海洋真菌来源丁内酯I的单胺氧化酶抑制活性及结构类似物虚拟筛选

【目的】为研究海洋土曲霉(Aspergillus terreus)C23-3的次级代谢产物中的单胺氧化酶抑制剂及其抑制作用类型,借助计算机模拟方法探讨同类型化合物对单胺氧化酶的潜在抑制活性及构效关系,以开发单胺氧化酶抑制剂。【方法】采用活性引导下的色谱方法分离纯化得到活性化合物,采用核磁共振、质谱、圆二色谱分析鉴定其结构,采用酶标比色法评价化合物对单胺氧化酶抑制作用。使用Autodock vina对其结构类似物进行抑制单胺氧化酶活性虚拟筛选。【结果】1)分离鉴定得到一个具有单胺氧化酶抑制活性的化合物丁内酯I;2)丁内酯I对单胺氧化酶A和单胺氧化酶B的抑制作用为可逆非竞争性抑制,对单胺氧化酶A的半抑制浓度(IC₅₀)为21.45μmol/L,抑制常数K_i=6.27μmol/L;对单胺氧化酶B的IC₅₀为24.16μmol/L,K_i=12.61μmol/L;3)分子对接显示丁内酯I可与单胺氧化酶形成多个氢键,五元内酯环为α,γ?二芳基取代、含有苯并吡喃或苯并呋喃基团的aspvinone类丁内酯化合物在虚...     

维生素E和硒互作对凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)抗氧化系统的调节作用

采用二因素三水平设计试验,用添加不同水平配比的VE和Se(mg/kg)的饵料G0(0,0)、G1(200,0.2)、G2(200,0.4)、G3(200,0.8)、G4(400,0.2)、G5(400,0.4)、G6(400,0.8)、G7(800,0.2)、G8(800,0.4)、G9(800,0.8)投喂凡纳滨对虾,研究VE和Se对体长3cm左右凡纳滨对虾体液抗氧化系统的影响,试验进行4周。结果表明,第2周时,VE、VE和Se对O2?、酚氧化酶(PO)、血清总抗氧化能力(T-AOC)有显著影响(P0.05);Se对PO、血清和肝胰腺中T-AOC以及肝胰腺中GPx有显著影响(P0.05)。第4周时,VE和Se协同作用对4种抗氧化指标都有显著影响(P0.05)。第2、4周时,抗氧化酶活力比第0周显著升高。对O2?的研究发现,在第2和第4周时,G8组血细胞O2?最多。第2周时,血清PO在G5、G9组活力最高(P0.05),两组间差异不显著(P0.05);血清和肝胰腺中T-AOC在G2、G3组最高(P0.05);对虾肝胰腺中GPx酶活力在G3和G5组达到最高(P0.05),两组间差异不显著(P0.05)。第4周时,G7组PO和GPx活力最高,G9组T-AOC活力达到最高(P0.05)。研究结果提示:添加适量的VE和Se能显著提高对虾抗氧化能力,VE和Se对抗氧化系统具有随时间变化的动态调节作用,VE和Se之间存在交互作用。当在基础饵料中分别添加VE和Se在400mg/kg、0.4mg/kg时,凡纳滨对虾机体抗氧化能力整体达到平衡,能有效抵制氧自由基的损伤。     

Effects of several immunostimulants on phenoloxidase and hemocytes of the crab Charybdis japonica

To investigate the stimulating effects of immunostimulants on the autogenous immunocompetence of crabs and the possible mechanisms involved, the immunostimulating effects of β-1,3-glucan, lipopolysaccharide (LPS), inactivated Vibrio harveyi and Vibrio anguillarum on phenoloxidase (PO) and hemocytes of Charybdis japonica were investigated in this study. It was found that the yields and the enzymatic activities of purified PO in C. japonica increased significantly after the crabs were treated with immunostimulants, while the unit enzymatic activities remained almost the same. After treatment with β-1,3-glucan and LPS, the amount of rough endoplasmic reticulum (RER) and the number of mitochondria in both semigranular cells and granular cells increased greatly, and the number of cytoplasmic granules decreased but with enlarged volume. However, the corresponding characteristics of hyaline cells remained almost the same. On the other hand, the number of granules in semigranular cells decreased greatly, and the number of mitochondria of hyaline cells increased greatly, after treatment with inactivated vibrios. It may be concluded that the effect of polysaccharide immunostimulants on the innate immune system of C. japonica is different from that of inactivated vibrio immunostimulants. The immunity-enhancing mechanism of polysaccharides in crab autogenous immunocompetence is probably accomplished by the increased yields of PO and total PO activities, while that of inactivated vibrios is probably accomplished by the partially increased yields of PO and total PO activities as well as the significantly improved phagocytotic abilities of semigranular cells and hyaline cells.     

