Genetic variation in two sea cucumber （Apostichopus japonicus） stocks revealed by ISSR markers

Sea cucumber Apostichopus japonicus samples were collected in Changdao, Penglai (PL), 27 individuals, and Lingshandao, Qingdao (QD), 30 individuals, in the Shandong Peninsula, China. Ten SSR primers were used to assess the genetic variation and relationship between and within the two stocks. Respectively, for each stock, the percentage of polymorphic bands was 85.2% and 86.9%; the gene diver- sity was 0.360 5 and 0.342 8; and the Shannon’s information index was 0.515 0 and 0.499 0. At species level, the percentage of polymorphic bands was 92.2%, the total gene diversity was 0.378 9 and the Shannon’s information index was 0.550 4. The coefficient of overall genetic differentiation and the ge- netic distances between the stocks were also calculated to be 0.073 0 and 0.079 6 using the POPGENE program. Results show that the genetic diversity of the two stocks is still large but the genetic distance between the two stocks is close. A dendrogram was constructed for the 57 individuals from the two stocks, showing that the genetic structure was unitary for PL stock but complex for QD stock.     

日本对虾血细胞分类、密度及组成

对日本对虾(Penaeus japonicus)血细胞进行超显微结钩观察,提出血细胞分为无颗粒细胞、小颗粒细胞和大颗粒细胞3类。血细胞密度因蜕皮期不同而异,C期较低,D_2期较高平均密度3.896～8.66×10~4cell/ml/ind。3类细胞比例为0.6～2.7,79.2～84.4,14.8～20.1％。当镰刀菌感染时,血细胞密度下降为对照组的54.3％,小颗粒细胞比例减少,大颗粒细胞增加。当养殖密度增加及水温降低时,血细胞密度不同程度下降,组成比例也发生变化。     

大亚湾日本对虾放流技术和增殖效果研究

1992年至1994年在大亚湾开展了日本对虾Penaeusjaponicus的放流增殖研究,以探讨恢复业已衰退资源的可行性。标志放流体长53—109mm的日本对虾11188尾,生产性放流体长20—41mm的日本对虾苗640万尾。放流增殖效果明显,标志放流的回捕率为2．91％,生产性放流的回捕率为9．3％。大亚湾内放流的日本对虾,不作季节性远距离洄游,只作季节性短距离的浅水-深水区移动。     

聚合酶链反应(PCR)检测花鲈鳗弧菌感染

从海洋鱼类重要病原菌———鳗弧菌基因库中选择金属蛋白酶基因为目标检测基因 ,以此设计一对引物 ,建立聚合酶链反应 (PCR)检测鳗弧菌的方法 ,并对此方法的灵敏性和特异性进行了研究 ,结果表明该方法对鳗弧菌的检测快速、灵敏。对人工感染鳗弧菌的花鲈组织样品进行检测 ,该方法能识别组织样品中极微量的鳗弧菌。     

转录组测序解析刺参波里氏囊腔与体腔中体腔细胞对吐脏胁迫的响应差异

刺参的体腔细胞大量存在于体腔液与水管系统内,广泛参与机体的营养输送、代谢以及免疫等多种功能.刺参吐脏时,体腔中体腔细胞近乎排尽,而后迅速恢复.波里氏囊是刺参吐脏后仅存的内脏器官,囊腔内体腔细胞在吐脏后也快速增加,表现出积极的响应.为研究探讨刺参吐脏后再生早期体腔细胞快速增加的作用与意义,本文分别对刺参吐脏后6 h与吐脏...     

红外三级鉴定法快速鉴别龙虾的4个品种

为鉴别不同龙虾(Panulirus),作者选用一维红外光谱(FTIR)、二阶导数谱(SDIR)和二维相关红外光谱(2DIR)来逐步提高谱图的分辨率,使得4个品种的差异性逐渐明显。结果表明:在一维谱图上,波士顿龙虾(Homarus americanus)没有酰胺Ⅱ带的特征峰;日本龙虾(Panulirus japonicus)在1 333 cm–1处有尖峰。在二阶导数谱上,日本龙虾在1 333 cm–1处尖峰更明显,且在1 535cm–1处有吸收峰,与其他品种的差异表现得更明显。波纹龙虾(Panulirus homarus)在1 567cm–1处有尖峰,锦绣龙虾(Panulirus ornatus)在1 567 cm–1处的峰弱而不明显,故可以区分出波纹龙虾和锦绣龙虾。在二维相关红外谱图上,进一步佐证了4种龙虾所含的氨基酸、蛋白质在种类和含量上有所差异。所以红外三级鉴定法可以对龙虾进行快速、有效的鉴别。     

