜在活性成分靶点;基于GeneCard、OMIM等数据库筛选RA疾病靶点;明确复方清痹片活性成分与RA的共同潜在靶标;利用STRING数据库和Cytoscape软件构建蛋白质-蛋白质相互作用（PPI）网络,并通过DAVID数据库进行基因本体（GO）功能及京都基因与基因组百科全书（KEGG）通路富集分析,RT-PCR检测复方清痹片对肿瘤坏死因子（TNF-α）诱导的人类风湿性关节炎成纤维样滑膜细胞（HFLS-RA）模型白介素6（IL-6）、TNF-α、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶1（AKT1）和血管内皮生长因子A（VEGFA）mRNA表达的影响。结果：筛选出217种潜在活性成分以及158个潜在靶点;IL-6、TNF、AKT1、白蛋白（ALB）、VEGFA等是复方清痹片治疗RA的关键靶点;复方清痹片主要通过炎性因子、趋化因子、免疫调控等信号通路来发挥治疗RA的作用。复方清痹片能够抑制HFLS-RA增殖,下调IL-6、TNF、AKT1和VEGFA mRNA的表达,这与网络药理学预测的结果相一致。结论：本研究揭示了复方清痹片治疗RA“活性成分-靶点-通路”的复杂关系,为后续该药的临床应用提供了研究基础。     

血根碱对鼻咽癌CNE2细胞增殖和迁移的影响

目的：探讨血根碱（SAN）对鼻咽癌细胞（CNE2细胞系）增殖和迁移的影响及其可能的作用机制。方法：采用MTT法检测SAN对CNE2细胞增殖的影响,采用细胞划痕实验研究SAN对CNE2细胞迁移能力的影响,采用Western Blot技术检测SAN对CNE2细胞增殖细胞核抗原（PCNA）和上皮-间质转化（EMT）相关蛋白E-钙黏蛋白（E-Cadherin）、N-钙黏蛋白（N-Cadherin）、波形蛋白（Vimentin）表达水平的影响。结果：MTT法检测结果显示,与阴性对照组比较,SAN可以抑制鼻咽癌CNE2细胞的增殖,而且SAN浓度越高,其抑制效应越显著（P<0.05）。细胞划痕实验结果显示,与溶剂对照组比较,SAN可以抑制鼻咽癌CNE2细胞迁移,而抑制效应与药物浓度相关（P<0.05）。Western Blot检测结果显示,与溶剂对照组比较,SAN能降低CNE2细胞中增殖相关蛋白PCNA和EMT相关蛋白N-Cadherin、Vimentin的表达水平,提高E-Cadherin的表达水平（P<0.05）。结论：血根碱能抑制鼻咽癌细胞增殖和迁移,可作为治疗鼻咽癌的潜在药物开展进一步研究。