氟苯尼考对菲律宾蛤仔抗氧化酶活性的影响

通过室内模拟实验研究了氟苯尼考对菲律宾蛤仔体内超氧化物歧化酶(SOD),过氧化氢酶(CAT),过氧化物酶(POD)和谷胱甘肽还原酶(GR)活性的影响.结果表明,培养7 d后,在氟苯尼考的作用下,菲律宾蛤仔内脏团和肌肉组织的SOD,CAT,POD和GR的活性都发生了变化.低质量比氟苯尼考对SOD,CAT和POD酶活性具有诱导作用,而在高质量比条件下则表现为抑制作用.不同质量比的氟苯尼考对菲律宾蛤仔内脏团和肌肉组织中的GR活性都有明显的抑制作用,且随着氟苯尼考质量比的增加抑制作用加强.     

墨西哥刺参对大鼠脂质代谢的调节作用

研究墨西哥刺参(Isostichopus fuscus)对大鼠脂质代谢的调节作用及其机理.采用灌胃高脂乳剂方法建立实验性高胆固醇血症大鼠模型,检测模型大鼠血清总固醇(Total cholesterol, TC)、甘油三酯(Triglyceride, TG)、低密度脂蛋白胆固醇(Low density lipoprotein cholesterol, LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(High density lipoprotein cholesterol, HDL-C)含量;肝脏TC、TG含量和肉毒碱棕榈酰转移酶-1(Carnitine palmitoyl transterase-1, CPT-1)、过氧化物酶体β-氧化酶系(peroxisomal β-oxidation enzymes)、磷脂酸磷酸酶(Phosphatidic acid phophyhydrolase, PAP)等脂质代谢相关酶活力;粪便总脂质、TC和胆汁酸含量.实验结果显示,墨西哥刺参能显著降低高胆固醇血症大鼠血清TC(P<0.01)、LDL-C(P<0.05)含量及LDL-C/HDL-C(P<0.05);显著降低肝脏TC(P<0.01)、TG(P<0.01)含量,提高肝脏CPT-1(P<0.01)、peroxisomal β-oxidation enzymes(P<0.05)和PAP(P<0.05)活力;显著提高粪便中总脂质(P<0.01)、TC(P<0.01)和胆汁酸(P<0.01)含量.提示墨西哥刺参能有效调节高胆固醇血症大鼠脂质代谢,其主要作用机理是促进脂质在体内的分解代谢,同时抑制消化道内脂质的吸收.     

6种帘蛤科贝类及4个地理种群文蛤线粒体COI基因片段序列分析

对文蛤(Meretrix meretrix L.,1758)、青蛤(Cyclina sinensis G.,1791)、硬壳蛤(Mercenaria mercenaria L.,1758)、江户布目蛤(Protothaca jedoensis L.,1874)、薄片镜蛤(Dosinia corrugata R.,1850)和菲律宾蛤仔(Ruditapes philippinarum A.,1850)6种帘蛤科贝类和4个地理种群文蛤(大连、连云港、湛江、防城港)的细胞色素c氧化酶亚基I(COI)基因片段的核苷酸序列进行了分析,以探讨这一序列在种质鉴定、种群遗传结构和分子系统发生研究中的应用价值.测序结果表明,所有物种扩增片段长度均为709 bp,序列A+T含量(62.2%~67.6%)明显高于GC含量.物种间共有变异位点311个,其中简约信息位点202个;文蛤4个地理种群间共有变异位点46个,其中简约信息位点2个.此区段共编码235个氨基酸,种间共有氨基酸变异位点85个;文蛤种群间只有1个氨基酸变异位点.以COI基因片段序列为标记,用大竹蛏(Solen grandis)作外群,构建了帘蛤科贝类的系统发生树,其拓扑结构显示4个地理种群文蛤首先聚为1个单元,然后与青蛤聚在一起,最后所有帘蛤科物种聚为一枝,与外群相区别,其结果与传统形态分类基本一致,说明COI基因适合作为该科贝类种群遗传结构和系统发生研究的分子标记.     