鲈鱼脑垂体促性腺激素分泌细胞与性腺发育的关系

用Ｈｅｉｄｅｎｈａｉｎ－Ａｚａｎ三色法、Ｃａｎｅｒｏｎ Ｓｔｅｅｌｅ法和ＰＡＰ免疫细胞化学技术,对鲈鱼脑垂体促朱激素（ＧＴＨ）分泌细胞进行定位,然后确定该细胞发育成熟性腺发育之间的相互关系。可为人工培育鲈鱼亲鱼时,适时用外源性激素诱发其性腺提早成熟,提供科学依据。     

海洋无脊椎动物组织总RNA提取方法的探讨

RNA提取是分子生物学研究的基础实验,由于海洋无脊椎动物组织结构以及体成分的特殊性,导致现有的RNA提取方法不能完全胜任此工作。作者以刺参(Apostichopus japonicus)、栉孔扇贝(Chlamys farreri)和凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)为研究对象,对异硫氰酸胍RNA提取方法进行了改进。栉孔扇贝和凡纳滨对虾的肝胰腺富含RNase,刺参体壁结构致密、富含胶原蛋白,而成熟期精巢富含多糖,因此在这些动物组织中提取RNA时,在原有方法基础上增加了瞬时匀浆、增加氯仿及酸性酚的抽提次数,或添加高盐溶液等方法。实验结果显示,改进方法后获得的RNA具有完整的28S、18S和5S r RNA条带,A260nm/A280nm和A260nm/A230nm比值分别为1.89~2.0和1.98~2.11,β-actin基因扩增条带清晰,所获得的组织RNA的纯度和质量符合c DNA合成和基因功能研究的要求。     

微卫星标记在刺参(Apostichopus japonicus)人工繁育中亲本识别的应用

选取8个高多态性的微卫星位点, 对240只刺参(Apostichopus japonicus)幼体和14只疑似亲本进行了亲缘关系的鉴定。通过检测, 8个微卫星位点共得到53个等位基因, 平均等位基因数为6.63; 观察杂合度在0.730—0.902; 各位点的多态信息含量为0.696—0.836。通过亲缘关系分析软件CERVUS 3.0分析, 微卫星位点累积排除概率分别为0.9934、0.9997、0.99999。基于排除法个体基因型判定, 有37个子代有1个候选亲本, 194个子代有2个及以上候选亲本; 基于似然法判定, 置信度为80%时, 有198个子代个体找到最似亲本。综合排除法和似然法的亲权鉴定, 成功为229个子代个体找到它们的亲本, 鉴定成功率达95%以上。本研究结果可为刺参育种工作中亲本识别及家系分析提供技术支持和理论依据。     

花鲈仔、稚、幼鱼摄食习性与生长的研究

分析了花鲈仔、稚、幼鱼的摄食习性与生长.结果表明,在水温为15.5～16.5℃时,花妒仔鱼孵出约140h左右开口摄食,开口饵料为小型臂尾轮虫.全长10mm左右的仔鱼可摄食卤虫幼体,全长11mm左右的个体可摄食枝角类.对431尾仔、稚、幼鱼观察结果,在实验条件下其摄食率高达99.1%,胃饱满系数波动于2.38%～16.48%之间,日摄食指数在45%～60%.其摄食强度具明显的昼夜节律,以16:00～20:00胃饱满度最高.仔、稚鱼夜间基本不摄食,部分幼鱼个体少量摄食.仔、稚、幼鱼个体间生长速度具有一定的差异性.其体重与摄食量的关系符合直线方程y=0.1018+8.3261×10-2x;全长与体重的相关关系可用ω=1.6473×10-3L3.4743表示,全长与日龄的关系式为L_t=5.5242e1.9681×10-2D;体重与日龄的回归方程为ω=0.5836e6.9208×10-2D.