基于COI序列分析东海区四指马鲅（Eleuther onema tetradactylum）的种群遗传结构

采用COI基因片段研究了东海区象山（xs）、乐清（YQ）和宁德（ND）三个四指马鲅群体的遗传多样性和种群遗传结构。在90个四指马鲅个体中,共检出单倍型13个,包括变异位点23个,其中简约信息位点14个。在三个种群中,YQ群体具有最高的单倍型多样性和核苷酸多样性水平,但整体上,三个群体的遗传变异水平均比较低。中性检验结果表明,三个群体内部在分子水平可能存在自然选择作用。NJ系统发生分析发现,YQ部分单倍型与XS和ND群体聚在一起,而与另一部分YQ群体遗传分化较大。AMOVA分析显示,遗传差异主要来自于群体内部（79．66％）。     

海州湾条斑紫菜养殖对浮游藻类群落结构及遗传多样性的影响

为了研究条斑紫菜(Porphyra yezoensis)养殖对江苏海州湾浮游藻类群落结构及遗传多样性的影响,于江苏省海州湾条斑紫菜养殖及非养殖海区各设置4个采样位点,采集表层海水,提取海水中浮游藻类的总DNA,PCR扩增浮游藻类核酮糖1,5-二磷酸羧化/氧化酶大亚基(rbc L)基因片段,构建了养殖及非养殖海区rbc L片段质粒文库。在文库中随机选择50个阳性克隆并测序。经比对分析,在条斑紫菜非养殖区发现8种海洋微藻,隐鞭藻占总克隆数22%,海链藻和骨条藻分别占6%和2%;养殖海区发现10种微藻,其中异丝藻占总克隆数22%,优势度明显,仅3种微藻为二海区共有(骨条藻、隐鞭藻及小球藻),表明紫菜养殖及非养殖区浮游藻类群落组成差异显著。条斑紫菜非养殖区及养殖区的浮游藻类香农指数均值分别为3.273和3.654,均匀度指数均值分别为1.090和1.040,显示养殖区浮游藻类遗传多样性较丰富,而群落的成熟度与稳定性非养殖区高。研究证实,表层海水浮游藻类群落结构及组成是动态的,条斑紫菜的养殖行为形成浮游藻类群落结构及遗传多样性较大差异性。     

Molecular phylogeny of familiar flatfish species(Pleuronectidae) in the northwestern Pacific Ocean based on mitochondrial cytochrome oxidase I gene

A molecular phylogenetic analysis was undertaken to evaluate the present systematic status of commercially familiar Pleuronectidae fishes in the northwestern Pacific Ocean. We sequenced a 529 bp fragment of the mitochondrial DNA （mtDNA） COl gene from 34 individuals of these familiar flatfishes from 11 species of nine genera collected in China and Japan. Genetic relationships among haplotypes of specimens from 11 species for COI gene data were reconstructed using the neighbour-joining method and the maximum parsimony （MP） method. The resulting molecular phylogeny of the 11 species, with a few exceptions, supported the existing taxonomy which was based largely on the morphological characteristics. The most noteworthy findings were that the genus Pleuronichthys diverged before deriving of the common ancestor for the other species; the stone flounder, Kareius biocoloratus, should belong to the genus Platichthys with the latin name Platichthys biocoloratus and the genus Verasper was not the extraordinary differ- entiation from the other species in family Pleuronectidae. The resultant phylogenetic trees were also consistent with multiple origins of direct development within family Pleuronectidae. New proof not only for further illuminating the multiple origins of Pleuronectidae but also for confirmation of the evolutionary relationships among groups in the family will be supported.     

微小亚历山大藻对黑鲷仔鱼的抗氧化酶和ATPase的胁迫影响

研究了暴露于微小亚历山大藻藻液中的黑鲷仔鱼其超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、过氧化物酶(CAT)和Na+-K+-ATPase酶活性在4d时间内的变化,结果表明,微小亚历山大藻藻液对仔鱼的GSH-PX和CAT活性诱导作用明显,尤其对处于染毒时间2d内,这种作用较强,但随着实验时间的延长又表现出抑制作用。微小亚历山大藻藻液对SOD也有强烈的诱导作用,这种作用可持续3d,但随后则表现为抑制作用。仔鱼的3种酶活性与染毒的藻液均符合较明显的剂量-效应关系,即实验藻液浓度越大,对酶活性的抑制率越低,对生物毒性越大。但藻液对于Na+-K+-ATPase酶却表现出强烈的抑制作用,显示出浓度-效应关系。其与上述3种酶的活力变化可以一起作为水体中藻液污染的生物指示器。